Способ получения 3 @ ,4, @ 5 @ -триметоксиьензоата производных аповинкаминола или их солей

Авторы патента:

МАРИА ЗАЙЕР

ЧАБА САНТАИ

ЛАЙОШ САБО

БЕЛА РОШДИ

C07D461 - Гетероциклические соединения, содержащие индоло пиридо нафтиридиновые циклические системы, например винкамин (димерные алкалоиды индола C07D519/04)

A61P17 - Лекарственные средства для лечения дерматологических заболеваний

A61K31/475 - содержащие индольное кольцо, например йохимбин, резерпин, стрихнин, винбластин (винкамин A61K 31/4375)

A61K31/4375 - гетероциклическая система, содержащая шестичленное кольцо с азотом в качестве гетероатома, например хинолизины, нафтиридины, берберин, винкамин

1. Способ получения 3. ,4,5-триметоксибензоата производных аповинкаминога общей формулы i. с-о-онг -/ 8 ciis где - метоксигруппа или атом брома; СО R - атом водорода или R - атом водорода; R - атом брома, или их солей, отличающийся тем, что соединение общей формулы YVifH ЛЛ/.|.н 1 НО--СЙ2 CzH5 где R и К имеют указанные значения, подвергают взаимодействию с рёакционноспособным производным 3,4,5-триметоксибензойной кислоты и полученный целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде солей. 2. Способ ПОП.1, отличающ и и с я тем, что в качестве реакционноспсхзобного производного 3,4,5триметоксибензойной кислоты используют 3,4,5-триметоксибензоилхлорид.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТЪИЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

По ДЕЛАМ ИЗОВ ЕТЕНИй И OTHPblTHA

OllHCAHHE ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ПАТЕНТУ сно

eH c-o-en сщ> О с я (21) 3388657/23-04 (22) 10.02.82 (31) 324/81 (32) 11 ° 02.81 (33) BHP (463 23 ° 01 ° 84. Бюл. Р Я (72) Мариа Зайер, Чаба Сантаи, Лайош Сабо, Дьердь Калауш, Эгон

Карпати, Дьеньдьвер Кирай, Арпад

Кирай, Ласло Спорни, Бела Рошди и Лилла Форгах (BHP) (71) РииФер Гедеон Ведьесети Дьяр, РТ (BHP) (53) 547. 945. 1. 07(088. 8) (56) 1. Патент США р 4065458, кю1. 260-293.5, опублик. 1977.

2. Вейнганд-Хильгетаг. Методы эксперимента в органической химии.

М., 1968, с. 343-351.... SU „„Я}@ЩИ А

5(5П С 07 м0 461/00 // А 61 К 31/475 (54 ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 3, 4, 5 - ТРНИЕТОКСИБЕНЗОАТА ПРОИЗВОДНЫХ АПОВИНКАМИНОЛА ИЛИ ИХ СОЛЕЙ (57) 1. Способ получения 3 .,4,5 вЂ”

-триметоксибензоата производных аповинкаминога общей формулы

t . где R вЂ” метоксигруппа или атом брома;

R вЂ” атом водорода или R вЂ” атом водорода; к вЂ” атом брома, или их солей, о т л и ч а ю щ и и тем, что соединение общей формулы где R и Ф имеют укаэанные значения, подвергают взаимодействню с реакционноспособным производным 3,4,5-триметоксибензойной кислоты и полученный целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде солей.

2. Способ по п.1, о т л и ч а юшийся тем, что в качестве реъкционноспособного производного 3,4,5триметоксибензойной кислоты используют 3,4,5-триметоксибенэоилхлорид.

1069626

Изобретение относится к способам получения новых производных винкаминовых алкалоидов, именно 3,4,5

-триметоксибензоата производных аповинкаминола общей формулы

Х 10 и где R - метоксигруппа или атом 2 брома;

R вЂ” атом водорода или R" вЂ” атом водорода, R вЂ” атом брома, или их солей, обладающих ценными фармакологическими свойствами. 20

Известен 11-метокси аповинкаминол (аповинцинол) или его триметоксибензоат, полученный из природного винцина, который имеет влияние на состо-. яние кровеносных сосудов Щ . . 25

Цель изобретения вЂ” получение новых производных винкаминовых алкалоидов, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм.

