Питательная среда для определения биологической активности гелиомицина
ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ГЕЛИОМИЦИНА, содержащая источник азота, минеральные соли, arap-arap и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с повышения точности определения, она дополнительно содержит глюкозу, в качестве источника азота она содержит мочевину, в качестве минеральных солей - аммоний хлористый и натрий фосфорнокислый двузамещенный при следующем количественном соотношении ингредиентов, г/л: Мочевина1,5-2,5 Аммоний хлористый 1,5-2,5 Натрий фосфорнокислый двузамещенный 10-20 I Глюкоза5-10 Arap-arap15-20 (Л С Дистиллированная водаОстальное
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
36Ю С 12 О 1 04
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н ABTOPGHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
fl0 ДЕЛАЮ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3489972/28-13 (22) 25 ° 06.82 (46) 30.03.84. Бюл. Р 12 (72) Е.М.Верштейн, Н.Г.Васильева, М.С.Поляк, P.Г.Петропавловская и М.Г.Раэоренова (71) Всесоюзный научно-исследовательский технологический институт антибиотиков и ферментов медицинского назначения (53,) 576.8.093.31 (088.8) (56) 1.Кочеткова Г.В., Маткиаенкова Е.A., Ухолина P.Ñ. и др. Определение биологической активности гелиомицина методом диффузии в агар.
"Антибиотики", 1975, 9 б, с. 499-502 (прототип). (54)(57) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ
ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ AKTHBHOC„.э „„«,082ф17 A
ТИ ГЕЛИОМИЦИНА, содержащая источник азота, минеральные соли, агар-агар и дистиллированную воду, о,т л.ич а ю щ а я. с я тем, что, с целью повыщения точности определения, она дополнительно содержит глюкозу, в качестве источника азота она содержит мочевину, в качестве минеральных солей - аммоний хлористый и натрий фосфорнокислый двузамещенный при следующем количественном соотноше. нии ингредиентов, г/л:
Мочевина 1,5-2,5
- Аммоний хлористый 1,5-2,5
Натрий фосфорнокислый двуэамещенный 0 -20
Глюкоза 5-10
Агар-агар 15-20
Дистиллированная вода Остальное
1082817
10 -20
5 — 10
15-20 30
Остальное
Определение биологической активности гелиомицина на двух питательных средах
Среда
Известная (и ) Предлагаемая и ) Образец
A g, Eg/мл
Ag Eg/мл
ЗХ
Нх
993 10
997,5 10
989,7 10
996,8 10
986
18,7
5,2
1006,7
10,3
2,9
10,8
997
6,3
14,9
1001,7
3,1
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается определения активности антибиотиков.
Известна питательная среда для определения биологической активности гелиомицина, содержащая источник 5 азота - перевар Хоттингера, минеральные соли Масг и К2НРОФ агар-агар и дистиллированную воду (1J
Однако известная среда не обеспечивает высокой точности определения.
Цель изобретения — повышение точности определения.
Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для определения биологической активности гелиомицина, содержащая источник . азота, минеральные соли, агар-агар и дистиллированную воду, дополнительно содержит глюкозу, в качестве источника азота она содержит мочевину, в качестве минеральных солей аммоний хлористый и натрий фосфорнокислый двуэамещенный при следующем количественном соотношении ингредиентов, г/л:
Мочевина 1,5" 2,5
Аммоний хлористый 1,5-2,5
Натрий фосфорнокислый двуэамещенный
Глюкоза
Агар-агар
Дистиллировання вода р и м е р 1. Для определения биологической активности гелиомицина готовят питательную среду следую- 35 щего состава, г/л: аммоний хлористый 2; мочевина 2; натрий фосфорнокислый двуэамещенный 15; глюкоза 5; агар-агар 18; вода дистиллированная до 1 л (рН после стерилизации 7,8- 4()
8,0), расплавляют на водяной бане, охлаждают до 70 С и вносят 10 спор
Вас i llus subt i 1 i s АТСС 6633 на 1 мл среды. Засеянную питательную среду разливают по 10 мл (один слой) в сте-А рильные чашки Петри. После застывания .итательной среды делают лунки и подсушивают чашки со средой при комнатной температуре 15-20 мин. Далее лунки заполняют растворами контрольной сре (4 мкг/мл) и испытуемой концентрации гелиомицина в 0,1 н.
NaOH. Затем чашки помещают в термостат при 37 С. После 18-20 ч инкубации замеряют диаметры эон задержки роста тест-микроба и расчитывают активность испытуемого образца по предварительно построенной стандартной кривой с испольэованиегл концентраций гелиомицина 2,4; 3,0; 4,0;
5,0; 6,0 мкг/мл в 0,1 н.раствора
NaOH.
Пример 2. Для определения биологической активности гелиомицина используют питательную среду следующего составаг г/л: аммоний хлористый 1,5: мочевина 2,5; натрий фосфорнокислый двуэамещенный 10; глюкоза 7,5; агар-агар 15; вода дистиллированная до 1 л (рН после стерилизации 7,8-8,0); Условия проведения анализа аналогичны примеру 1, Пример 3. Для определения биологической активности гелиомицина используют питательную среду следующего сбстава, г/л: аммоний хлористый 2,5; мочевина 1,5; натрий фосфорнокислый двуэамещенный 20; глюкоза 10; агар-агар 20; вода дистиллированная до 1 л (рН после стерилизации 7,8-8-,0). Условия проведения анализа аналогичны примеру 1.
Пример 4. Для сравнения воспроизводимости результатов определения биологической активности гелиомицина были многократно проанализированы несколько предлагаемой и известной партий гелиомицина на питательных средах. Полученные результаты вместе с их стандартными отклонениями приведены в таблице. Результаты определения на сравниваемых питательных средах совпадают (с учетом погрешностей определения), а воспроиэводимость результатов на предлагаемой среде выше.
1082817
Продолжение таблицы
Среда
Образец
Предлагаемая
А, Eg/мл
10 10,5 989,9 10 3,3
10 13,2 1000,1 10 3,3
П р и м е ч а н и е. А . — средняя арифметическая биологической активности гелиомицина; n - число вариант; 8>- среднеквадратичное отклонение среднего арифметического.
Использование синтетической пита- диффузионныхсвойств среды и снижения тельной среды позволяет повысить точ- вариабельности результатов определеность определения путем улучшения 20 ния,а также снизить себестоимость среды.
Составитель Г.Смирнова
Редавтор Л.Пчелинская Техред О.Неце Корректор Г. Решетник
Тираж 522 Подписное.
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5
Заказ 1677/24
Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная,4
988,8
1005,3
Известная п
