Штамм бактерий , окисляющий соединения tpex-валентного мышьяка и предназначенныйдля очистки сточных вод

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

I«»844630

© (61) Дополнительное к авт. свид-ву(51)М. К .з (22) Заявлено 031279 (21) 2861223/30-15 с присоединением заявки М— (23) Приоритет

С 12 N 1/00

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 828. 515 (088. 8) Опубликовано 070781 Бюллетень М 25

Дата опубликования описания 070781. «. « «т« .«

А.Н.Илялетдинов, С.A.Aáäðàøèòîâà, Б. .Мыибае«ве - :.11% и Г.С.Махмудова

1 !

1« - - " « - . 1« .«««« (72) Авторы изобретения

Институт микробиологии и вирусологии MT Казахской.---. :-. -

ССР (71) Заявитель (54) ШТАММ БАКТЕРИЙ PSEUDOMONAS

PUTiОА 18, ОКИСЛЯ10ЩИЙ СОЕДИНЕНИЯ

TPEXBAJIEHTHOI O МЫШЬЯКА И ПРЕДНАЗНАЧЕНН61Й

ДЛЯ ОЧИСТКИ СТОЧНЫХ ВОД

1 2

Изобретение относится.к новому штамму бактерий, способных в гетеротрофных условиях окислять саединения трехвалентного мышьяка в пятивалентные при понижении температуры.

Для очистки сточных вод от мышьяка в настоящее время используют фосфатный метод, сущность которого заключается в том, что соединения пятивалентного мяшьяка с фосфатами и кальцием образуют практически нерастворимые соединения., которые не требуют специальных мест для захоронения. Промышленные стоки предприятий цветной металлургии обычно содер- 15 жат мяшьяк в трехвалентной форме, и поэтому для очистки вод от мышьяка фосфатным методом требуется предва рительное окисление мяшьяка до пятивалентного состояния. B связи с этим 20 возникает необходимость испольэовать микроорганизмы, способные с большой скоростью осуществлять процесс окисления мышьяка в пятивалентный при по- . ниженных температурах.

Известен штамп бактерий Arsenomonas arsenooxidans, способный окислять 1 г/л мьхаьяка (Аз™ ) в отсутстьни органического вещества при

28о 11 . При пониженных температурах 30 этот штамм реакцию окисления Ass+ в

As осуществлять не может, что является существенным недостатком.

Известны также бактерии рода Pseudomonas, способные осуществлять реакцию окисления трехвалентного мышьяка в пятивалентный в присутствии органического вещества 1.2) .

Эти гетеротрофные бактерии осуществляют функцию окисления адаптивно: после пересева на мясо- пептонный агар без добавления солей мышьяка способность к окислению: у этих бактерий пропадает, они продолжают развиваться как обычные гетеротрофы, не окисляя мышьяк.

Предлагается штамм Ps.putida 18, способный окислять трехвалентный мышьяк в пятивалентный в присутствии малых количеств органического вещества в нейтральных или слабощелочных условиях при пониженной температуре. Это очень важно при использовании культуры для очистки сточных вод от мышьяка, так как перепады температуры не лимитируют роста бактерий Ps.putida шт. 18 и, соответствен-. но, скорость окисления мышьяка находится на высоком уровне.

844630

Формула изобретения

ВНИИПИ Заказ 4218/7 Тираж 528 Подписное филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул.Проектная,4

Штамм Ps . .put i da характеризуется следукщими признаками.

Морфологические признаки. Клетки прямые, палочковидные, размеры 08х х2,0 мкм, подвижные, встречаются в виде одиночных клеток, редко соединенных попарно. Монотрихи. Грамотрицательные, споры не образуют.

Мясо-пептонный,агар При посеве на МПА колония круглая, гладкая, блестящая, светло-коричневая, диаметр 2-4 мм, края гладкие, профиль круто изогнутый, структура аморфная.

Картофель и морковь. Рост умеренный, поверхность блестящая, гладкая, цвет ярко-коричневый, консистенция пастообразная.

Физиологические свойства, Аэроб, хорошо развивается в интервале

3-30 С.

Молоко не пептонизирует и не гидролиэует.

Желатину не разжижает.

Крахмал не гидролизует.

Клетчатку не разлагает.

Нитраты не восстанавливает.

Индол не образует.

При росте на ПМБ образует Н S H ннЗ °

Отношение к углеводам. Усваивает глюкозу, фруктозу, галактоэу, арабинозу, ксилозу, рамнозу, сахарозу, мальтоэу, лактозу, рафинозу, декстрин,фруктозо-1,б-дифосфат.

Отношение к спиртам. Усваивает глицерин, этанол, сорбитол, маннитол.

Отношение к органическим аминокислотам. Усваивает фолиевую, валерьяновую, винную, янтарную, яблочную, молочную, лимонную, масляную кислоты.

Отношение к аминокислотам. Усваивает аргинин и аспаригиновую кислоту.

Окисляет в соединениях тверхвалентный мышьяк в пятивалентный в слабощелочных условиях в присутствии 1 г/л глюкозы и и 0,1 г/л дрожжевого экстракта. Развитие бактерий сопровождается подкислением среды до рН 4-5. Бактерия способна окислять 1000 мг/л мышьяка эа 3 дня при 28ОС, тогда как в контроле (сре-, да без добавления бактерий) процесс окисления не наблюдается. При снижении температуры до 3 С скорость окисления несколько уменьшалась и это же количество мышьяка окислялось за б дней.

После б-й пассажей на косяки

МПА беэ добавления АР+ культура не утрачивала способности окислять мышьяк.

Чистая культура выделена на мясопептонном агаре, разведенном

1:10, и на агариэованной минеральной среде с 5 г/л глюкозы и 1 г/л

As+

Культура штамма Pseudomohos paeida 18 хранится в коллекции ВНИИ 0 генетики под номером ЦМПМ В-1827.

Выделен иэ шахтных вод золотоМышьяковистого месторождения.

Пример. Для получения посевного материала 1000 мл среды, 15 содержащей (г/л ) КН P0 1 0 (МН4 )р S04 1,0

КС1 0,05

Са (МО ) 0,1

ВаНС09 0,5

20 NaAsO 2,0

Дрожжевой экстракт 0,5

Стерилизует при 0,5 атм 30 мин

Растворы NaHC09 и NaAsO< стерилиэуют отдельно. Среду с добавками разливают в стерильные качалочные колбы по 200 мл, засевают из расчета

10% бактериальной взвеси на колбу.

Часть колб помещают в термостат

З0 при 28ОС, остальную часть в холодильник при З С.

Скорость окисления Ад в Аs определяют химическим методом — йодометрически.

ЗЗ Определяют количество клеток мышьякокисляющих бактерий в среде высевом íà MIIA в чашках Петри.

Штамм бактерий Pseudomonas pu tida 18,окисляющий соединения трехвалентного мышьяка и предназначенный для очистки сточных вод.

Хранится в коллекции Всесоюзного научно-исследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов под номером

ЦМПМ В-1827.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР по заявке М 2592110/28, кл. С 12 К 1/00, Я 1978.

2. Turner А.И. Aust l. Вiol. Sci

7, 452- 478, 1954 (прототип).