Способ получения 3-кето-с19-стероидов

 

Союз Советских

Социалистических

Республик изоьектения

И ПАТЕНТУ

Заьиси1мый от патента №вЂ”.Ч.Кл. С 12d 13!00

Заявлено 15.Х.1969 (№ 1371168/31-16) Приоритет 07.11.1969, № WP 120/137723, ГДР

Гррударстврна|й ирмитет

Совета Министров ССбр пв дряам изобретений и открытий

Опубли:ковано 29.VIII.1973. Бюллетень ¹ 36

УДК 615.45 (088.8) Дата опубликования описания 4.1.1974

Авторы изобретения

Иностранцы

Курт Шуберт, Винфрид Шуманн и Клере Херхольд (Германская Демократическая Республика) Заявитель

Иностранное предприятие

«Дойче Академи дер Виссенштафтен цу Берлин» (Германская Демократическая Республика) СПОСОБ ПОЛУЧЕН ИЯ 3-КЕТО-С19-СТЕРОИДОВ

Изобретение относится к ооласти синтеза стероидных Гормоно в.

Ранее Л4-3- кетостероиды микробиологическим путем не получали.

Целью изобретения является упро це ure способа путем изыскания микроорганизмов, обеспечивающих введение кислородной связи в

3 — положение З-дезокси-С-19-стероидов.

Достигается это тем, что 3-дезокси-С-!9-стсроиды, па пример, ненасыщенные в кольце А

3-дезокси-С-19-стероиды растворяют в органическом растворителе, например,в ацегоне, оорабатывают аэробной культурой рода Corynebacterium streptomyces, процесс форментации ведут 10 — 100 час и выделяют целевой продукт .известными приемами.

Лэ-3-дезокси- С19- стероиды обрабатывают культурой Corynebacterium spec.

Л4-3-дезокси- С19- стероиды обрабатывают культурой Streptomyces spec.

Л"-3,5-3-дезокси-С19-стероиды обр абатывают культурой Corynebacterium spec.

Пример 1. 20 колб объемом 500 ял, содержащих по 50 и,г питательной среды (10 г декстрозы, 10 г бактериологического пептона, 1О,ял казеинового гидролизата, 2 г дрожжевого экстра,кта и 6 г хлористого натрия в

1000 мл водопроводной воды), засввают 11— ! 3-дневной культурой Streptomyces spec.

IMET109, выращенной на ахаре с овсяной мукой. Культивирова тие црав<яят при 28 С и встряхивании. Через 48 «ас в среду добавляют

100 яг Л -андростен-17-опа, растворенного в 10 .ил ацетона, и продолжают встряхивание еще 48 «ас. Затем культуру многократно экстрагируют эфиром, промывают экстракт 0.1 н. едким натром и дистиллированной водой, сушат и отгоняют растворитель. Кристаллический остаток очищают тонкослойной хроматото графией на силикагеле Д (Грайц-Делау) с добавлением флуоресцирующего индикатора в

cìeñu бензола с эфиром (2:3). Ультрафиолетовую положи тельную зону элюируют смесью эфира с хлороформом (1:1). После упарива-! ния элюата выделяется кристаллический осадок Л -а ндростен-3,17-диона.

Пример 2. Колбы с питательной средой засевают, как это описано в:примере 1, двухсуточной культурой Corynebacterium spec.

2о S.G 985, выращенной на агаре с мяоной водой и 2% глицерина. Культивирование проводят на вибрационном столе при 37 С. Через 48 час в среду добавляют 100 нг 5 -Лэ-андростен-17-она .в 10 .и.г смеси хлороформа с ацетоном (1:31 и продолжают встряхивание еще 72 час.

Затем культуру многократно экстрагируют хлористым метиленом, экстракт промывают

0,1 H. едким натром и дистиллированной водой, сушат и упаривают в вакууме. Экстракт предварительно очищают хроматографией на

396873

Предмет изобретения

Составн гель С. Щенева

Корректор В, Жолудева

Техрсд 3. Тараненко

Редактор Н. Спиридонова

Заказ 6514 Цад, в l925 Тираж 4G7 Подписное

Lll-и!ИПП (осударственного комитета Совета Министров СССР по делам паобретений и открытий

Москва,7К-35, Раушская наб., д. 4/5

Об>п тнп. Костромского управтспии издательств, полиграфии и книжной торговли колонке с силикагелем 0,2 — -0,3 .1>л> (ЧЕКСК).

Тонкую очистку производят методом тонкослойной хроматографии иа снликагеле с флуоресцирующим индикатором в смеси беизол» с эфиром (2:3). Злюирование производят смесью эфира с хлороформом (1:1). После упарнвания элюата выделяются кристаллический Л"-андростен-3,17-дион.

Пример 3. Колбы с питательной средой засевают, как это описано в примере 1, двухсуточной культурой Corynebacterium spe;.

1093, выращенной на агаре с мясной водой и

2% глицерина. Культивирование проводят На вибрационном столе при 28 С. Через 48 час в среду добавляют 100 мг Ла 5-андростси-17-она в 10 мл смеси хлороформа с ацетоном (1:3) и продолткают встряхивание еще 144 ——

192 час. Затем культуру многократно экстрагируют эфиром, экстракт, промывают 0,1 н. едким натром,и дистиллированной водой, сушат и упаривают. Очистку проводят, как это было описано в,примере 1,,получая Л -андростен-3,17-дион.

1. Спосоо получения 3-кето-С19-стероидов„ например, Л4-3-кетостероидов, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, 3-дезок;и-С19-стероидь>, например, .ненасыщенные в

Л кольце 3-дезокси-С19-стероиды растворяют и органическом растворителе, смешивающем10 ся с водой, например в ацетоне, обрабатывают аэробиой культурой рода Corynebacterium

streptomyces, процесс ферментации ведут

10--100 час и выделяют целевой продукт изиестнымн приемами.

15 2. Способ по п. 1, отличающиися тем, что

Ла-3-дезокси-С19-стероиды обрабатывают культурой Corynebacterium spec.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что

1 -3-дезокси- С19-стероиды обрабатывают

20 культурой Streptomyces spec.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что, Ла5-дезокси-С19-стероиды обрабатывают культурой Corynebacterium spec.