Способ приготовления антитоксического эритроцитарного диагностикума

 

С w-.

fI 1

ОП ЙСАН И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

„552086

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 12.12.74 (21) 2084727/13 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет

Опубликовано 30.03.77. Бюллетень № 12

Дата опубликования описания 13.04.77 (51) М. Кл.- А 61К 35/18

Государственный комитет

Совета Министров СССР (53) УДК 615.373.3 (088.8) А0 делам изобретений и открытий (72) Автор изобретения

И. Я. Мошиашвили (71) Заявитель

Московский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ АНТИТОКСИЧЕСКОГО

ЭРИТРОЦИТАРНОГО ДИАГНОСТИ КУМА

Изобретение относится к медицине, а именно к производству диагностикумов.

Известен способ приготовления эритроцитарных диагностикумов, заключающийся в том, что формалинизированные эритроциты стандартизируют путем приготовления 2,5%ной клеточной взвеси, тонизируют в течение

10 мин и сенсибилизируют в течение 30 мин (сенсибилизирующую зону антигена берут стандартную — 1 объем антигена на 5 объемов клеточной взвеси), Клетки отмывают в 2 объемах нормальной сыворотки кролика (1: 200) и взвешивают для стабильности в объеме нормальной кроличьей сыворотки того же разведения.

Известен также способ приготовления антитоксического эритроцитарного диагностикума, при котором эритроциты дефибринируют, фильтруют, отмывают, ресуспендируют, вновь фильтруют и отмывают, тонизируют (1: 20000) в течение 15 — 30 мин, отмывают, сенсибилизируют в течение 2 час варьирующей дозой концентрированного анатоксина (300 — 1500 ЕС или ЛФ), добавляют 40%-ный формалин с рН 7,2, отмывают, ресуспендируют физиологическим раствором с нормальной кроличьей сывороткой, а затем консервируют

40%-ным формалином.

Однако известные способы не обеспечивают высокой специфичности препарата.

С целью повышения специфичности препарата сенсибилизацию эритроцитов осуществляют в течение 19 — 20 час из раствора, содержащего в 1 мл дозу анатоксина, достаточную для приготовления 0,8 — 1,2 мл диагностикума, и весь процесс проводят в солевой среде.

10 Способ осуществляют следующим образом.

Эритроциты дефибринируют в стерильных условиях в течение 10 мин путем встряхивания со стеклянными бусами, фильтруют, отмывают 1/75 М буфером с рН 7,1 — 7,2, ресус15 пендируют 1/30 М буфером до 11 — 13%-ного содержания эритроцитов. Формалпнпзацпю ведут 35 — 40%-ным формалином, нейтрализованным едким калием при рН 7,2, в соотношении 4: 1 при комнатной температуре в те20 чение 1б час. Формалинизированные эритроциты фильтруют, отмывают, ресуспендпруют

1/15 М буфером с рН 7,2 до 2,5%-ной концентрации, добавляют в соотношении 1: 1 танин, разведенный тем же буфером (1: 40000), и

25 тонизируют в течение 9 — 10 мин при комнатной температуре. Затем тонизированные эритроциты вновь отмывают, ресуспендируют

1/15 М буфером с рН б,4 до 2,5%-ной концен552086

Составитель С. Малютина

Техред А. Овчинникова

Корректор Е. Хмелева

Редактор М. Дмитриева

Заказ 695/2 Изд, 11з 328 Тираж 654 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, К-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 трации, добавляют в соотношении 1: 1 анатоксин, разведенный тем же буфером до содержания анатоксина; достаточного для приготовления 1 мл диагностикума, и сенсибилизируют в течение 19 — 20 час при 37 С. Сенсибилизацию прекращают 0,4%-ным формалином, разведенным 1/15 М буфером при рН 6,4, через 50 — 60 мин эритроциты дважды отмывают от избытка анатоксина 1/30 М буфером с рН 7,2 и ресуспендируют до 2,5 /о-ной концентрации 1/15 М буфером, содержащим 0,4% формалина.

Весь процесс получения эритроцитар ного диагностикума ведут в фсфатном буферном растворе, содержащем 0,85о/о хлористого натрия.

Препарат хранят при температуре 4 10 С.

Замораживание не допускается. Срок годности препарата не менее 3 лет.

Формула изобретения

Способ приготовления антитоксического эритроцитарного диагностикума путем сенсибилизации анатоксином танизированных эритроцитов с последующей формалинизацией, 10 отличающийся тем, что, с целью повышения специфичности препарата, сенсибилизацию осуществляют в течение 19 — 20 час из раствора, содержащего в 1 мл дозу анатоксина, достаточную для приготовления 0,8 — 1,2 мл

15 диагностикума, и весь процесс проводят в солевой среде.