Способ получения 1 ,3 ,24-( или )триоксихолеста-5,7-диена или егопроизводных

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Союз Соеетскик

Социалистических

Республик (ii) 843735 (61) Дополнительный и патенту (22) Звявлемо100876 (21) 2151531/

2388316/23-04 (23) Приоритет, 0707.75 (32) 09. 12. 74

Р1)М, К .з

С 07 С 172/02

Государственный комитет

СССР но делам изобретений и открытий (31) 141329-332/74 (33) Япония

Опубликовано 300681. Бюллетень М 24

Дата опубликования описания 300681 (53) УДК 547. 689. .6.07(088.8) Иностранцы

Тору Такесита, Есинобу Хасимото, Хироюки Кавасима, Сачио Исимото, Нобуо Икекава, Масуо Морисаки (Япония) (72) Авторы изобретения

Иностранная фирма

"Тейдзин Лимитед" (Япония) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 1 о, 3 ф, 24- (S ИЛИ R)ТРИОКСИХОЛЕСТА 5,7-ДИЕНА ИЛИ ЕГО ПРОИЭВОДНЫХ ((I ) 25 ко

Изобретение относится к способу получения новых фармакологически активных производных триоксихолеста-5,7"диена, которые также моГут быть использованы в качестве исходного продукта для синтеза диоксихолекальциферола, являющегося активным аналогом витамина .0 .

Использование известного метода бромирования оксихолестерина по 7 положению и последующего дегидробромирования позволяет получать новые фармакологически активные производ- ные 1w 3 ф, 24-(S или R)-триоксихолеста-5,7-диена 11 .

Способ получения 1о, Зф, 24-(S или R)-триоксихолеста-5,7-диена или его производных общей Формулы где 8, R и R> — одинаковые или раз личные и представляют собой водород или защитную группу, заключается в 30 том, что производное 1,24-(S или R)-дноксихолестерина общей формулы где и, 85 и Вв — одинаковые или различные и йредставляют собой защитную группу, подвергают взаимодействию с бромирующим агентом, выбранным иэ группы, включающей N-бромсукцинимид, 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин и

N-бромкапролактам, при температуре от комнатной до 140 С и полученную реакционную смесь обрабатывают дегидробромирующим агентом, выбранным из группы, включающей S-tcoz pvu, тркметилфосфит и диэтиланилин при 80250сС и полученный продукт выделяют или подвергают гидролиэу или восстановительному разложению для отщепления защитных групп °

843735

Примерами защитных групп могут служить остатки алифатических или ароматических карбоновых кислот С вЂ”

С и их нитро-, галоид- и алкоксизамещенные производные, бензильная, тетрагидропиранильная и силильные группы.

Пример 1а. Синтез 1сС, 1ф, 24-триацетоксихолест-5-ена. 300 мг

1ф. -24-диоксихолестерина используют для проведения реакции с 40 мл уксусного ангидрида .и 125 мл пиридина в течение 3 ч при 95@С. Далее в реакционную смесь добавляют 25 мл воды и экстрагируют ее 250 мл диэтило.вого эфира. Эфирную фазу промывают кислотой, а затем щелочью, высушивают 15 и выпаривают для удаления эфира, в результате чего получают сырой

1сЬ, 3 ф, 24-трибензоилхолест-5-ен.

Этот сырой продукт подвергают хроматографической обработке в колонне, 2О .которая содержит силикагель в качестве носителя, с использованием для элюйрования растворителя, состоящего из бенэола, в результате чего получают 325 мг очищенного 1ц, 3(, 24-триацетоксихолест-5-ена в виде маслянистого очищенного продукта. б Синтез 1с, 3 ф, 24-триацетоксихолеста-5,7-диена (вторая стадия), 300 мг 10(, 3g, 24-триацеток- 30 сихолест-5-ена используют для проведения реакции с 90 мг 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина в 4,5 мл н-гексана при кипячении с применением обратного холодильника в течение 15 мин. Реакционную смесь охлаждают, а образовавшийся 5,5-диметилгидантоин в избыточном количестве 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина удаляют фильтрованием. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении 40 с получением 349 мг желтого маслянистого вещества. К нему добавляют