Цель достигается тем, что соглас- Щ но способу, основанному на методе ацилирования спиртов в среде -органического растворителя с Помощью карбоновых кислот или их хлорангидридов в присутствии основания С21 и заключаю-З5 щемуся в том, что соединение общей .формулы

40 ф

45 где R и RÔ имеют вышеуказанные значения, подвергают взаимодействию с реакционноспособным производным 3,4,5-триметоксибензойной кислоты, предпочти-. тельно 3,4,5-триметоксибензоилхлоридом, и полученный целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде солей.

Пример 1. Получение 10-метоксиаповинкаминола.

55 г (1,64 ммоль) 10-метокси" аповинкамина растворяют в 18 мп безводного бензола. Приготовленный раствор при комнатной температуре и постоянном перемешивании смешивают с 60

0,8 мл натрийдигидро-бис-(2-метоксиэтокси)-алюмината и реакционную смесь перемешивают в течение 1ч. После завершения реакции к реакционной смеси прибавляют 2 мл этилового эфира уксусной кислоты, после чего смесь упаривают в вакууме. Полученный после упаривания остаток растворяют в 15 мл

2,5Ъ-ного раствора серной кислоты и значение рН раствора доводят до 10 посредством прибавления при охлаждении извне 40%-ного раствора гидроокиси натрия. Затем производят экстрагирование дихлорметаном (15,10,5 мл).

Объединенные органические фазы сушат над сернокислым магнием, фильтруют и упаривают в вакууме. Маслообразный остаток кристаллиэуют иэ ацетонитрида. В результате получают О, 45 г (81,2%) продукта. Т.пл. 148-150 С.

Брутто-формула С Н э N O . Мол. вес. 338, 45. ИК-спектр (KBr): g

1642,1603 см " (=С=С=). Масс-спектр:

338/26, 309/89, 307/5, 290/8, 268/100, 266/38, 237/21, 208/10, 115/9, 77/14, 43/64, 30/14.

Пример 2. Получение 10-метоксиаповинкаминол-3,4,5 -триметокС C сибензоата.

0,45 г (1,33 ммолв) 10-метоксиаповинкаминола растворяют в 10 мл безводного дихлорметана. К приготовленному раствору прибавляют 0,45 г безводного углекислого натрия и 0,34 г (1,48 ммоль) .хлорангидрида 3,4,5-триметоксибенэойной кислоты..Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч и затем замешивают ее с 15 мл воды. Органическую фазу отделяют и водную фазу еще два раза встряхивают с дихлорметаном, используя каждый раз по

5 мп последнего. Объединенные органические фазы .сушат над сернокислым магнием, фильтруют и упарлвают в вакууме..Полученный после упаривания остаток кристаллизуют из метилового спирта. В результате получают 0,45 г (63,1%) продукта, т.пл. которого составляет 167-168 С. o

Брутто-формула С Н N+O+. Мол. вес 532,63. ИК-спектр (KBr 725 ам (=C=0) 1655 см (=C=C=). Масс-спектр (m/е): 532/33, 501/100, 462/92, 322/20, 307/8, 292/85, 252/50.

Пример 3. Получение 10-бромаповинкаминола.

1,50 r (3,61 ммоль). 10-бромаповинкамина растворяют в 45 мл безводного бенэола и к приготовленному раствору при комнатной температуре и постоянном перемешивании прибавляют по каплям 4,5 мл натрийдигидро-бис-(2-метоксиэтокси)-алюмината (REDAL).

Смесь перемешивают в течение 2 ч °

После завершения реакции смесь смешивают c 10 мл этилового эфира уксусной кислоты и упаривают в вакууме.

