Способ выделения нематод

 

(ii) 852296

Союз Советских

Социалистических

Республик (51) М. Кл.

А 0 l К 67/00

Я ф

Государственный комитет (53) УД К 631.467.2 (088.8) flo делам изобретении н открытий (72) Автор изобретения

Л. В. Тихонова

Всесоюзный ордена Трудового Красного Знамени институт гельминтологии им. К. И, Скрябина (7 l ) Заявитель (54) СПОСОБ ВЪ|ДЕЛЕНИЯ НЕМА

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к методам защиты растений, и может быть использовано в селекции при выведении резистентных форм растений к нематодозам. 5

Известен способ выделения нематод, по которому исследуемый объект помещают в воронку, на нижний конец которой надевают резиновую трубку с энтомологической пробиркой или с зажимом, после чего в во- !о ронку наливают воду. Через сутки или несколько больше на дне энтомологической пробирки собираются нематоды (1 и 2).

Недостатком известного способа является то, что на дно пробирки наряду с актив- )> ными нематодами попадают неполноценные особи и сбор нематод осуществляют не ранее чем через 18 — 24 ч.

Целью изобретения является увеличение выхода нематод и сокращение сроков их 20 получения.

Цель достигается тем, что в искусственную питательную среду помещают тигли, заполненные на 3/4 — 4/5 объема водой, и после перехода нематод из питательной среды в 25 тигли из них собирают нематоды.

Способ осуществляют следующим образом.

В искусственную среду, находящуюся в кристаллизаторах, помещают нематоды и выращивают их. На 2 — -и размножения нематод в:среду помещают по 3 — 5 тиглей (диаметром 1 — 1,5 сМ и больше), вдавливая их в массу субстрата (среду) так, чтобы верхние края их возвышались над верхней поверхностью грибного мицелия на 3 — 5 мм.

Тигли заполняют водой на 3/4 — 4/5 объема.

Нематоды почти тут же начинают в них мигрировать из субстрата. Через 4 — 5 ч в каждом тигле насчитывается до 500 тыс. экземпляров нематод, через 10 — 14 ч — до

1,5 млн. особей, которые могут быть использованы для селекционных работ.

Пример. Для разработки научно-обоснованной системы мер борьбы с особо опасными фитонематодами (листовые виды) сельскохозяйственных культур, в частности для проведения сортоиспытания и селекции в полевых условиях, необходимым и важным условием является создание провокационных фонов, требуется высокоинвазионный биоматериал в больших количествах в виде чистой однородной культуры нематод.

Качество исходного инвазионного материала и время его получения проверяют в сравнительной оценке этого метода с общепринятым вороночным методом Бермана.

Результаты приведены в таблице.

852296

Сроки съема инвазионного материала и его инвазионная активность

Метод

Четвертый залив

Третий залив

Второй залив

Первый залив

Через каждые 14 ч

Вороночный

Активно-подвижных

4 О/

Пассивно-подвижных

Обоим

Неподвижных

30 о

Активно-подвижных

40о

Пассивно-подвижных

38 о

Неподвижных

22 о:

Активно-подвижных

70 обо

Пассивно-подвижных

24 об

Непод в и жн ых

5 о

Активных

Пассивно-подвижных

7бо

Неподвижных

93 о"

Через 12 ч

Активно-подвижных

) oooo

Через 8 ч

Активно-подвижных

100о

Через 16 ч

Активно-подвижных

100оо

«Экспресс-метод»

Через 4 ч

Акти в но- под ви жных! 0004

Формула изобретения

Составитель В. Косовец

Техред А. Камышникова

Корректор О. Тюрина

Редактор 3. Бородкина

Заказ 1824/9 Изд. № 49! Тираж 712 Подписное

НПО «Поиск» Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

Как видно из таблицы, разработанный

«экспресс-метод» обеспечивает максимальный выход высокоактивного инвазионного материала из искусственйых сред (100Я активных инвазионных особей нематод в каж- 5 дом съеме), резкое сокращение сроков съема исходного инвазионного материала (через каждые 4 — 5 ч) . При, использовании метода Бермана всю среду с нематодами помеШают в воРонки с воДой, в свЯзи с чЖс10 размножение нематод тут же прекращается, в то время как при «экспресс-методе» происходят одновременно съем инвазионного материала в тигли и интенсивное размножение нематод на среде, что увеличивает выход 15 биоматериала.

Ускоренный съем инвазионного материала в больших количествах обеспечивается, начиная уже через 4 — 5 ч с момента внесения тиглей (с водой) в субстрат кристаллизатора. 20

Способ выделения нематод, включающий их выращивание в искусственной питательной среде и сбор в емкости, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью увеличения выхода нематод и сокращения сроков их получения, в искусственную питательную среду помещают тигли, заполненные на 3/4 — 4/5 объема в oj, и после перехода нематод из питател реды в тигли из них собирают„ стг1*кники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Кирьянова Е. С. и Кралль Э. Л. Паразитические нематоды растений и меры борьбы с ними, т. 1, Л., 1969, с. 110 †1.

2. Авторское свидетельство СССР ,1ч" 530489, кл. А 01 К 67/00, 1975 (прототип).