2,5 мл ксилола для образования раствора. Приготовленный раствор по каплям в течение 15 мин добавляют в раст-45 вор, температуру которого поддерживают на уровне 1650С (0,85 мл втор. коллидина в 1,9 мл ксилола), после чего реакцию проводят в течение дополнительных 10 мин . После завершения реакции гидробромид втор.коллндин* удаляют фильтрованием, а втор . коллидин и ксилол выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в диэтиловом эфире. Эфирную фазу(промывают нормальным раствором солкой кислоты и 5%-ным водным раст вором бикарбоната натрия, а затем вновь водой. После этого ее обрабатывают активированным углем, а серный эфир выпаривают при пониженном ф) давлении с получением 310 мг желтого маслянистого вещества. Его далее подвергают двукратному осторожному разделению путем хроматографической обработки в колонне (элюирование 65 осуществляют бензолом) с использованием кремневой кислоты, в результате чего получают 69 мг (23%-ный выход) некристаллического очищенного продукта. С использованием спектральных данных этот продукт идентифицируют как 1, 3 5, 24-триацетоксихолеста-5,7-диен.

Пример 2. Синтез 1с6, 3

24-триацетоксихолеста-5,7-диена (вторая стадия). Проводят реакцию

150 мг 1оС, 31о, 24-триацетоксихолест-5-ена с 45 мг 1,3-бром-5,5-диметилгидантоина в 3 мл н-гексана в течение 15 мин при кипячении с применением обратного холодильника.

Далее реакционную смесь охлаждают, а образовавшиеся кристаллы удаляют фильтрованием. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении, в результате чего получают желтое маслянистое вещество. К этому веществу добавляют 1,3 мл ксилола. Приготовленный раствор по каплям в течение приблизительно 15 мин добавляют в раствор 0,25 мл триметилфосфита в 4 мл ксилола при кипячении с применением обратного холодильника, после чего реакцию продолжают еще 90 мин Затем реакционную смесь концентрируют при температуре ниже 75ОС с получением 148 мг маслянистого продукта.

Этот продукт далее обрабатывают аналогично примеру 1.

Пример 3. Синтез 1с6, 3, 24-трибензоилксихолеста-5,7- диена (вторая стадия) . 200 мг 1d, Зg, 24-трибензоилксихолест-5-ена получают аналогично примеру 1а, после чего нагревают в течение 15 мин при кипячении с применением обратного холодильника совместно с 55 мг

И-бромсукцинимида в 15 мл четыреххлористого углерода. Далее реакционную смесь охлажДают, а образовавшиеся кристаллы удаляют фильтрованием.

Фильтрат концентрируют и в остаток добавляют 5 мл ксилола.

Приготовленный раствор добавляют по каплям в течение 15 мин в раствор 0,2 мл триметилфосфита в 4 мл ксилола при кипячении с применением обратного холодильника, после чего смесь подвергают кипячению с применением обратного холодильника в течение дополнительных 90 мин.

Далее реакционную смесь концентрируют при температуре менее 75ОС, а остаток подвергают осторожной двукратной хроматографической обработке в колонне, которая содержит кремневую кислоту, с использованием бензола в качестве элюирующего растворителя, в результате чего получают 50 мг (25%-ный выход) очищенного некристаллического продукта. Этот продукт характеризуется спектральными данными и идентифицируется какJ

843735

1, Зр, 24-трнбензоилоксихолеста-5,7-днен.