Полученный после упаривания остаток растворяют в 150 мл 2,5Ъ-нбго раствора серной кислоты и при охлаждении извне раствор подщелачивают до„ рН 10

1069626 посредством прибавления к нему 40%ного раствора гидроокиси натрия ..

Затем раствор экстрагируют трижды дихлорметаном, используя 120,110 и

100 мл последнего. Органическую фазу сушат, фильтруют и затем упаривают в вакууме. Маслообразный остаток (1,8 r) кристаллизуют из 10 мл метилового спирта. В результате получают

1,10 r (78,4%) продукта, т ° пл. которого 178-180 С. 10

Элементный анализ.

Рассчитано,%: С 61,86, Н 6,23

N 7,22.

С Н, BrN>.. О (мол.вес.388,33).

Найдено, %: С 61,92, Н 6,43, 15

N 6,82%.

ИК-спектр (KHr) : Заву, 1630 см (=С=С=). :

Масс-спектр (m/е): 386/47, 388/48, 369/2 ю 371/3 357/96 s 359/95, у0

339/8, 341/6, 316/100, 318/88,237/13.

Примененный в качестве исходного вещества 10-бромаповинкамин получают следующим образом.

4,60 г (10,6 ммоль)10-бромвинками-у5 на и 92 мл ангидрида уксусной кислоты нагревают в течение 20 ч при тем-. пературе кипения реакционной смеси с обратным холодильником. Окрашенную в темнокоричневый цвет реакционную смесь упаривают в вакууме, полученНое в ниде остатка маслообразное вещество смешивают со 150 мл воды и при охлаждении производят подщелачивание- до рН 11 посредством прибавления к смеси 40%-ного раствора гидроокиси натрия. Смесь экстрагируют три раза дихлорметаном, используя последовательно 80,70 и 60 мл послед1 его. Объединенные экстракты сушат ад сернокислым магнием, фильтруют и 40 упаривают в вакууме. Полученный пос.ле упаривания остаток кристаллизуют из 15 мп метилового спирта. В резуль тате получают 3,60 г (81,7%) 10-бромаповинкамина, т.пл. которого 16,3- 45

165 С.

Элементный анализ.

Рассчитано, %: С 60,73, H 5,58, N 6,75.

Су H BrNgO (мол.вес. 415,33) .

Найдено, %: С 60,74, Н 5,55, N 6,69.

ИК-спектр (KBr): . мак 1718 см (=C=0), 1620 см (=C=C=) .

Масс-спектр (щ/е): 417/35, 415/36 55

388/180, 386/99, 347/90, 345/95, 331/8; 329/9, 306/9, 187/б .

Пример, 4. Получение 10-бромаповинкаминол-3 .,4,5 -триметоксибензоата.

О, 50 r (1, 29 ммоль) 10-бромаповинкаминола растворяют в 15 мп безводного пиридина и к приготовленному раствору прибавляют 0;4 r (1,74 ммоль)

3,4,5-триметоксибензоилхлорида. Реакционную смесь выдерживают в течение 24 ч при комнатной температуре и затем упаривают в вакууме. Остаток растирают с 5%-ным водным раствором кислого углекислого натрия (30 мл). Твердое .вещество отфильтровывают, промывают 15 мл воды и затем кристаллизуют из,5 :лл метилового спирта. B результате получают 0,55 r (73,5%) продукта, т.пл. которого

121-122 С.

Элементный анализ.

Рассчитано, %: С 91,96, Н 5,72, N 4,82.

Сз Н BriV O> (мол.вес 381,49).

Найдено, %: С 62,07, Н 5,81, iV 4, 90.

ИК-спектр (ЕВг): -"п,оч 1705 см (=С=О), 1640 см (=C=C=).

Масс-спектр (m/å): 580/39, 582/38, 551/100, 553/98, 510/86. 512/79.

370/19, 372/14, 340/33, 342/25, 342/25, 300/23, 302/19, 281/26, 2 12/23, 20 7/20 .

