Способ получения производных 4-дезацетилвинкалейкобластин- @ -3-карбоксигидразида

Авторы патента:

C07D519/04 - димерные алкалоиды индола, например винкалейкобластин

A61K31/475 - содержащие индольное кольцо, например йохимбин, резерпин, стрихнин, винбластин (винкамин A61K 31/4375)

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ П ОИЗЁОДНЫХ 4:-ДЕЗАЦЕТИЛ ВИНКАЛЕЙКОБЛАСТИН-С-З-КАРБОКСЙГИДРАЗИДА общей формулы f , --. v:,:v :: ш/ .. . - -С ,Н чГ СНзО .-я где d , где R - С С-аалканоил, бензоил; R - водород:, от л ся тем, что С -„З-Производное дезацетилвинкалей ,кобластина общей формулы СНзО где - Q-NHNH, вводят во взаюнодействие с ангидО ;рядом соответствующей кислоты с посш ;ледук |цим ввделевием целевого продук ,:та. ,, .. ,.,-, сг г 2. Способ по П.1, о т л и ч а ю со :ю щи и с я тем, что в качестве ангидрида кислрты используют уксусный ангидрид, ангидрид масляной кислоты или бензойный ангидрид.

СОЮЗ COSETCHHX

ШИЮИ

РЕСПУБЛИК 2Н5

0Н

GE30 н с,-н

3 0

С2Н5

OR 1

0 (21 ) 2925605/23-04 (б2) 2759650/23-04 . (22) .26.05.80 (23) 20.04.79 (31) 899032 (32) 20;:04.78 (33) США (46) 15.12.83. Бюл. В 46 (72): Джордж Джозеф Куллинан и Коерт Джерзон (СИ@) (71), Зли Лнлли энд Компани (ChlA) (5 3) . 547,. 94 . 07 (088. 8) (56) 1. Греков А, П. ОрганичЕская химия гидразина. Киев, 1966, с. 91 .2. Патент- Бельгии В 813168,. кл. С 07 0 519/04, опублик. 1976. (54). (57) 1. СПОСОБ.ПОЛУ ЕНИЯ ПРО

ИЗПОДЯЦХ 4.-ДЕЗАЦЕТИЛВИНКАЛЕИКОБЛАС

ТИИ-С-3-КАРБОКСИГИДРАЗИДА общей фОрмулы I.

„„SU„„1061698 А

Зщ) С 07 0 519/04 // A 61 К 31/475,К где ч - МН-Ий!, где R - С -С+-ajiканонл, бензойл; R вЂ” водород, .. отличающийся тем, что

C - 3-производное дезацетилвинкалей.кобластина общей формулы гДе вЂ” © - ННННГ, вводят во взаимодействие с ангидридом соответствующей кислоты с пос- ледующим выделением целевого продук та.

2. Способ по п.l, о т л и ч а юшийся тем, что в качестве ангид, рида кислоты исполъзуют уксусный ангидрид, ангидрид масляной кислоты или бензойный ангидрид.

1061698

Изобретение относится к способу получения новых синтетических производных алкалоидов рода:vinca, а именно производных 4-дезацил-винкалейкобластин (ВЛБ)-С-3-карбоксигидразида общей формулы вЂ” вЂ” вЂ” -С2Н5 о-сн, --С Н5

ОК

1 Но C-Gt з

° д Q вЂ” NHN „,, где R вЂ” C2-С+ алЮ

° д! Ф ноил бензоил, R - атом водорода, обладающих противоопухолевыми с о в йстВ ами °

Известен способ получеиия ацилированных гидразинов путем взаимодействия гидразиногруппы с ангидридом карбоновой кислоты (1 ).

Использование известного метода позволяет получать новые производные 4-дезацил-ВЛБ-С-3-карбоксигидразида общей формулы 1, обладающие ценными фармакологическими свойствами.

Цель изобретения - расширение арсенала средств воздействия на живой организм.

Цель достигается тем, что согласно предлагаемому способу С-3производное 4-дезацетилвинкалейкобластина общей формулы

0Н

С2Н5

- вЂ” -(. 2Н5

ОК

f НО С-0

СН, m3 О

-гДе Q вЂ” ННННГ, вводят во взаимодействие с ангидридом соответствующей кислоты с последующим выделением целевого продукта известными методами.