Пример 4. Синтез 1 <, Зф, 24- (S)-триацетоксихолеста-5,7-диена (вторая стадия), 1Ж -окси-3 ф -24†(S)-дибензоилоксихолест-5-ен восстанавливают с использованием LIAIH4

5 в сухом диэтиловом эфире с получением 1Х, Зр, 24-(S)-триоксихолест-5-ена. После этого проводят реакцию 180 мг этого. продукта с 24 мл уксусного ангидрида и 75 мп пиридина при 95IIC в течение 3,5 ч. Этот продукт подвергают обработке по аналогии,с изложенным в примере 1а и хроматографкческой обработке в колонне, содержащей в качестве носи- IS теля силикагель, в результате чего получают 195 мг 1сС, 3, 24-(S)-триацетоксихолест-5-ен.

150 мг этого продукта очищают аналогично примеру 3, в результате 2О чего получают 43,5 мг (29В-ный выход) очищенного продукта, который идентифицируют как 1,, 3,, 24-(5)-триацетоксихолеста-5,7-диен.

Пример 5. Синтез 1с, 31о ,24-(5)-трибензоилокскхолеста-5,7-дие на (вторая стадия). 100 мг 1d, 3 ф, 24-(S)-трибензоилоксихолест-5-ена, полученного по аналогии с изложенным в примере 1б, подвергают кипячению с применением обратного холодильника в течение 15 мин совместно с 23 мг 1,3-дибром-5,5-диметилгидантокна в 16 мл четыреххлористого углерода. Реакционную смесь ох.лаждают, а образовавшиеся кристаллы удаляют фильтрованием. Фильтрат концентрируют и в остаток добавляют

2,5 мл ксклола. Этот раствор по каплям в течение 15 мин добавляют прк кипячении с применением обратного 40 холодильника в раствор 0,3 мл втор-. коллидина в 2 мл ксилола с последующим кипячением с обратным холодиль.ником в течение дополнительных

10 мин, ° 45

После завершения этой реакции гидробромнд втор.коллидина удаляют фильтрованием, а втор.коллидин и ксилол выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в диэтиловом эфире. Эфирную фазу промывают нормальным раствором соляной кислоты и 5В-ным водным бикарбонатом натрия с последующей повторной промывкой водой. . После этого эфирную Фазу BHcy HBaNT и серный эфир 55 выпаривают прк пониженном давлении, в результате чего получают желтый маслянистый продукт.

Этот маслянистый продукт подвергают далее осторожной хроматографи- ф(} ческой обработке в колонне, которая содержит кремневую кислоту, с использованием бензола в качестве элюкрующего растворителя с получением 28 мг (28%-кый выход) очищенного кристал- 65 лического продукта. Этот продукт идентифицируют как 1с, ЗР, 24-(5)-I

-трибензоилксихолеста-5,7-диен.

Пример 6..Синтез 1О6 -ацетокси-Зф;24-(S)-дибензоилоксихолеста-5,7-диена (вторая стадия). 1еб—

-окси-3f3,24-(5)-дибензоилоксихолест-5ен используют для проведения реакции с уксусным ангидридом и пиридином по аналогии с изложенным в примере 1а. Реакционный продукт очищают по аналогии с изложенным в примере 1(3), в результате чего получают 1с6 -ацетокси-Зф,24-(S)-дибензоилоксихолест-5-ен.

Проводят реакцию 462 мг 1а -ацетокси-Зф -24-(S)-дибензоилоксихолест-5-ена с 188,6 мг й-бромсукцинимида в 16 мл четыреххлористого углерода при кипячении с обратным холодильником в течение 30 мнн. Далее реакционную смесь охлаждают, а образовавшиеся кристаллы удаляют фильтрованием. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением желтого маслянистого продукта. К этому продукту прибавляют 6,8 мл ксилола с образованием раствора.

Этот раствор,по каплям добавляют при кипячении с обратным холодильником в раствор 0,4 мл триметилфосфита в

8 мл ксилола, после чего реакцию проводят в течение дополнительных

90 мин. После завершения реакции реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении с получением маслянистого продукта.

П,р и м е р 7. Синтез 1ао, Зф, 24- (R) -триацетоксихолеста-5, 7-диена (вторая стадия) . 1с6 -oaks-З@, 24- (й) -дибензоилоксихолест-5-ен подвер-. гают обработке аналогично примеру 4.

