Питательная среда для выращивания культуры ткани @ - продуцента гликозидов
ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ КУЛЬТУРЫ ТКАНИ ARALIACEALПРОДУЦЕНТА ГЛИКОЗИДОВ, содержащая KNOi, , CaCl22H20, , KH2PQ4, FeS04-7H2Q, Na2 ЭДТА «UH20, гп80ц.-)4Н,0, Na Mo042H20, КЗ, CuS04.5H2P, CoCl2 , HjBQj, агарагар , кинетин, гидролизат казеина, ot-нафтилуксусную кислоту, источник углерода и воду, отличающаяс я тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, она дополниР - , тельно содержит тиаминбромид ищ-инозит , а в качестве источника углерода желтый сахар при следующем соотношении компонентов, мг/л воды: 2if90-3040 ЮЮз 21 15-2650 38-593 CaCl2--2H20 481-5 3 MgS0..7H20 221-272 КН2Р04 19,6-333 FeSO JHyO 26l- i 7 Наг ЭДТА, 156-267 MnS04 H2€ 60-103 1,75-3 На„Мо04.- 2НоО 5.71-9,96 KJ 0,175-0,3 S 0,175-0,3 CoCl 3, HjBOg i,0-8,0 Тиаминбромид 5 00-6300 Агар-агар 0,5-1,5 Кинетин 300-600 Гидролизат казеина 50-100 ш-Инозит . о(.-Нафтилуксусная 1-3 кислота СО 20000-35000 Желтый сахар со ;о о со
СОЮЭ (СОВЕТСКИХ
Н Ь
РЕСПУБЛИН
SU „„1039963 A зцц С 12 К 5/00
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ
Ф !
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ /
К ABTOPCHOMY СВИД=ТЕЛЬСТВУ (21) 3401679/28-13 тельно содержит тиаминбромид ие-ино (22) 01. 12. 81 зит, а в качестве источника углерода(46) 07.09.83. Бюл. II 33 желтый сахар при следующем соотнове(72) Л.И. Слепян, И.И. Брехман, :.. йии компонентов, мг/л воды:
P.Ã. Бутенко, Н.В. Михайлова . KN03 2490-3040 . и P.È. Высоцкая БН БО 2145-2650 (71) Ленинградский химико-фармацев- CaC1>"2H20 438-593 тический институт MgSO4 7Н20 481-543 (53)Ь678. 044. 29(088. 8) - КНРО+ 221-272 (56), I . Писецкая Н.ф. К вопросу о . Fe$04.,7Hð0 194,6-333 подборе питательной. среды для культу", Hag ЭДТА, 261-447 ры тканей женьшеня. - "Растительные .. MnSO -4Hg9 156-267 ресурсы". Вып. 6, и 4, с. 516-522,. ZnSO 4+0 60-103 (прототип). ": Иа МоО+ 2Н20 1,75-3" (54)(57) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРА- КК 5,71-9,96
ЩИВАНИЯ КУЛЬТУРЫ ТКАНИ ARALIACEAL- CuSOg 5HgO 0,175-0,3
ПРОДУЦЕНТА ГЛИКОЗИДОВ, содержащая СоС12 6Н20 О, 175-0,3 1Н Ф<03, СаС12 2Н О, Mg$00 7Н20 .. НЗВОЗ 43 4-74
Ю210, Ре$0ф 7Н20, Ив2 ЭДТА Nn$0+x : Тйамйнбромид 4,0-8,0 4Н20, ZnSO+ Н О, 1;е>МоОу 2Н О, IQ, . Агар-агар 5400-6300
Си$0+ 5Н О, СоС > 6Н<О, Н ВОЗ, агар- -. Кинетин 0,5-1,5 агар, кийетин, гйдролизат казеина, -:-. Гидролизат казеина 300-600 а(;нафтилуксусную кислоту, источник ... In Инозит 50- IOO углерода и воду, о т л и ч а ю щ а я,,ot;Нафтилуксуснэя с я тем, что, с целью повышения Bblxo: кислота 1-3 да целевого продукта, она дополни- ..— Желтый сахар 20000-35600
В (ор 2660) -"-2310) (-"- 518) (— "— 472) — "— 238) (— "- 278) (— "— 336) (— "— 62) (оРФ 223) (-"- 86)
< -"-2l5) (-н-813) (-"-О, 25) (-"-0,25) (5600) (6) 300-600
50-100
0515
1-3 (2)
20000-35000 (25000) 1 3
20000-35000
Ф 1 399
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к получению гликозидов из растительного сырья, " Известна питательная среда для выращивания культуры тканей Агв11всеа1
6родуцента гликозидов, содержащая
KNOg NH@NOpу MgSOg 7Н О„ Своlг 2НгО„
