Способ индикации менингококков

 

Оп ИСАНИ Е

И ЗОБтзЕТЕ Н ИЯ

К АВТОРСКЬМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (щ 943276

Союз Советскик

Социалистичвскик

Реснубник (61) Дополнительное к авт, свил-ву (Ы)М. Кл. (22)Заявлено 01.06.73 (21) 1934673/28-13 с присоединением заявки М

С 12 N 1/00

9кударатваивй какитет

СССР ав диан юееретениа н открытий (23) Приоритет (53) УД К 576.8. 093 .1(088.8) .

Опубликовано 15. 07.82. Бюллетень,% 26

Дата опубликования описания 15 .07 .82 (72) Автор изобретения

П . С . Цел ьни ко в

{71) Заявитель (54) СПОСОБ ИНДИКАЦИИ ИЕНИНГОКОККОВ!

Изобретение относится к медицине, а именно микробиопогической диагностике инфекционных заболеваний.

Известен способ индикации менингококков путем посева исследуемого ликвора на питательную среду, инку5 бирования посевов и определения са" харолитических свойств менингококков (1).

Однако этот способ длителен и тру- 1о доемок.

Цель изобретения - ускорение и упрощение способа.

Эта цель достигается тем, что согласно способу индикации менингококков осуществляемого путем посева исследуемого ликвора на питательную среду, инкубирования посевов и определения сахаролитических свойств менингококков, ликвор наслаивают на 2о поверхность столбика среды Хью-Лейфсона и после инкубирования сахаролитические свойства определяют непосредственно на данной среде.

Способ осуществляют следующим образом.

Исследуемый ликвор в количестве

О, 1-0,5 мл вливают в бактериологические пробирки. Состав индикаторной среды, : агар-агар 0,4; тестуглевод 0,5; пептон 0,5; хлористый натрий 0,5. А также индикатор рН, например, 0,0024 розоловой кислоты с 0,0084 водного голубого.

Пробирки ставят в термостат при

36-38 С. Учет результатов производят на другой день, а при отсутствии изменений — последующие 1-2 дня.

Если для определения сахаролитических свойств нужно использовать лишь небольшое количество ликвора, то перед посевом его разводят физиологическим раствором, например заливают в пробирки по 0,3-0,5 мл лИквора, разведенного в 10-50 раз.Разводить ликвор целесообразно также во всех случаях, когда он содержит

3276 ф 0

Формула изобретения

ВНИИПИ Заказ 5037/34 Тираж 505 Подписное

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород,ул.Проектная,4

94 достаточно большое количество менингококков .

Пример .1. Индикаторные сре" ды разливают по 2-4 мл в пробирки, )предпочтительно, агглютинационные.

:Состав сред, 3: на 100 мл дистиллированной воды агар-агар 0,4; пептои

0,5; хлористый. натрий 0,5; тест-уг|левод 0,5; розоловая кислота 0,002; .:водный голубой 0,008. Можно использовать и сухие индикаторные среды с углеводами: 2,03 такой среды берут на 100 мл дистиллированной воды.По

0,1-0,5 мл исследуемого ликвора вливают в пробирки на застывшую среду и ставят их в термостат при 3638 С.

Исследование ликвора начинают с приготовления из него мазка и изучения под микроскопом характера содержащейся в ликворе флоры.

Результат посева в пробирки (наличие роста, изменение окраски) учитывают на следующий день, а при отсутствии изменений — в последующие

1-2 дня.

П .р и м е р 2. Пробирки с индикаторными средами готовят, как в примере 1.

Исследуемый ликвор перед посевом разводят в 10-50 раз, например, 0,94ным раствором хлористого натрия.

Посев и учет результатов осуществляют как в примере 1. Посевную дозу берут 0,3-0,5 мл.

Il р и м е р 3. Пробирки с индикаторными средами готовят, как в примере 1, но перед тем, как разлить среду по пробиркам, к ней добавляют ристомицин иэ расчета !00 ЕД на 1 мл среды.

Посев и учет результатов осуществляют как в примере 1 и 2.

Параллельно со средами с ристомицином ликвор сеют на обычные среды.

Способ был применен на 18 культурах: предлагаемый способ - посев цельного ликвора или его разведений на простые сахара, а известный способ - посев выделенной культуры на сывороточные сахара.

Ни на сывороточных средах, ни на простых средах - в предлагаемом способе - не. наблюдалось неспецифических результатов: изменения окраски в пробирках с сахарозой, маннитом, лактозой, то есть с углеводами, которые менингококк не сбраживает.

Чувствительность среды по предложенному способу выше.

Все 18 образцов ликвора сбраживают глюкозу до кислоты. В пробирках с мальтоэой получено 17 положительных результатов, l отрицательный. На сывороточных средах изменение окраски в пробирках и глюкозой зарегистрировано в 7 случаях иэ 13 (5И), с мальтозой положительный результат отмечен еще реже. Изменение окраски в предложенном способе (на

zp простых средах) более выраженный, чем в известном.

Предложенный способ позволяет получить результаты на 1-3 дня быстрее, при этом экономится время,необ ходимое для выделения чистой культуры, упрощаются условия индикации менингококков, исключается необходимость добавления к индикаторной среде дефицитного ингредиента - сыворот-. ки.

Способ индикации менингококков путем посева исследуемого ликвора на питательную среду, инкубирования посевов и определения сахаролитических свойств меиингококков, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, ликвор наслаивают на поверхность столбика среды Хью"Лейфсона и после инкубирования сахаролитические свойства определяют непосредственно на данной среде.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней. Под ред, К,И.Иатвеева. M.

"Медицина", 1973, с. 326-332.