Способ отбора животных-доноров клеток красного костного мозга

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

{1 i) 5879l7

Союз Советскик

Социалистических

Республик

ВАТЬ

Фй,ц " ЛЕИ63 (б1) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 08.08.74 (21) 2053509/28-15 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 15.01.78. Бюллетень № 2 (45) Дата опубликования описания 23.01.78 (51) М. Кл.2 А 01К 67/00

Государственный комитет

Совета Министров СССР ло делам изобретенкк и открытий (53) УДК 636.4:636.082. . 11 (088. 8) (72) Авторы изобретения (71) Заявитель

А. В. Пересадин, В. А. Зуев и Е. В. Михайловская

Всесоюзный научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии (54) СПОСОБ ОТБОРА ЖИВОТНЫХ-ДОНОРОВ

КЛЕТОК КРАСНОГО КОСТНОГО МОЗГА

Изобретение относится к области животноводства и ветеринарии, в частности к способам отбора сельскохозяйственных животных, преимущественно свиней.

Известен способ отбора животных по специфическим белкам сыворотки крови (1).

Этот способ рекомендуется использовать с целью установления истинного происхождения хкивотных, и он не позволяет отбирать свиней — доноров клеток красного костного мозга с повышенным содержанием этих клеток, Целью изобретения является разработка способа, позволяющего производить отбор при жизни наиболее продуктивных свиней — доноров клеток красного костного мозга для увеличения выхода клеток па 15 — 26% .

Указанная цель достигается тем, что устанавливают генотип животных с учетом быстрых типов амилазы (Am 1 — 1, Am 1 — 2, Am 2 — 2). Установленная зависимость между генетически контролируемыми типами амилазы и выходом клеток красного костного мозга свиней позволяет в течение суток из имеющегося поголовья при жизни животных отобрать наиболее продуктивных доноров, увеличить на 15 — 26% выход указанных выше клеток, уменьшить потребность в животныхдонорах и снизить за счет этого себестоимость получаемой культуры или суспензии клеток.

В результате анализа выхода клеток красного костного мозга и генотипов животных по амилазе крови свиней трехмесячного возрасга крупной белой и муромской пород установлена линейная зависимость между выходом клеток красного костного мозга (при концентрации 4 10 кл/мл) и генетическим статусом животного по амилазе (см. чертеж).

От животных, подлежащих отбору, из хвостовой, ушной или передней полой вены берется 5 мл крови. После ее свертывания сгусток обводится пастсровской петлей или пипеткой, пробирка пли флакон со свернувшейся кровью помещается на 1 час в термостат при 37 С, после чего — на 1 час в холодильник при +4 С. Затем цснтрифугированпем при

3000 об/мин в течение 5 минут отделяется сыворотка крови, в которой методом электрофореза в 14,5%-ный крахмальном геле (Смитис, 1955) определяются типы а мил азы. Режим электрофореза 2 — 2,5 V/см, 5 часов, крахмал по Смитису, трпс-цитратный гель-буфер по

Ганэ и боратно-литиевый электролит по Остер гофу (19б3). После электрофореза гель раз25 резается на 2 — 3 полосы — фореграммы, которые на 3 часа помещаются в 0,1 М ацетатпом буфере pI-I 5,7 в термостат прп 37 — 28,5 С.

Затем на 1 час — в холодильник при +4 С в

15% -ный охлажденньш этанол, от этанола

З0 отмывают теплой водопроводной водой

5879)7

2 — о 3 — 3

П лоп ипы аиилазы сы3оротни нро5и свиней оц

Л5 11 д у о,инес т8о оогслеоооанных жиоотпных соотп5етпож5ующего генотипа

Составитель А. Макаров

Техред А. Камышникова Корректор Е. Жаворонкова

Редактор Н. Аристова

Подписное

Заказ 2992712 Изд. № 127 Тираж 778

НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 475

Типография, пр. Сапунова, 2

3 (35 — 40 С), и через 15 — 20 минут в проходящем свете читают полосы типов амилазы (Am) по скорости движения в крахмальном геле от анода (— ) к катоду (+), самый быстрый тип амилазы Am 1 — 1, затем в порядке убывания скорости движения Лгп 2 — 2 и

Am 3 — 3. После установления генотипа животного по амилазе отбираются доноры, содержащие быстрый тип амилазы: Am 1 — 1, Am 1 — 2 и Am 2 — 2 и используют для получения указанных выше клеток. Средний объем клеток красного костного мозга от животных с быстрыми типами амилазы составляет 9,9—

10,2 л на животное (P(0,001). животные нежелательного типа с медленными типами амилазы (Am 2 — 3, Am 3 — 3), от которых получают на 15 — 26% клеток меньше (от 8,2 до 8,6 л на животное), выбраковываются и используются для других целей.

На чертеже приведена зависимость выхода суспензии клеток красного костного мозга от генотипа животного по амилазе сыворотки крови, Объем клеток, 8 л. (4.10 кл/мл).

Для проведения исследования по установлению типов амилазы требуется в общей сложности 0,1 мл сыворотки крови, срок определения не более 24 часов.

Формула изобретения

Способ отбора животных-доноров клеток

10 красного костного мозга, преимущественно свиней, включающий установление генотипа животных по специфическим показателям крови, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности отбора доноров, генотип животных устанавливают с учетом быстрых типов амилазы: Am 1 — 1, Am 1 — 2, Am 2 — 2.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

20 1. АВТорсК00 свидстсльство СССР № 330842, кл, Л 01К 67/00, 1973.