Способ определения курсовой лечебной дозы лекарственных средств анаболического действия

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскнх

Сецналнстнческнх

Республнк . нн 741153 (6I ) Дополнительное к авт. свид-ву (22) За"ил HO 21.06.78 (21) 2623950/28-13 с присоединением заявки ¹ (23) Приоритет (51) М. Кл.

G 01 N 33/16

Гесударстеенньа комитет во делам изобретений н открытий

Опубликовано 15.06.80. Бюллетень g 22

Дата опубликования описания 15.06.80 (53) Уд т 615-015.3 (088.8) (72) Авторы изобретения

В. Н. Офицеров и Г. Е. Загоруйко

Харьковский медицинский институт (71) Заявитель (53) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КУРСОВОЙ ЛЕЧЕБНОЙ ДОЗЫ

ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ АНАБОЛИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной и клинической кардиологии.

Известен способ определения курсовой лечебной дозы лекарственных средств анаболическог@

5 действия путем исследования мышечной ткани до и после введения препарата (11.

Однако известный способ обладает невысокой точностью.

Целью изобретения является повышение точ-1 ности способа. Эта цель достигается тем, что измеряют объем митохондрий или миофибрилл в единице объема мышечных клеток микарда и по наименьшей дозе препарата, приводящей эти значения к эталонным, характерным для данной15 возрастной группы, определяют эффективную курсовую лечебную дозу, Способ осуществляют следующим образом.

У животных с моделью заболевания миокарда в процессе лечения лекарственными средствами анаболического действия берут биопсию мышечной ткани миокарда одним иэ известных способов,подготавливают образцы для электронномикросколического изучения. По полученным негативам электроннограмм точечным методом Глаголева оводят стереометрический анализ прямоугольной тест-системой с постоянной 0,9 (одна точка на 0,9 мкм ) с целью определения в единице объема клетки исследуемых биоптатов величин относительных объемов митохондрий или миофибрилл (т. е. объемную плотность указанных органелл).

Стереометрический анализ проводят на негативах, полученных при прямом электронномикроскопическом увеличении в 3300 раэ, путем подсчета точек при наложении на негатив тестсистемы, выполненной на прозрачном материале.

Полученные числовые значения откладывают на графике, и продолжают стереометрический анализ до получения стабилизированного значения признака, что контролируется по приближению кривой к асимптоте, и прекращают анализ при получении значений признака с ошибкой измерения 1%.

Проведенный анализ показал, что введение лекарственных средств анаболичесого действия изменяет числовые значения объемной плотности доминирующих органелл мышечных клеток в на3 74115 правлении значений, характерных для здорового органа данной возрастной группы эксперимен тальных животных.

После введения различным группам животных разных курсовых доз исследуемых лекарственных средств и измерения объемной плотности митохондрий или миофибрилл за эффективную курсовую лечебную дозу принимают наименьшую из доз, приводящую измененные экспериментальной патологией величины объемов указанных ор-1О ганелл к эталонным значениям, характерным для данной возрастной группы.

Пример. С целью максимального приближения модели заболевания (сердечной недостаточной атеросклеротического генеза) к патологии человека определение оптимальной курсовой дозы лекарственного средства анаболического действия — ретаболила, проводили на кроликах самцах породы "шиншилла" в возрасте 18 мес.

Возраст кролей 18 мес эквивалентен возрасту человека 50 лет. С данного возраста, как известно, наа нается развитие этеросклеротнческих поражений, в том числе и миокарда.

Эксперимент проведен на 40 кроликах массой

2,6-3 0 кг, разделенных на четыре равные группы25

Первую группу составили интактные животные, служившие возрастным контролем. У 30 остальных кроликов с целью создания модели близкой к патологий человека — хронической сердечной недостаточности атеросклеротического генеза— вызывалн атеросклероз по Аничкову Н. Н. путем введенйя холестерина по 0,3 r/êã веса с овощами ежедневно в течение 3-х последних месяцев жизни животных, За 1,5 мес. до окончания опьгга производили сужение брюшного отдела аорты (коарктацию) на 50% йсходного диаметра по Меерсону, Через

15 дней после операции и до окончания опыта животные 1П и 1Ч групп получали лекарственное средство анаболического действия — ретаболил, путем внутримышечного введения. Кролики 11 группы лекарственных средств не получаци и служили контролем модели. Кролики

Ш группы получали ретаболнл по 10 мг/кг веса два раза в месяц (курсовая доза 20 мг/кг 4> веса) . Кролики 1Н группы получили ретаболил в курсовой дозе 15 мг/кг веса животного.

