Устройство для диск-электрофорезав полиакриламидном геле

 

Союз Саветскик

Социаивктическик

Ресиубаик

ОПИЮ

ИЗОВРЕ Е ИЯ

К АВТОУСКОМУ СВИ ЕТВЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Зеювлено 1Ь0579 (21) 2765639/18-25 п>808927 (51)М. Кл.з ь 01 М 27/26 с присоединением заявки М

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий (23) Приоритет

Опубликовано 280231. Бюллетель ЙЯ 8

Дата опубликованию описанию 28,0231 (53) УДЫ 54З. 544 (088.8) (72) авторы изобретению

Б. A. Гарбарец, A. Г. Шевчук, Ф. И. И и N. A. Гарбарец (71) заявители (54) УСТРОИСТВО ДЛЯ ДИСК-ЭЛЕКТРОФОРЕЗА

В ПОЛИАКРИЛАИИДНОИ ГЕЛЕ родом, в которую вставляется образованный из двух пластин блок с каналами для геля из полиакриламида (.2).:.

Недостатком устройства является то, что оно изготовляется из плекси гласа, который является гидрофобньвл веществом, и это отрицательно отражается на проведении очень важной (даже определяющей весь процесс электрофореэа) операции наслаивания ди стиллированной воды нли других растворов на поверхность раствора полиак-риламида или других растворов. Наслаиваемая жидкость медленно и осторожно подается из шприца на стенку канала, и, стекая по ней, она должна наслаиваться беэ смещения на другой раствор (например полиакриламидный).

На гидрофобной поверхности плексигласа жидкость собирается в виде капли.

Капля падает как бомба и смешивается с жидкостью, на которую идет наслаивание. Это ведет к нарушению точности электрофореэа, к искажению его результатов. Извлеченные иэ каналов для гелей гелевые столбики после электрофореза помещают в отдельные пробирки,так как каждый из них представляет собой отдельный исследуемый образец. Эатем с гелевыми столбиками

Изобретение относится к медицинс кой и биохимической аппаратуре и предназначено для проведения электрофореэа различных биологических ве-..ществ в полиакриламндном геле.в биохимических и клинических лабораториях.

Известны устройства для электрофореэа в полиакриламидном геле с наслаиванием анализируемых растворов над слоем геля (11.

Известно также устройство для электрофореза в полиакриламидном геле, состоящее из двух пластин иэ плексигласа, наверху которых имеются 15 углубления. В одной пластине с внутренней стороны имеются параллельные прямоугольные каналы для геля, в углублении которой зафиксирован электрод. В обеих пластинах по бокам . 20 имеются отверстия для барашковых винтов. Расположение отверстий и углублений в пластинах идентично и при накладывании пластин одна на другую внутренними поверхностями и скреп- 25 ленни их винтами вверху образуется резервуар для буферного раствора (за счет углублений) и прямоугольные каналы для геля. В состав устройства входит нижняя камера с злект- $0

808927 проделывают многократные операции промывания, проявления, фиксации, денситометрии и др. Для их осуществления пользуются параллельными рядами пробирок, в каждом из которых для

Каждого гелевого столбика имеется своя пробирка. Это приводит к неэкономному использованию дорогостоящих реактивов, большое количество пробирок занимает много места в лаборатории при всегда возможной путанице

1О пробирок.

Цель изобретения — повышение точности электрофореза, ускорения процесса анализа и экономии химреактивов.

Указанная цель достигается тем, что в известном устройстве, содержа щем углубления для буфера и каналы для геля, в верхней части каналов для гелей делают углубления-пазухи с помещенными в них стеклянными плас- 20 тинками, а в нижней части каналов у самого края на их поверхности — углубления-штампы обратных цифр-номеров каналов. Каналы для геля соединены между собой ходами, образован- д ными косыми срезами промежутков между каналами.