Пример 5. Получение гидротартрат 10-бромаповинкаминол-3, 4 ., 5 -триметоксибензоата.

Продукт, полученный в соответствии с примером 4, растворяют в диэтиловом эфире. К приготовленному раствору прибавляют насыщенный раствор

D-винной кислоты в диэтиловом эфире до .полного осаждения. Полученную соль отфильтровывают и сушат.

Т. пл. соли 118-120 С ..Мол. вес

371,58.

ИК-спектр (ЕВг): Л ю 1710 см (=C=0).

Пример б. Получение-(-)-11-бромаповинкаминола.

Из 0,40 г (0,88 ммоль) гидрохлорида (+)-11-бромаповинкамина в двухфазной системе, состоящей из 5 мл дихлорметана и 5%-ного водного раствора углекислого натрия, получают свободное основание. Органическую фазу отделяют, сушат над сернокислым магнием, фильтруют и упаривают в вакууме. Остаток растворяют в 5 мл безводного тетрагидрофурана. К приготов ленному раствору при комнатной темzпературе и постоянном перемешйвании прибавляют суспензию, приготовленную из 0,10 r литийалюминийгидрида и 10 мл безводного тетрагидрафура на..Реакционную смесь дополнительно перемешивают в течение двух часов, после чего производят разрушение избыточного количества восстановителя посредством прибавления 2,5 мл этилового эфира уксусной кислоты.

Неорганический осадок отфильтровывают и фильтрат упаривают в вакууме досуха. Остаток растворяют в 15 мл

2,5%-ного раствора серной кислоты, раствор подщелачивают до рН 8 посред ством прибавления концентрированного

1069626 раствора аммиака, после чего произ но дят экстрагирование трижды дихлорметаном, используя каждый раз по 5 мл последнего. Объединенные,органичес.кие растворы сушат над сернокислым магнием, фильтруют и производят удаление растворителя с помощью отгонки. Полученный продукт без дополнительной очистки применяют для осуществления дальнейшего взаимодействия.

Выход 0,26 r (76,5%).

Масс-спекrp (m/å,3): 386 (М, С Л2 Мр ОВг, 100)> 385/53, 371/89, 357/80, 330/31, 329/26, 328/25, 327/16, 316/23, 300 /16, 286 /27, )5

271/12, 249/10.

L<) =-120,3 > Тс $ =-144,2 (c=1,О7 дихлорметан).

Исходный материал, примененный в этом примере, получают следующим ъо способом.

1,00 г (2,21 ммаль (гидрохлорида (+)-11-бром-14-оксо-15-оксиимино-ЕвЂ” гомаэбурнана (получен известным способам) в смеси, состоящей из 25

37,2 мл безводного метилового спирта и 13,5 мл концентрированной серной кислоты, нагревают в течение 8 ч на бане с температурой 125 С. Затем реакционную смесь выливают в 20 мл нады со льдам, раствор падщелачивают до рН 8 посредством прибавления концентрированного раствора амгыака и три раза производят экстрагирование дихларметанам, используя каждый раз па 8 мл последнего. Обьединенные органические растворы сушат над сернакислым магнием, фильтруют и упаривают в вакууме. Остаток (0,88 г) растворяют н 3 мл ацетона, раствор подкисляют до рН 4 посредством при- 40 бавления к нему раствора хлористого водорода в ацетоне, после чего раствор упаринают н вакууме. Остаток после упаривания кристаллизуют из 3 мл ацетона. B результате получают 0,6 г 45 (60%) гидрохлорида (+)-11-бромаповинкамина, который затем перекристаллизовынают из ацетона. T.пл. 228 С, ИК-спектр (KBr): 1730 (сложноэфирный

СО), 1638 (С=С), 1610 см" (аромати- 5п ческая). Масс-спектр (m/е, .Ъ): 414 (М., Сь Н Ng О Br, 41), 385 (100), 356 (9i 2), 342 ().3,3?9 (10, 306 (137

265 (13), 204 (8,6), 191(9,8) .