После проведенного курса лечения экспериментальных животных с созданной на них моделью сердечной недостаточности атероскле50 ротического генеза у них брали кусочки мышцы сердца (биопсию) для злектронномикроскопнческого исследования. Фиксацшо и проводку материала проводили по стандартным методикам. Срезы получали на ультратоме УМПТ-2, просмотр и фотографирование осуществляли с помощью электронного микроскопа УЭМВ-100к при напряжении 75 кВ и прямом электронномикроскопическом увеличении в 3300 раз.

3 4

Полученные негативы подвергали стереометрн ческому анализу, Результаты экспериментальной проверки влияния различных доз ретаболила на объемную плотность митохондрий и миофибрилл в мышечных клетках сердца кроликов в возрасте 18 мес. приведены в таблице.

КУРсовая Величина объемной плотности о Рета митохондрий и миофибрилл

Группа наблю дения олила, мг/кг ве

35,20

44,70

40,60

39,60

20 36,20

15 36,00

43,90

Из приведенных в таблице данных следует, что объемная плотность митохондрий н мнофибрилл в мышечных клетках сердца кроликов

11 группы значительно отличается or этих показателей в возрастной норме, (1 группе) — 40, 60 и 35, 20 для митохондрий и 39, 60 и 44, 70 для миофибрилл, что свидетельствует о значительном изменении условий функционирования миокарда при указанной экспериментальной модели патологии человека.

Введение кроликами !Н и И групп курсовых доз ретаболила в 20 и 15 мг/кг веса соответственно изменяет объемную плотность митохондрий и мйофибрилл в направлении возрастной нормы. Месячный курс лечения ретаболилом приводит значения объемов этих органелл к близким между собой величинам: мт — 36, 20 в Ш и

36,00 в И группах; мф — 43,90 и 44,20 соответственно.

Результаты показывают. что курсовая доза ретаболила, установленная известным способом (20 мг/кг веса), не является оптимальной, так как аналогичный лечебный эффект может быль получен при применении установленной по предлагаемому способу дозы (15 мг/кг веса), составляющей 75% дозы известного способа.

Как следует нз полученных данных, для кроликов 18 мес, с вышеописанной моделью сердечной недостаточности, оптимальной, т.е. наиболее эффективной курсовой дозой ретаболила является доза в 15 мг/кт веса вместо 20 мг/кг веса по известному способу.

Применение меньших доз прн равном терапевтическом эффекте имеет предпочтение в клинической практике, так как уменьшает возможность проявления нежелательных побочных влияСоставитель С. Малютина

Техред Ж.Кастелевич

Редактор Н. Потапова

Корректор Ю. Макаренко

Заказ 3194/44 Тираж 1019

11НИИПИ Государственного комитета СССР ло делам изобретений и открьпий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

5 7411 ний лекарственных средсп и имеет несомнениьй эффект при массовом их применении.

Использование предлагаемого способа определения курсовой лечебной дозы лекарственных средств анаболического действия позволяет значительно повысить точность определения эффективной курсовой лечебной дозы s экспериментальной кардиологии; обеспечивает возможность определения истинной индивидуальной курсовой

1лечебной дозы, строго адекватной морфофункциональному состоянию миокарда в условиях клиники.

Формула изобретения

Способ определения курсовой лечебной дозы лекарственных средств анаболического действия

53 6 ,путем исследования мышечной ткани до и после введения препарата, о т л н ч а ю ш и йс я тем, что, с целью повышения точности способа, измеряют обьем митохондрий нли миофибрилл в единице объемомышечных клеток миокарда и но наименыпей дозе препарата, приводящей эти значения к эталонным, характерным для данной возрастной группы, определяют эффективную курсовую лечебную go .

Истощики информации, принятые во внимание при экспертизе

l. Бюллетень экспериментальной биологии.

1977, 1Р 11, с. 613-616.