На фиг. 1 изображен общий вид устройства; на фиг. 2 — верхняя искровная пластина; на фиг. 3 — нижняя пластина с каналами для геля; на фиг. 4 — поперечный разрез нижней пластины в верхней части; на фиг.5 вид сбоку соединенных пластин с косыми срезами промежутков между каналами внизу; на фиг. 6 — вид гелевого столбика с обозначенным на нем номером канала.

Верхняя 1 и нижняя 4 пластины из плексигласа. имеют углубление 3 с одной стороны во всю ширину, не доходя 40 до краев 5-7 мм. Ниже углубления 3 по бокам пластин симметрично расположено по три отверстия для барашковых винтов 2. Пластина 4 имеет шесть или более прямоугольных параллельных каналов 8 для геля,.разделенных громежутками 7, ширина каждого из которых составляет приблизительно половину ширины канала (ширину промежутков можно варьировать), Основное требование к ним — обеспечение .«О герметизации каналов. Нижние концы промежутков 7 срезаны под углом 45 образуя ходы-сообщения 13 между каналами, нижняя часть каналов сразу у края имеет углубления- штампы 9 обратных цифр-номеров каналов длиной 3-4 мм,. в верхней части каналов есть углубления"пазухи 11 для стеклянных пластин 6. Пазухи на 1 мм больше ширины каналов с каждой сто- Я} роны и углублены относительно поверхности канала на толщину стеклянных пластин. Последние должны плотно входить в углубления-пазухи, чтобы не выпадать при опрокидывании д5 пластины. В углублении 3 пластины 4,, отступив от верхнего края на 4-5 мм и как можно ближе к середине (по ширине) углубления, герметично вставлен электрод 5, электрод.16 аналогично вставлен в камеру 15, Пластины 1 и 4 герметизируют силиконовой смазкой и скрепляют винтами, нижние отверстия каналов закрывают. пленкой, каналы заполняют раствором геля на требуемую высоту, на поверхность полиакриламида в каналах наслаивают по стеклянным пластинам 6 воду. После образования геля в каналах свободную верхнюю часть их над гелем заполняют раствором исследуемого образца и буферным раствором пу-тем аналогичного наслаивания„ аполняют буфером углубление 3. Удалив пленку с нижних концов каналОв, вставляют блок в камеру 15 на подставки из плексигласа 17, заливают в камеру 15 буферный раствор. Подводя к электродам постоянный ток, проводят электрофорез. Столбики геля„ имеющие в нижней частя номера каналов, соответственно номерам различных исследуемых образцов, после электрофореза помещают в один стакан для дальнейшей обработки (промывают, проявляют, фиксируют и др.).

После обработки хранят в том же сосуде.

Наличие стеклянных пластин и углублений-штампов. обратных цифр на поверхности каналов для гелей приводит к ускорению в два раза всего процесса электрофореза, повышению его точности,на 30-40% экономит расходование дорогостоящих реактивов.

Формула изобретения

1. Устройство для диск-электрофореза в полиакриламидном геле, состоящее из двух пластин с углублением для буферного раствора и каналами для геля, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что, с целью повышения точности электрофореза, в верхней части каналов для гелей имеются углубления-пазухи с помещенными в них стеклянными пластинками.

2. Устройство по п.1, о т л и ч а ю w e е с я тем, что, с целью ускорения процесса анализа и экономии химреактивов, в нижней части каналов у самого края на их поверхности сделаны углубления-штампы обратных цифрномеров каналов.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Маурер Г. Диск-электрофорез.

М., "Мир", 1971, с.66-73.

2. Naraycrn К.А., Чоде! И., Lawrence J.И. Апа1. Вiochim, 1965, 12« р.526-541

806927

Фиа, Ф

Редактор К. Лембак

Заказ 401/4 б

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Составитель И. Клешнина

Техред М.Лоя Корректор М. Вигула

Тираж 918 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35,Раушская наб., д. 4/5