Штамм гриба aspeirg1llus niger ленинградский-1 для производства лимонной кислоты

 

4О7946

СО1ов Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Зависимое от авт. свидетельства №

М. Кл. С 12k 3 00

С 12d I j04

Заявлено 29.11.1972 (№ 1754305/28-13) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 10.Х11.1973. Бюллетень № 47

Дата опубликования описания 22.1 .1974

Государственный комитет

Совета Министров СССР оо делам изаоретений и открытий

УДК 663.131.576:661.734 (088.8) Авторы изобретения

Заявитель

Е. Я. Щербакова, 3. С. Караджова и В. II. Ермакова

Ленинградский межотраслевой научно-исследовательский институт пищевой промышленности

ШТАММ Г! ИВА ASPF9GILLUS NIGER ЛЕНИНГРАДСКИЙ-1

ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЛИМОННОЙ КИСЛОТЫ

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается получения нового штамма гриба Aspergillus niger Ленинградский-l, используемого для получения лимонной кислоты.

Известен штамм № 288)9. днако он способен накапливать большое количество побочных кислот, щавелевой и глюконовой при культивировании на мелассных средах. В растворах, сброженных этим штаммом, в сумме образовавшихся кислот (100%) лимонная составляет в среднем 77%, щавелевая 15%, глюконовая около 8%. Наличие побочных кислот в сброженных растворах затрудняет их химическую переработку.

Предлагаемый штамм Леьншградский-1 при глубинном выращивании на мелассных средах образует в основном лимонную кислоту и небольшое количество побочных кислот.

Штамм имеет следующую характеристику.

М о р ф о л о г и я. У пятисуточной культуры на среде Чапека конидиальные головки круглой формы, диаметр их сечения 55 — 178 мм, средний диаметр головок 132 мкм. Вздутия конидиеносца (пузырьки) шаровидной или продольно вытянутой формы диаметром от

20Х16 до 99Х99 мкм, средний диаметр 50Х

Х50 мкм. Стеригмы двуслойные правильной формы. Размер стеригм первого порядка 5,6—

20,2 мкм, в среднем 10,4 мкм, Стеригмы второго порядка размером 4,5 — 9 мкм, в среднем

6,3 мкм. Колонии круглые с толстой шиповидной кремовой оболочкой. Средний диаметр конидий 4,1 мкм. Конидиеносцы прямые бесцветные, длина конидиеносцев от 330—

1320 мкм, ширина 11,3 — 20,2 мкм.

Антагонистические свойств а. Подавляет развиiие бактерий Bacterium coli, Acrobacter cloacae, Bacillus subtilis, Baceillus

10 mesentericus, сопутствующие производству лимонной кислоты.

Культуральные и биохимические п р и з и а к и. Сусло-агар. Колония быстро растущая, достигающая на пятые сутки в диа15 метре в среднем 9,3 см. Окраска колонии светло-бежевая. Воздушный мицелий сильно развит. В центре колонии конидиальные головки расположены плотно. От центра к краю колонии конидиальных головок меньше, Но

20 сильно развит воздушный мицелий. По краю колонии в радиусе 1 см светлая зона с незрелыми белыми конидиальными головками, плотно прижатыми к субстратному мицелию.

Обратная сторона колонии гладкая белая.

25 С р ед а Ч а п е к а. Колония диаметром

8,7 см, Окраска колонии бежевая. В нентрс колонии конидиальные головки крупные, расположены плотно, образуют возвышение.

К краю колонии величина конндиальных го30 ловок уменьшается. Нарастающий край в ра407946

Предмет изобретения

Составитель М. Ларина

Техред 3, Таранеико

Корректор М. Лейзерман

Редактор Л. Трушина

Заказ 837715 Изд. № 296 Тираж 467 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, )К-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 диусе 0,3 см покрывают незрелые мелкие светлые конидиальные головки. Обратная сторона колонии гладкая белая.

Сбраживание мелассных сред.

При культивировании на мелассных средах глубинным и поверхностным способом выход лимонной кислоты от сахара мелассы увеличивается (72 — 91%).

Кроме того, при глубинном выращивании на мелассных средах штамм образует 94% лимонной кислоты и небольшое количество побочных кислот.

