Способ приготовления препаратов в биологических макромолекул для электронной микроскопии

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

G01N1/36 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

ОП ИСАН И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (11) 5196IO

Со вв Советских

Социалистических

Реслублик (61) Дополнительное к авг. свид-ву (22) Заявлено 11.04.75 (21) 2122854/13 (51) М. Кл.- "G 01N 1/28 с присоединением заявки №

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изооретеннй н открытий (23) Приоритет

Опубликовано 30.06.76. Бюл. cievb № 24

Дата опубликования описания 04.08.76 (53) УДК 621.385,833.2 (088.8) (72) Авторы изобретения

Ю. Ю. Венгеров, В. И. Попенко и В. А. Кадыков

Институт молекулярной биологии АН СССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ

ПРЕПАРАТОВ БИОЛОГИЧЕСКИХ МАКРОМОЛЕКУЛ

ДЛЯ ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ вым напылением сплавом Р1 вЂ” Pd. Просмотр производят на электронном микроскопе.

Использование предлагаемого способа приготовления препаратов биологических макромолекул для электронной микроскопии дает возможность избежать привнесения белка в растворы биологических макромолекул и связанных с присутствием белка артефактов, а также наносить биологические макромолекулы

1О в большом диапазоне рН (от 3 до 11), что позВоляет наносить биологические макромолекулы в денатурирующих условиях.

Способ приготовления препаратов биологических макромолекул для электронной микроскопии путем создания на поверхности гипофазы пленки с расправленными макромолеку20 лами, о тли ч а ющи и ся тем, что, с целью повышения качества исследования путем устранения артефактов, для создания пленки на поверхности гипофазы используют слабо диссоциирующий буферный раствор.

Источник информации, принятый во внимание пр:.t экспертизе:

Methods in Enzymology 1968, 12, стр. 36, Изобретение относится к электронно-микроскопическим исследованиям.

Известен способ приготовления препаратов биологических макромолекул путем использования пленки денатурированного оелка на поверхности раздела гипофаза вЂ” воздух (1).

Однако известный способ не ооеспечивает высокого качества исследования.

С целью повышения качества исследования для создания пленки на поверхности гипофазы используют слабо диссоциирующий буферный раствор.

Пример. Нанесение ДНК фага ). для электронной микроскопии.

В качестве слабо диссоциирующего буфера используют аммонийацетат. Каплю спредируемого раствора (3 у/мл ДНК А,, 1 Ы аммонийацетатный оуфер, рН 5,о) осторожно наносят на поверхность гипофазы (О,о М аммонийацетатный оуфер, рН 5,5), Растекание по поверхности контролиру.ют по меткам талька. Затем электронно-микроскопической сеточкой, покрытой угольной пленкой, касаются поверхности полученного пятна вблизи от его центра. Избыток жидкости отсасывают фильтровальной бумагой. Сеточку промывают в этаноле (96%) и контрастируют кругоФормула изобретения