КНуР04, РеЯ04 7H O, ИагЗфТА, Н>30З, Мпйо+ 4Н20, ZnSO+. 4Н20, Na ; @rap-агар, гидролиэат казеина, кине-: тин, d,-нафтилуксусную кислоту и во" ду С1 1 Однако известная среда не обеспечи-15 вает высокого выхода целевого продук" та. Целью изобретения является повышение выхода целевого продукта. Цель достигается тем, что питатель-20 ная среда для выращивания культуры тканей Araliaceal — продуцента гликоэидов, cодержащая KNO>, ИН4ИОз, СаС1ух 2НгО, MpSOy 7Нго, КН2РО, FeSO4 ". (Нго, Na ЭДТА, МпБО+ 4Нго, ZnS04w 25 " 4H20, Ие2Mo04 2H20, KJ, СиЯ04-5Н20, СоС1г 6H О, НЭНО агар-агар, кинетин, гидролизат казеина, Й-нафтилуксусную кислоту, источник. углерода и .воду, дополнительно содержит тиаминбромид 3о илт-инозит, а-в качестве источника углерода - желтый сахар при следующем соотношении компонентов, мг/л воды: КИО 2490-3040 ИН4ИОЗ 2145-2650 Са С12- 2Н 20 438-593 . apses - (н о 481 543 КНгР04 221-272 КеЯО+ 7НгО 194,6-333 Naг ЗДТА 261-447 MnSO4 156-267 ZnSn4.4Н2О 6О-103 ИагМоо4. 2Н20 1 75-3 KJ 5 71-9 96 сиЯ04 5нго 0,175-0ф3 CoC1г бнгО 0,175-0,3 Н Во 43,4-74 Тйаминбромид 4-8 Агар-агар 5400-6300 Кинетин 0,5"1 5 Гидролизат казе" ина 300-600 @-инозит 50-100 о(;нафтилуксусная кислота Келтый сахар Пример 1. Для приготовления среды готовят концентрат макросолей, 63 2 при этом каждую из макросолей раство ряют отдельно в небольшом количестве воды, а затем объем доводят до 1 л. Аналогично готовят концентрат микро" солей. Для приготовления 1 л питательной среды берут следующие соли„ мг/л: Макросоли: ИЧОЗ 2490-3040 ИН4ИО, "4 -26 -0 МяЯО+ (Н О 481-543 СвС1 2Н,О 438-593 ЕНгР04 221"272 Иикросоли; FeSO4- (H O 194,6-333 Na2 ЭДТА 261-447 Нзвоэ "3,4-74 МлЯО, .4Н Î i56-267 Zl>sn4*4H î 60-1О3 Na2Mo04 2Н О 1,75- 5 кт 5 71-9,96 сиЯО4 5нго 0,175-0,3 СоС . 6Н2о 0,175-0,3 Агар-агар 5400-6300 Тиаминбромид 4-8 Гидролизат казеина (5oo) щ инозит (80) Кинетин (1) а -на®тилyксycную кислоту Иелтый сахар Агар-агар растворяют путем кипячения в 500 мл воды. Иакро- и микросо-— ли в виде концентратов вносят в раствор агар-агара. Затем к полученной смеси добавляют желтый сахар гидроJ лизат казеина, кинетин и d.-нафтилуксусную кислоту и все тщательно перемешивают. Раствор доводят дистиллированной водой до 1 л. Среду разливают в колбы на 250 мл по 50 мл, 1 закрывают ватной пробкой под пергамент и стерилизуют в автоклаве 15 мин при 1 атм. Желтый сахар - недоочищенный полупродукт сахарорафинадного производства - содержит,3: редуцирующие сахара 1-2,, общий азот 0,03-0,04; минеральные вещества 0,3"0,4; вещества коллоидной степени дисперсности 1,0 l,4, органичеекие кислоты, сахароза; ll р и м е р 2. Иа полученную по примеру 1 питательную среду после затвердевания высаживают ткань исходного штамма женьшеня в возрасте 25 сут инокулюмом 7000-1000 мг и выращивают при 25+1о(в течение 25 сут., 3 1039963 4 Затем биомассу отделяют от пита- Данные о .выходе целевого продукта тельной среды, высушивают при 60 С . при выращивании культур тканей-предили лиофильно и используют либо цели- ставителей аралиевых и сравнительные 1 ком для получения настоек, экстрактов данные по выходу биомассы культуры . таблеток -либо для.извлечения глико- ткани и гликозидов приведены в табли1 5 зидов е . це. Питательная среда Культура ткани Воздушно-сухая масса ткани с 50 мл среды, г Сырая суммар- ная гликозид-. ная фракция,Ф Предлагаемая Panax quinquefolius Е 30 сут роста 0,68 7,2 Polyscias filiсifolia 45 сут роста 2,33 15,4 Известная Ряпях quinquefolius Z, 0,52 5,7 Polyscias filicifolia 1,72 12,7 Составитель Г . Смирнова Редактор Р. Циника ТехоедИ метелева Корректор А. Зимокосов Заказ 6о19/26 Тираж 523 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий Филиал ППП "Патент", r, Ужгород, ул. Проектная, 4 Использование изобретенйя позволит повысить прирост ткани в культуре Раnax quinquefolius Z на 304, а выход суммарной гликозидной фракции на 26, в культуре Polyscias filicifolia (Moore ех Fournier) Bailey повысить 30 I прирост ткани на 30, а выход суммарной гликозидной фракции на 203. Кроме того, использование желтого сахара позволяет удешевить сре.:ду и соответственно целевой продукт .