Процесс проводят с использованием предпочтительно уксусного ангидрида, ангидрида масляной кислоты или бензойного ангидрида.

Исходные соединения - 4-дезацилВЛБ-С-3-карбоксигидраэиды получают по известному методу путем нагрева5 ния ВЛБ и гидразина в герметично закрытом сосуде в среде безводного метанола C23.

Исходные соединения получают следующим образом.

{О 4-Дезацетил-ВЛБ-С-3 карбоксигидразид.

4-ДезацетилВЛБ нагревают в среде безводного этанола с избытком безводного гидразина в запаянном реак-ционном,сосуде при температуре около 60 С примерно 18 ч. Реакционный сосуд охлаждают, вскрывают, содержимое удаляют и летучие компоненты удаляют в вакууме. Полученный остаток, содержащий 4-дезацетилВЛБ-С-3-карбоксигидразид переводят в дихлорметан; дихлорметановый раствор промывают водой, отделяют и высушивают, после чего дихлорметан удаляют выпариванием в вакууме. Полученный остаток растворяют в растворителе вЂ” смеси хлороформа с бензолом (1:1) и хроматографируют над силикагелем. Для проявления хроматограммы используют в качестве растЗ0 ворителя для элюирования, смесь бензол-хлороформ-триэтиламин. Начальные хроматографические фракции содержат непрореагировавший 4-дез. ацетилВЛБ. Дальнейшие фракции, как

35 было найдено, содержат 4-деэацетил18 -дескарбометоксиВЛБ-С-3-карбоксигидразид. Следующие фракции (как было найдено по методу тонкослойной хроматографии) содержат 4-дезацетилВЛБ-С-3-карбоксигидраэид. Их объединяют и выпаривают растворитель в вакууме. Полученное твердое вещество плавится при 219-220 С с разложением.

45 4-ДезацетилВЛБ-С-З-карбоксазид.

Растворяют 678 мг 4-деэацетилВЛБ-С-3-карбоксигидразида в 15 мл безводного метанола. Добавляют около 50 мл 1 н. водного раствора хлористоводородной кислоты и полу50 ченный раствор охлаждают примерно до ООС. Затем добавляют приблизительно 140 мг нитрита натрия и образовавшуюся реакционную смесь перемешивают 10 мин,подцерживая температуру около 0 С. По мере добавления нитрита натрия раствор приобретает темную, рыжевато-коричневую окраску. Затем реакционную смесь подщелачивают путем добавления хо60 лодного 5%-ного водного раствора бикарбоната натрия. Водный раствор трехкратно экстрагируют дихлорметаном. 4-Дезацетил-ВЛБ-С-3-карбоксамид переходит вдихлорметан. Ди65,хлорметановый раствор 4-дезацетил1061698 виндластин-С-3-карбоксазида обычйо применяют без дополнительной очистки, Пример 1. Получение 4-дезацетилВЛБ-С- 3 й-ацетилкарбок сигидразида.

300 мг уксусного ангидрида добавляют к раствору 1500 мг 4-дезацетилВЛБ-С-3-карбоксигидраэида в 50 мп метилеидихлорида. Реакционную смесь выдерживают 3 ч при комнатной температуре. Затем дихлорметановый раствор промывают разбавленным водным раствором аммиака и снова водой.

Дихлорметановый раствор высушивают и выпаривают досуха. Получают рыжевато-коричневый аморфный порошок.

4-Дезацетил ВЛБ-С-ЗИ2-ацетилкарбоксигидразид имеет следующие физические характеристики: выход 750 мг M.5:m/å=

@810 (М+). ИК-спектр: g =3410 см " (N-Н), 1720 см "(СОО), 1670 см (СОМ).

4-Дезацетил ВЛБ С-ÇN -дихлорацетилкарбоксигидразид получают аналогичным образом путем замены ангидрида дихлоруксусной кислоты на ангидрид уксусной кислоты

Пример 2. Получение 4- дезацетоксиВЛБ-С-Зй -бутирилкарбокси2 гидразида.