C<3z =+37, б" ц =+46,2 (с=О, 35, дихлорметан) .

Пример 7. Получение гидрохлорид (-) /11-бромаповинкаминол-3, 4, 5 -триметоксибензоата.

О, 15 r <О, 39 ммоль) (-) -11-бромаповинкаминола растворяют в 2 мл безводного пиридина и приготовпенный раствор смешивают с 0,10 r. (0,43 ммоль) свежеперегнанного 3,4, 5-триметоксибензоилхлорида. Реакционную смесь выдерживают н течение дня при комнатной температуре. Затем к смеси прибавляют 0,2 мл воды и произнодят перемешинание н течение

30 мин. Затем ат смеси отгоняют растваритель и полученный остаток распределяют между 5 мл дихпарметана и Змл

5о-ного раствора сады. Органическую фазу отделяют, сушат над сернакислым магнием и после фильтрования упаривают н вакууме досуха. Полученный остаток (0,22 г) растворяют н 1 мл ацетона, значение рН раствора доводят да 4 посредством прибавления раствора хлористого водорода в метиловом спирте и образовавшееся кристаллическое вещество отфильтровывают. В результате получают 0 15 r (62,6-oo) указанного продукта. Т.пл.

1-7-159 С (из ацетона).

ИК-спектр (KBr): 1712 (сложнаэфирный -СО), 1645 (C=C), 1585 см (ароматическая).

Масс-спектр (в/е, .): 580 (M

С..ю Н . 120 Вг, 45), 565 (О у 8), 551(100), 510 (78), 369 (14), 339 (35), 299 (17), 256 (14), 255 (13), 212 (19) .

Удельное вращение основания, выделенного из гидрохлорида: 383

=-53,5, Гс 3; =-62,5 (c=0,78, дихлорметан).

Предлагаемые соединения, соответствующие изобретению, тормозят активность фермента фасфодиэстеразы и могут быть применены, в первую очередь, для лечения кожных заболеваний, связанных с патологическим размножением клеток, или для предохранения от повторного возникновения этих заболеваний.

Заболевания, связанные с патологическим разрастанием эпидермиса, являются сравнительно частными и затрагивают всего несколько процентов населения. Среди этих заболеваний существуют как доброкачественные, так и злокачественные, причем н качестве примера могут быть указаны psoriasis atopias dermatitis, первичный контактный дерматит, аллергнческий контактный дерматит, базои спиноклетачное раковое новообразование, лишай в виде рыбьей кожи, предшествующий стадии злокачестненного перерождения кератоз, кератоз, индуцированный светом, воспаление волосяного фолликула и себорейный дерматит. Некоторые виды заболеваний имеют место. только у людей, другие у людей и животных.

Так как часть заболеваний, связанных с патологическим размножением клеток, например, псориаз, не бывает у животных, противопсориазная активность соедйнений с помощью проведенных на животных опытов может быть подтверждена лишь косвенно.

1069626

Фоурхис и др.(Arch. 1)erm. 104, 359-365/1971) установил, что патоло-, гическое размножение клеток сопровождается понижением уровня у ц-АМФ (циклического аденозинмонофосфата).

Известно, что ц-АМФ образуется под действием аденилциклазы и разрушается благодаря фосфодиэстеразе. Фоурхису с успехом удалось оказать влияние на псориазный процесс с помощью средств, которые стимулируют действие . аденилциклазы (например, норепинэфрин) или тормозят работу фосфодиэстеразы (например, папаверин).

При проведении модельных опытов исходили из того, что установка Фоур- 5 хиса верна также в обратном направлении, когда для соединения доказано, что оно тормозит функцию фосфодиэстеразы, то благодаря этому косвенным образом достоверно может быть конс- 20 татировано, что соединение пригодно для лечения прориаза или других заболеваний, снязанных с патологическим размножением клеток. Позже это предположение также было подтверждено: 25 соединения, которые in vitro проянляют активность, проявляющуюся в тор- можении функции фосфодиэстеразы, также оказались пригодными для лечения псориаза при проведении клинических испытаний.

