Способ прижизненного отбора свиней -доноров клеток красного костного мозга

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

И АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

„„ 572247

Союз Советских

Социалистических

Реслублик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 08.08.74 (21) 2053507/15 (51) М. Кл з А 01К 67/00 с присоединением заявки Ne (23) Приоритет

Опублпков",íî 15.09.77. Бюллетень Ае 34

Государственный комитет

Совета Министров СССР (53) УДК 1575.42(088,8) ло делам изобретений и открытий

Д»а опубликования описания 13.09.77 (72) Авторы изобретения (71) Заявитель

А. В. Пересадин, В. A. Зуев и Е. В. Михайловская

Всесоюзный научно-исследовательский институт вет а ной вирусологии и микробиологии

Я (54) СПОСОБ ПРИЖИЗНЕННОГО ОТБОРА СВИНЕЙ—

ДОНОРОВ КЛЕТОК КРАСНОГО КОСТНОГО МОЗГА

Изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для отбора наиболее продуктивных животных — доноров клеток красного костного мозга.

Известен способ прижизненного отбора жи- 5 вотных IIo установIeIIIIIo их генотипа по специфичсским показателям — ослкам сыворотки крови (1).

Недостатком известного способа является тО, что оп пс обеспечивает отбор свиней — — 10 доноров клеток красного костного мозга с повышенным содержанием названных клеток.

С целью отбора паибоIee родуктивных свиней — доноров клеток красного костного мозга по предлагаемому способу генотип жи- 15 вотных устанавливают по типам гаптоглобина и к донорам относят животных, имеющих генотип с медленными типами гаптоглобина

Hp 3 — 3, Hp 3 — 2, Hp 3 — 1 и Hp 3 — 1F сыворотки крови. 20

Установленная зависимость между генетически контролируемыми типами гаптоглобинОВ и Выходом клеток KpHcilorо костного мозга свиней позволяет в течение суток из имеющегося поголовья при жизни отобрать наибо- 25 лес продуктивных доноров, что способствует увеличению IIa 29 — 120% выхода указанных клеток, уменьшает потрсбность в животныхдонорах, исключает необходимость убоя низкопродуктивных животных II приводит к сни- 30 жению за счет этого себестоимости получаемой суспензии или культуры клеток.

На графике показана л инейная зависимость выхода клеток красного костного мозга (при концентрации 4>10 клеток/мл) от генотипа животных ro гаптоглобину сыворотки крови у 281 подсвинка трехмесячного возраста крупной бслой и муромской пород.

Число животных, обследованных в каждом генотипе, приведено ниже. еГноти 0 — 1 0 — 3 1 — 1 1 — 2 1 — 3 3 — 3

Число животных 16 5 87 7 118 48

Способ осуществля от следующим образом.

От животных, подлежащих отбору, из хвостовой, ушной или передней полой вен берется 5 мл крови. После ее свертывания сгусток обводится пастеровской петлсй или пипеткой, и пробирка или флакон с свернувшейся кровью помещается в термостат при 37 С на 1 ч, после чего на 1 ч в холодильник при 4 С. Затем цснтрифугированием при 3000 об/мин в течение 5 мин отделяют сыворотку крови, в которой методом элсктрофореза в 14,5 /О-ном крахмальном геле определяют типы гаптоглобинов. Режим электрофореза: 2 — 2,5V/ñì, бч, крахмал IIO Смитису, трис-цптратный гельбуфер и боратпо-литиевый электролит по Остергофу. После электрофореза гелевая пластин572247 ка разрезается на 3 пластинки — фореграммы, которые окрашиваются бензидиновым реактивом 2 — 3 ч в темноте. Бензидиновый реактив; 2 r бензидина растворяют в дистиллированной воде (1 л) при нагревании до кипения, после чего раствор охлаждают до появления хлопьев и добавляют 5 мл ледяной уксусной кислоты, а перед проявлением фореграмм на гаптоглобины добавляют 2 мл 33 /Оной перекиси водорода. После окраски читают полосы проявления типов гаптоглобина (Hp) по скорости их движения в крахмальном геле от анода (— ) к катоду (+). Самый быстрый тип гаптоглобина — Hp Π— О, затем в порядке убывания скорости движения располагаются Hp 1F — 1F, Hp 1 — 1, Hp 2 — 2 и

Hp 3 — 3. После установления генотипа животного по гаптоглобину отбираются доноры желательного типа, содержащие медленные типы гаптоглобина (Hp 3 — 3, Нр 3 — 2, Hp 3—

1 и Hp 3 — IF) и их используют для получения клеток красного костного мозга.

Средний выход клеток от животных желательного типа с медленными типами гаптоглобина составляет 11,7 — 14,1 л на животное (Р(0,001 — 0,002). От животных нежелательного типа с быстрыми типами гаптоглобина (Htp Π— О, Hp Π— 1, Hp Π— 1F, Hp Π— 2,Hp Π— 3, 11р IF — IF, Нр IF — 1, Hp IF — 2, Нр 1 — 1, Hp

1 — 2, Hp 2 — 2) получают на 29 — 120 /О (от

6,4 до 8,0 л на животное) суспензии клеток меньше (P(0,01 — 0,05), они выбраковываются и используются для других целей.

Для проведения исследований по установлению генетически контролируемых типов гаптоглобипов требуется в общей сложности

0,5 мл сыворотки крови, срок определения не более 24 ч.

Формула изобретения

Способ прижизненного отбора свиней — доноров клеток красного костного мозга по установлению генотипа животных по специфическим белкам крови, отличающийся тем, что, с целью отбора наиболее продуктивных свиней — доноров клеток красного костного

20 мозга, генотип животных устанавливают по типам гаптоглобина и к донорам относят животных, имеющих генотип с медленными типами гаптоглобина Hp 3 — 3, Hp 3 — 2, Hp 3—

1 и Hp 3 — IF сыворотки крови.

25 Источники информации, принятые во внимание при экспертизс

1. Авторское свидетельство № 330842, кл.

А 01К б7/00, 1973.

572247

0ckc нлрл он., Л

77

0-ч

Гг носил г олгаз с гль5ино

1-5 5-3

Заказ 2077/! Изд. № 754 Тираж 778

НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобрстснпй и открытий! 3035 Москва )К-33 Раушская паб д 4/б

Подписное

Типография, пр. Сапунова, 2

Составитель A. Алексеенок

Редактор Г. Мозгкечкова Тсхрсд М. Семенов Корректоры: Л. Брахнина и О. Тюрина