Таким образом получают очищенный продукт, который характеризуется практически теми же данными спектров УФ, ЯМР и масс-спектра, что и соответствующие данные для S-эпимера, полученного по аналогии.с изложенным в примере 6, с достижением

28%-ного выхода. Этот продукт идентифицируют как 1Ы, Зф, 24-(R)-триацетоксихолеста-5,7-диен.

Пример 8. Синтез 1о. Зф

24-(R)-тркбензоилоксихолеста-5,7-диена (вторая стадия) . 1Е,, 3 Р, 24-(R)-трибензоилоксихолест-5-ен подвергают обработке аналогично примеру 5 ° Очищенный продуКт характеризуется практически теми же данными для Уф-спектра, спектра ЯМР и массспектра, что и соответствующий S-эпимер, полученный аналогично примеру

5, причем достигается 27%-ный выход.

Этот продукт идентифицируют как

1сб, 3 g, 24-(R)-трибензоилоксихолеста-5-диен.

Пример 9. Синтез 1d, -ацетокси-Зф,24-(R)-дибенэоилоксихолеста-5,7-диена (вторая стадия), 1 -ок843735

65 си-3 ),24-(R)-дибензоилоксихолест-5-ен подвергают обработке по анало-. гии с изложенным в примере б., Очищенный продукт характеризуется.практически теми же данными для

УФ- и масс-спектра, что и соответствующий S-эпимер, полученный по аналогии с изложенным в примере б. Этот продукт идентифицируют как 1o" -ацетокси-Зф,24-(R)-дибензоилоксихолеста-5,7-диен.

Пример 10а. Синтез 1d,, 3P—

-24-триацетоксихолеста-5,7-диена из

1сй, З Ъ, 24-триацетоксихолест-5-ена.

В соответствии со способом, который описан в примере 1б, проводят реакцию 1d 3 ф, 24-триацетоксихолест-5-ена, с 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоином и втор.коллидином в и-гексане. Полученный реакционный продукт промывают кислотой и щелочью в серном эфире и обрабатывают активированным углем с получением сырой реакционной смеси, которая содержит

1о, З Ь -24-триацетоксихолеста-5,7-диен. б) Гидролиз 1Ф, 3g 24-триацетоксихолеста-5,7-диена. Сырой продукт, который получают на вышеописанной стадии (а), подвергают гидролизу в

5%-ном метанольном растворе гидрата окиси калия с получением сырой реакционной смеси, которая содержит

1 с6, 3 ф,24-триоксихолеста-5,7-диен. с) Определяют степень чистоты

1с6, 3 ),24-триоксихолеста-5,7-диена. УФ-спектр 100%-ной степени чистоты 1(6, 3 ),24-триоксихолеста-5,7-диена составляет %„ (этанол) <ИХ

282 Hm, а УФ-спектр 100%-ной степени чистоты 1с6, З, 24-триокси-4,б-диена составляет Ъ этанол)=

240 нм. Количественное соотношение в смеси между этими двумя соединениями можно определить путем сравнения их величин A

Количественное соотношение между 5,7-диеновыми производным и 4,6-диеновым производным в сырой. реакционной смеси, полученной на вышеописанной стадии (б), определяют по методике, в результате которой устанавливают, что молярное соотношение между 1Ф, ЗР 24-триоксихолеста-5,7-диеном и 1с6, З и 24-триоксихолеста-4,6 -диеном составляет приблизительно 3:1. д1 Разделение 10(,, Зф, 24-триоксихолеста-5,7-диена и 1,, З Ь

24-триоксихолеста-4,6-диена (третья стадия). д-1) Разделение путем препаративной тонкослойной хроматографнческой обработки. Технически доступную пластину для препаративной тонкослойной хроматографической обработки диликагель, продукт фирмы "Мерк ком5 (О

t5

ЗО

40 пани", 20 х 20 х 0,5 см ) погружают в раствор нитрата серебра в ацетонитриле с целью ее пропитки в количестве приблизительно 1,5 вес.% в пересчете на нитрат серебра, после чего обрабатывают нагреванием при

70 С в течение 2 ч. Подготовленную таким образом хроматографическую пластину используют для последующей операции разделения.

