Питательная среда для выращивания спор микроорганизмов из рода @

 

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАПЩВАНИЯ СПОР МИ1$ РООРГАНИЗМОВ ИЗ РОДА BACILLUS, содержащая двузамещенный лимоннокислый аммоний, сернокислый магний, сернокислое железо, аминобензойную кислоту и воду, о т л ичающаяся тем, что, с целью удешевления среды .и сокращения срока выращивания спор, среда допол;нительно содержит картофельный крахмал, бактериальную оС амилазу, гидролизат дрожжей, лимоннокислый натрий, двузамещенный лимоннокислый калий, фосфорнокислый кальций и салициловую кислоту при следующем количес твенном .соотношении компонентов, г/л воцы: Картофельный 100-120 Гидролизат дрожжей ;:ао-25 Двузамещенный лимоннокислый калий 9-12 Лимоннокислый натрий Г9-12 Двузамещенный лимоннокислый аммоний ;t9-12 Фосфорнокислый кальций Сернокислый магний .J 2-3 еернокислое железо 6,02-0,04 Салициловая кислота 0,01-0,02 АмиИобензойная кислота0 ,02-0,04 Бактериальная rfамилаза0 ,4-0,6

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

ЗШ. С 12 Ы 1 20

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

0,4-0,6 с

ЮСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3354142/28-13

:(22) 19.08 81 .(4б) 15.05,83. Бюл. М 18 (72) Т.Ю. Падегимас, В.10. Авиженис, Г.И. Мицкуте, Ю.Б. Лапенис, Н.В. Садауникайте и Б.К. Тваска (7l) Всесоюзный научно-исследовательский институт прикладной энэимологии (53) 557.15(088.8) (56) 1. Мирзоева В.А. Бактерии группы сенной и картофельной палочек. М., 1959, с. 14.

2. Авторское свидетельст о СССР

М 410079, кл. С 12 N 1/20, 1972 (прототип). (54)(57) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДЬ ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ СПОР МИЪ РООРГАНИЗМОВ ИЗ РОДА

BACILLUS, содерЖащая двузамещенный лимоннокислый аммоний, сернокислый магний, сернокислое железо, аминобенэойную кислоту и воду, о т л ич а ю щ а я с я тем, что, с целью удешевления среды и сокращения срока

„.SU„„IО177Я; А выращивания спор, среда дополнительно содержит картофельный крахмал, бактериальную о(.-амилазу, гидролизат дрожжей, лимоннокислый натрий, двуэамещенный лимоннокислый.калий, фосфорнокнслый кальций-и салициловую кислоту при следующем количественном .соотношении компонентов, r/ë водыг

Картофельный крахмал, 100-120

Гидролизат дрожжей ;.20-25 двуэамещеиный лимоннокислый калий 9-12 лимоннокислый натрий t "..9-12

Двузамещенный лимоннокислый аваионий . ".9- 12

Фосфорнокислыйкальций 4-5

Сернокислый магний -",2-3 сернокислое железо 0,02-0,04

Салициловая кислота 0,01-0,.02

Аминобензойная кислота 0,02-0,04

Бактериальная Ыамилаза

1017729

2,5

1,5

1 5

0 02

0„001

0,007

Целью изобретения является удешевление среды и сокращение срока выращивания спор.

Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для выращивания спор микроорганизмов из рода Baciggus, содержащая двуэамещенный лимоннокислый аммоний, сернокислый магний, сернокислое железо, аминобензойную кислоту и воду, дополнительно содержит крахмал картофельный, гидролизат дрожжей, лимоннокислый натрий, двузамещенный лимоннокислый калий, фосфорнокислый кальций, салициловую кислоту и бактериальную d С-амилазу при следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды:

Картофельный крахмал 100-120

Гидролиэат дрожжей 20-25

Изобретение относится.к культивированию микроорганизмов, в частности к средам для выращивания спор, и может быть применено в различных областях микробиологической промышленности.

Известна питательная среда для выращивания спор микроорганизмов, содержащая в равных количествах мясо-пентонный агар и сусло-агар )1 ).

Недостатком данной питательной среды «вляется то, что споры выращивают на плотной среде, в результате чего процедура приготовления посевного материала сложна, а выход бактериальных .клеток низкий.