Модельные опыты осуществляли с применением фосфодиэстераэы, выделенной из ткани тела животного. Выделение фермента производили (из го- З5 лонного мозга крыс, головного мозга крупного рогатого скота и сердца крупного рогатого скота) методом

Х.В.Рихенберга.

Выделенный фермент очищали способом И.В.Хердмана и Е.В.Сутерлянда, а активность очищенного фермента определяли с помощью радиоизотопного метода Г.Реха. Для этой цели применя-45. ли избыток tritiiertem u-АМФ (10,1 моль ц-АМФ в качестве субстрата, 3-Нцц-АМФ 2,59 К В), и активность фермента определяли после инкубирования в течение 20 "мин как без тормозящего вещества, так и в присутствии 5 Ь соединения, подвергаемого исследованию. Иэ соединения при применении водного раствора соляной кислоты или диметилсульфоксида приготавливали

1-миллимолярный основной раствор, после чего этот раствор смешивали с инкудированным ферментным препаратоМ, который брали в таком количестве, чтобы в инкубированных пробах концентрации соединения соотнетстнова- 60 ли 5 ° 10, 1.10, 1.10, 5 10

10 моль/л. Аналогичным способом осуществляли параллельный опыт с применением папаверина в качестве эта лонного вещества.

Активность фермента, инкубированного без тормозящего вещества, принимали за 100%, а активности растворов, содержащих соединения общей формулы

I или папаверин, выражали н процентах к кон троЬьйому раствору. Результаты измерений, проведенных н случае фер-. мента, выделенного из сердца крупного рогатого скота, приведены в таблице °

Из таблицы видно, что тормозящее активность фермента дейстние всех трех исследованных соединений значительно лучше, чем действие известного параверина.

Первые клинические опыты были проведены с различными препаратами, пригодными для наружного применения (мази, крем, растворы, тинктура, пасты, аэрозоль). Примененный в опыте крем содержал в. различных случаях

2%, 1Ъ, 0,5Ъ, 0,25% или 0,1Ъ соединения общей формулы I.

Исследуемых субъектов выбирали из числа больных, страдающих псориазом.

При выборе исследуемых субъектов основным положением являлось то, что использованные в опыте больные одновременно не получали системного

immunosupressive, cytostatische или

glucoclsordikoide) лечения для основного заболевания.

Выбранных больных исследовали н группах по 5 субъектов с применением так называемого Plague метода. Симметрично расположенные участки измененной кожи в каждом случае обрабатывали с одной из сторон содержащим биологически активное вещество кремом, а с другой вЂ” индифферентным лекарством плацебо. На остальной соответствующей поверхности кожи больных производили прежнее наружное лечение кремом, примененным в качестве эталонного средства и широко применяемым для лечения псориаза, причем этот крем содержал в качестве биологически активного вещества флюметазон-пивалат и салициловую кислоту.

Исследование начинали при применении крема с большим содержанием би ологически активного нещества и продолжали с более низкими концентрациями. Кремом, содержащим наименьшую еще активную дозу, обрабатывали другого больного. Крем на большую поверхность кожи наносили два-три раза в сутки, причем лечение проводили до исчезновения или затухания недуга (в большинстве случаев 16 нед).

Активность оценивали посредством наблюдения за тремя симптомами: воспаление, инфильтрация, шелушение.

Интенсивность отдельных симптомов оценивали числами 1-3 и рассчитывали

1069626

Исследованное соеди- Активность фермента, В, к контнение (ингибитор рольному опыту при концентрации фермента)

5.10 . 1 10 5 ° 10 моль/л

10-метоксиаповинкаминол-3,4,5 -триме токсибензоат (в

ДМСО) 23,3

40,3

59,1

10-бромаповинкаминол-3,4,5 -триметоксибензоат (в

ДМСО) 61 8

67,8 (-)-11-бромаповинкаминол-3,4,5 -триметоксибензоат, НС1 (в воде) 31,9