Пример. Посевной материал (конидии) штамма Aspergil lus niger Ленинградский-1 (Л вЂ” 1) получают при размножении сохраняемых конидий штамма на сусло-агаровой среде при 32 . Через 7 суток с 1 дм площади среды снимают 0,5 г конидий.

Для подращивания и роста мицелия приготавливают раствор из мелассы Елань-Коленовского сахарного завода заготовки 1970 г.

Во время варки мелассу обрабатывают желтой кровяной солью и щавелевокислым аммонием.

В 5 м ферментаторе приготавливают 3 мз мелассного раствора, содержание сахара в нем 2,8%, рН раствора 6,25. За 6 час до засева раствора 3 г конидий замачивают в 2 л стерильного мелассного раствора. B 5 м ферментаторе милеций подращивают в течение

19 час, после чего подросший мицелий поступает в 50 и ферментатор.

Для зарядки 50 м ферментатора приготавливают 27 м мелассного раствора с содержанием сахара 3,4%, рН раствора 6,4.

Через 24 час от начала зарядки в 50 м ферментатор доливают мелассный раствор.

Раствор на доливы приготавливают из мелассы Елань-Коленовского сахарного завода за. готовки 1971 г, во время варки обрабатывают желтой кровяной солью. Содержание сахара в подливаемом растворе 21 — 24o Раствор подливают порциями по 1 м через 1 час.

30 мин. Всего доливают 11 м раствора. С доливами введено в ферментатор 2428 кг сахара мелассы. Расход сахара на цикл 3428 кг, в пересчете на 46% (по сахару) мелассу

7451,2 кг.

Температура культивирования 32 .

При брожении в ферментатор поступает в среднем 950 м /час воздуха.

При таком режиме через 6 суток кислотность раствора достигает 7,25%, остается не4 сброженным 0,41 /о сахара. В сброженном растворе содержится 97,49 лимонной кислоты и 2,51% глюконовой; щавелевая кислота не образуется.

5 3а цикл было получено 2867,18 кг лимонной кислоты; съем лимонной кислоты с 1 м в сутки 8,19 кг, расход 46%-ной мелассы на 1 лимонной кислоты 2599 кг, выход лимонной кислоты от сахара 84 .

Штамм гриба Aspergillus niger Ленинград15 ский-1 для производства лимонной кислоты.

М о р ф о л о г и я. У пятисуточной культуры на среде Чапека конидиальные головки круглой формы диаметром 55 — 178 мкм, средний диаметр головок 132 мкм. Вздутия конидие20 носца шаровидной или продольной вытянутой формы диаметром от 20 ;16 до 99)(99 мкм, средний диаметр 50;к,50 мкм. Стеригмы двухслойные правильной формы. Размер стеригм первого порядка 5,6 — 20 мкм, в среднем

25 10,4 мкм, второго порядка 4,5 — 9 мкм, в среднем 6,3 мкм. Колонии круглые с толстой шиповидной кремовой оболочкой, средний размер конидий 4,1 мкм, конидиеносцы прямые, бесцветные, длина их 330 — 1329 мкм, ширина

30 11,3 — 20,2 мкм.

Антагонистические свойства. Подавляет развитие бактерий; Bacterium coli, Acrobacter сlоасае, Bacillus subtilis, Bacillus

mesentericus, сопутствующие производству ли35 монной кислоты.

К у л ь т у р а л ь н ы е п р и з н а к и. Суслоагар. Пятисуточпая колония диаметром 9,3 см, светло-бежевого цвета, сильно развит воздушный мицелий. В центре колонии конидиальные

40 головки расположены плотно, по краю колонии в радиусе 1 см — светлая зона с незрелыми белыми конидиальными головками, плотно прижатыми к субстратному мицелию, обратная сторона колонии гладкая белая.

45 Ср е д а Ч а п е к а. Колония диаметром

8,7 см бежевого цвета. В центре колонии конидиальные головки крупные, расположенные плотно, образуют возвышение. К краю колонии величина конидиальных головок умень50 шается. Нарастающий край в радиусе 0,3 см покрывают незрелые мелкие светлые конидиальные головки. Обратная сторона колонии гладкая, белая.