Наиболее близкой к предложенной является среда для выращивания спор микроорганизмов Вас1РРиз зиЬе101з, содержащая двуэамещенный лимоннокислый аммоний, сернокислый магний, сернокислое железо, аминобензойную кислоту, а также мальтозу, одноэаме щенный фосфорнокислый калий, двуэамещенный фосфорнокислый натрий, сер- нокислый кальций, сернокислый марганец и сернокислую медь при следующем соотношении компонентов, г/л воды;

Мальтоэа 100,0

Двузамещенный лимоннокислый аммоний 29,0

Однозамещенный фосфорнокислый калий 2,5

Двуэамещенный фосфорнокислый натрий

Сернокислый магний

Сернокислый кальций

Сернокислое железо

Сернокислый марганец

Сернокислая медь

Аминобензойная кислот:а 0,01

Недостатком известной среды является ее высокая стоимость и .необходимость длительного выращивания спорового материала (до 5 сут).

9.-12

4-5

2-3

О, 02-0, 04

0,01-0,02

9,0

9,0

Двузамещенный лимоннокислый калий 9-12

Лимоннокислый натPRA

Двуэамещенный лимоннокислый аммоний 9-12

Фосфорнокислый кальций

Сернокислый магний

Сернокислое железо

10 Салициловая кислота

Аминобензойная кислота 0,02-0,04

Бактериальная

cL-амилаза 0,4-0,6

Пример. Для выращивания спор микроорганизмов используют жидкую питательную среду при следующем соотношении компонентов, г/л воды:

Картофельный крахмал 100,0

Гидролизат дрожжей 20,0

Двуэамещенный лимоннокислый калий

Лимоннокислый натрий

Двузамещенный лимоннокислый аммоний 9,0

Фосфорнокислый кальций 4,и

Сернокислый магний 2,0

Сернокислое железо 0,02

Салициловая кислота . 0,01 Аминобензойная кислота . 0,02

Бактериальная d. †àìèëàэа 0,4

Питательную среду готовят следующим образом.

К 100 г крахмала приливают 200 мл

35 воды и 0,4 r бактериальной амилазы с активностью 600 ед/г. Суспенэию тщательно размешивают| клейстериэуют в водной ванне при 70 С. Оклейстериэованный крахмал разжижается под

40 влиянием бактериальной амилазы. Процесс ведут до образования зритродекстранов (красное окрашивание с иодом). Разжиженный крахмал быстро охлаж,"„ают и фильтруют через вату.

4 Другие компоненты растворяют последовательно в воде и смешивают с осахаренным крахмалом, общий объем доводят водой до 1000 мл. Устанавливают РН 6|6-6|8 с гомощью 403-ного

0 NaOH. Среду Размешивают и Разливают по плоскодонным колбам и стерилиэуют в течение 30 мин при 127 С. Среда после стерилизации темнеет„ РН падает до 6,0-6,2. Колбы с питательной средой засевают с помощью водной суспензии двухсуточной культуры, выращенной на MIIA.

Засеянные колбы выдерживают в термостате при 37 С в течение 2 сут

За зто время на поверхности среды бО развивается толстая равномерно сморщенная без коричневых и других пятен пленка культуры.

Сравнительная оценка роста бацилл на известной и предложенной

65 средах представлена в таблице.

1017729

Характеристика пленки после 48 ч на среде

Культура предложенной известной

Тонкая, неравномерная

Вас. subtiPis G-43

Толстая, равномерная

Вас. subtiPis 5?40

То же

То же

Вас. виЬ itis G-28

«Г!»

° !

Толстая, равноМерная

Вас ° виЬйИ1е 6-19

Вас. subtitis 0-22

Тонкая, неравномерная

Тонкая, неравномерная

Вас. subtitiВ G-.78 То ае

Толстая, равномерная

Вас. subt101s 103

Толстая, равномерная

Вас. subti8is 163 то же

Вас. subtiQis SK-52

«! °

То же

° °

«! »

° °

«!

Вас. subti9i.s 623

Рост отсутствует.

Вас. cereus 370

«! !

Вас. cereus 80-35

° !

То же

Вас. cereus 75-77

Тонкая, неравномерная

Вас. соади аиз 497

Вас.

Рост отсутствует

circulans 729

Вас. mesentericus 1

«! !»

centcsporus RFL-1

megatkerium 394

Вао.

° !

Вас.

На предложенной питательной сре- 45 де выраыивание спор микроорганизмов .из рода Baci60us длится 2 сут и поэволяет увеличить количество бактери.альных. клеток на единицу объема-до

Составитель Е. Воробьева

Техред В,Далекорей КорректорМ.Шароши

Редактор Л.Веселовская

»

Заказ 3481/28

Тираж- 523 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Вас. subt181s 402

Вас. заЬ 1В1в М-71

Толстая, равномерная

Тонкая, неравномерная

Толстая, равномерная

Рост отсутствует

Тенкая, неравнОмерная

10.10> клеток в 1 wt среды.

Стоимость предложенной среды

1,03 руб. за 1 л. Годовой зкономичес-. кий эФфект от реализации изобретения составит около 20 тыс.рублей.