120 мг ангидрида масляной кислоты .добавляют к раствору 768 мг 4-дезацетилВЛБ.-С-Ç-карбоксигидразида в

50 мл дихлорметана. Сосуд для проведения реакции запаивают и оставляют на ночь при комнатной температуре.

Затем реакционную смесь экстрагируют разбавленным водным раствором аммиака и экстракт отбрасывают. Оставшийся дихлорметановый раствор высушивают и выпаривают досуха. Остаток хроматографируют над силикагелем. Для отмывки с адсорбента применяют смесь этилацетата с метанолом (1:1). Фракцию, содержащую (по.данным тонкослойной хроматографии) конечный продукт, объединяют и объединенные фракции выпаривают досуха.

Получают рыжевато-коричневый аморфный порошок (128 мг). 4-Дезацетил

ВЛБ С-ÇN2-бутирилкарбоксигидраэид имеет следующие физические характеристики М, 5: в/e=838 (М }, 497, 355, 154.

Пример 3. Получение 4-дезацетилВЛБ-С-ÇN -бензоилкарбокси2 гидраз ида.

К раствору 768 .мг 4-дезацетилВЛБ-С-3 карбоксигидраэида в 50 мл дихлорметана добавляют 240 мг бейзой ного ангидрида. Сосуд для проведения реакции запаивают и оставляют на ночь при комнатной температуре.

Сосуд для проведения реакции вскрывают и содержащийся в нем дихлорметановый раствор промывают разбавленным водным раствором аммиака; затем водой для удаления солей бен зойной кислоты. Дихлорметановый раствор затем высушивают и выпаривают досуха. Аморфный порошок хроматографируют на силикагеле, отмывают " адсорбента смесью этилацетат метанол (1:1). Фракции, содержащие конечный продукт, определенный по тонкослойной хроматограмме(силикагель и смесь этилацетата - метанол (1:1), объединяют и выпаривают досуха. Получают рыжевато-коричне10 вый аморфный порошок (150 мг).

4-ДезацетилВЛБ-С-ЗЙ -бенэоилкарбоксигидразид .имеет следующие физические характеристики: M,S. m/е=872 М, 813, 531, 355, 154. ЯМР-спектр; со15 держание предложенной структурыу новые ароматические протоны при

Р=7,3-8,0.

1 Соединения формулы 1 оказались активными при ингибировании роста петр ресаженных опухолей у мыши и/или при увеличении продолжительности жизни у мышей с инокулированной опухолью.

Лекарственный препарат вводят обычно парэнтерально при заданном

25 уровне дозировки в течение 7-10 дней.

Величину опухоли измеряют на 7.-й или 11-й день в случае ингибирования роста опухоли. Если имелось в виду продление жизни, то определя30 ют, сверх программы,. короткий промежуток времени жизни у обработанных животных в сравнении с контрольными животными.

В таблице приведены результаты экспериментальных исследований, в ходе которых мышь с пересаженной опухолью обрабатывают соединением формулы I.

Новые производные гидразида формулы отличаются цо противоопухолевому спектру от ВЛБ, винкристина и виндезина, а также от С-.4, N, йдиалкилглициловых сложных эфиров ВЛБ.

Противоопухолевые спектры данных соединений различаются между собой.

45. При этом соединения являются эффективными против определенных опухолей или классов опухолей.

Различие дозировки определяется различием относительной активности винкристина и ВЛБ, а также нового лекарственного препарата при опытах с одной и той же экспериментальной опухолью на мышах.

Новые производные гидразида формулы 1 В качестве средств,для лече» ния новообразований вводят парэнтерально (применяются иэотонические растворы, содержащие 1-10 мг/мл соединения формулы I). С лечебной целью соединения вводят в дозе

0„01-1 мг/кг, .предпочтительно 0,1

1 мг/кг веса млекопитающего, один или два раза в неделю или каждые две недели в зависимости от активности и токсичности данного.лекарст65 венного препарата.

1061698

Ю ЮЮЮЮЮ

Ингибированив или цролонгирование, Ф

Опухоль Доза, мг/кг дней

Соединение юеюююю е

3 дня

7 дней

100

ГЛС

26 0 5 ° 10

0,25 ° 10 .0,125 ° 10

55.