Сырую реакционную смесь (30 мг), полученную на вышеописанной стадии (б), адсорбируют на этой пластине и проявляют приблизительно на 20 см смешанным растворителем, т.е. смесью 6Ъ-ного метанола с хлороформом.

После сушки пластины на воздухе реакционную смесь вновь проявляют тем же самым растворителем. Она характеризуется двумя полосами при Rf приблизительно 0,23 и приблизительно 0,33. Эти фракции экстрагируют из силикагеля этилацетатом. Таким образом, получают 17,1 мг (57%) белого твердого вещества (Rg 0,23) и 6,0 мг (20%) белого твердого вещества — (R 0,33).

Часть, этой пластины окрашивают. с использованием серной кислоты и получают полосу R приблизительно

0,38. Эту фракцию соскабливают и экстрагируют таким путем, как описано выше, в результате чего получают приблизительно 1 мг твердого вещества.

Эти продукты характеризуются нижеследующими данными. Продукт с В

0,23 идентифицируют как 1о, З

24-триоксихолеста-5,7-диен, продукт с Rg 0 33 идентифицируют как 1с6, 3 ф, 24-триоксихолеста-4,б-диен, а продукт с Rg 0,38 идентифицируют как

1с6, 24-диоксихолестерин. д-2) Разделение хроматографической .обработкой в колонне. Силикагель, который технически доступен для применения при проведении хроматографической обработки в колонне (С-200, товарный знак для продукции фирмы "Вако йиуниаку Когио Кабуски

Кайся" ) пропитывают приблизительно

2 вес.В нитрата с использованием его в виде раствора, после чего обрабатывали нагреванием при 70 С в теО чение 2 ч. После этого силикагелем заполняют стеклянную колонну диаметром 1 см и высотой 30 см. В эту колонну заливают 40 мг сырой реакционной смеси, полученной в стадии (б), с последующим элюированием смешанным растворителем, который состоит из бензола и этилацетата. Смесь разделяют на две фракции (приблизительно по 20 мл объемом каждая).

Эти фракции разделяют с целью контроля тонкослойной хроматографической обработки и полученных данных

УФ-спектра.

843735 в+о где В4, Rg u Р6 - одинаковые или раз10 личные и представляют собой ту же защитную группу, подвергают взаимодействию с бромирующим агентом, выбранным из группы, включающей й-бромсукцинимид, 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин и N-бромкапролактам, при температуре от комнатной до 140 С и полученную реакционную смесь обрабатывают дегидробромирующим агентом, выбранным из группы, включающей S-коллидин, триметилфосфит и диэтиланилин при 80-250О и полученный продукт выделяют или подвергают гидролизу или восстановительному разложению для отщепления защитных групп.

Формула изобретения

RiO где и, К и К вЂ” одинаковые или. раз- 25 личные и йредставляют собой водород или защитную группу, о т л и ч а юшийся тем, что производное

Составитель Л. Иоффе

Техред M.Ãoëèíêà

Корректор В. Бутяга

Редактор Н. Кешеля

Заказ 5200/89 Тираж 443 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретенийи открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

В том случае, когда объемное соотношение между бензолом и этилацетатом находятся в интервале от

2:1 до 1:1, получают 7,6 мг (19%-ный выход) продукта, который соответствует й< 0,33 (g- 1). В этом случае, когда это соотношение составляет

1:1, получают 19,6 мг (49%) продукта, который соответствует В 0,23.

Эти продукты идентифицируют по данным различных спектров.

Способ получения 1о, Зф, 24†(S или R)-триоксихолеста-5,7-диена или его производных общей формулы I

1,24-(5 или R)-дноксихолестерина общей Формулы

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Выложенная заявка ФРГ

9 2326008, кл. 120 25/03, 1972.