Штамм streptomyces erythreus 85-1 - продуцент эритромицина
(19)SU(11)1092951(13)A1(51) МПК 6 C12P19/62C12P19/62, C12R1:465(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯк авторскому свидетельствуСтатус: по данным на 27.12.2012 - прекратил действиеПошлина: учтена за 20 год с 02.10.2001 по 01.10.2002
(54) ШТАММ STREPTOMYCES ERYTHREUS 85-1 - ПРОДУЦЕНТ ЭРИТРОМИЦИНА
Изобретение относится к микробиологии и касается получения антибиотика эритромицина. Известен штамм Streptomyces erythreus ЭР-179 - продуцент эритромицина. Однако этот штамм обладает высокой продуцирующей активностью на среде с пропиловым спиртом (6580 мкг/мл в лабораторных условиях). Использование пропилового спирта удорожает производство и создает определенные трудности при проведении ферментации. Известен также штамм Streptomyces erythreus 8-77 - продуцент эритромицина. Однако штамм 8-77, хотя и не требует наличия пропилового спирта в среде, однако не обеспечивает высокой продуцирующей активности (4500 мкг/мл в лабораторных условиях). Целью изобретения является создание штамма, способного расти на среде без пропилового спирта и обладающего высокой продуцирующей активностью. Эта цель достигается созданием штамма Streptomyces erythreus 85-1 - продуцента эритромицина. Штамм 85-1 получен из штамма 2-97 в результате многоступенчатого отбора на среде без пропилового спирта. В процессе отбора была использована обработка мутагенами, а именно ультрафиолетовым облучением в дозе 1000 эрг/мм2 в комбинации с 1%-ной нитрозодиметилмочевиной при экспозиции 2 ч и 2%-ным нитрозометилбиуретом при экспозиции 3 ч. Штамм Streptomyces erythreus 85-1 хранится в коллекции ВНИИА под номером 1678 и характеризуется следующими признаками. Культурально-морфологические признаки. Спороносцы спиральные с большим количеством спор, спорангии отсутствуют, подвижные споры отсутствуют, образование спор происходит на воздушном мицелии, фрагментации мицелия не наблюдается. Кукурузная среда. Колонии слегка приподняты над субстратом, слегка радиально-складчатые, спорулирующие. Воздушный мицелий светло-серого цвета. Субстратный мицелий коричневый. Диаметр колоний 5-6 мм. Среда с 2% глюкозы. Колонии плоские с пленчатым ободком, воздушный мицелий белый, субстратный мицелий светло-желтый. Диаметр колоний 2-3 мм. Овсяная среда. Колонии плоские, воздушный мицелий образует концентрические круги. Цвет воздушного мицелия белый. Субстратный мицелий желтый. Диаметр колоний 4-5 мм. Гороховая среда. Колонии выпуклые, неправильной формы, морщинистые, воздушный мицелий белый, субстратный мицелий желтый. Диаметр колоний 4-5 мм. Синтетическая среда с крахмалом. Колонии плоские, воздушный мицелий образует концентрические круги, в середине пуговка, слегка приподнятая над субстратом. Воздушный мицелий белый, субстратный мицелий светло-желтый. Диаметр колоний 2-3 мм. Среда Гаузе органическая с глюкозой. Колонии слегка приподняты над субстратом, неправильной формы. Воздушный мицелий светло-желтого цвета, субстратный мицелий желтый. Диаметр колоний 2-3 мм. Среда Ваксмана. Колонии слегка приподняты над субстратом, неправильной формы, морщинистые, слегка радиально-складчатые. Воздушный и субстратный мицелий светло-желтый. Диаметр колоний 3-5 мм. Среда Чапека. Колонии плоские, пленчатые, воздушный мицелий слабо развит, светло-желтого цвета. Субстратный мицелий светло-желтый. Диаметр колоний 1-2 мм. Физиолого-биохимические признаки. Сбраживает арабинозу, глюкозу, инозит, сахарозу, сорбит, ксилозу, мальтозу, фруктозу, рамнозу, слабо сбраживает лактозу, маннит. Реакция на инверсию сахара положительная. Реакция на гидролиз крахмала - начало обесцвечивания на 1-е сутки, полное обесцвечивание на 4-е сутки. Начало разжижения желатины на 10-е сутки, полное разжижение на 20-е сутки. Начало пептонизации молока - на 11-е сутки, полная пептонизация - на 20-е сутки. Накапливает до 6500 ед/мл эритромицина. Хорошо развивается и выделяет антибиотик при температуре 85 
1оС. П р и м е р 1. Культурой штамма Streptomyces erythreus 85-1 засевают посевную среду следующего состава, мас.%: Глюкоза 2,25 Кукурузный экстракт 1,0 Аммоний сернокислый 0,1 Натрий хлористый 0,25 Мочевина 0,001 Мел 0,5 Выращивание производят при температуре 35 1оС на круговой качалке в течение 48 ч. Полученным посевным мицелием в количестве 10% засевают ферментационную среду следующего состава, мас.%: Кукурузная мука 6 Гидрол (техн. вес.) 6 Кукурузный экстракт (техн.вес.) 0,8 Соевая мука 1,2 Аммоний сернокислый 0,4 Мел 1,0 Жир 0,4
Ферментацию проводят на круговой качалке при температуре 35 1оС в течение 7 суток. В конце процесса определяют содержание эритромицина биологическим или химическим методами. Содержание эритромицина составляет 6500 ед/мл (в лабораторных условиях). П р и м е р 2. Посевным мицелием, полученным в колбе по способу, указанному в примере 1, засевают посевной аппарат вместимостью 500 л со средой для выращивания посевного материала, состав которого указан в примере 1. Мицелий, полученный в посевном аппарате, передают в ферментатор вместимостью 3 м3 со средой для ферментации, указанной в примере 1. Ферментацию проводят в течение 155 ч при непрерывной работе мешалки и подаче сжатого стерильного воздуха в аппарат в асептических условиях при температуре 35 1оС. Активность в конце процесса определяют химическим или биологическим методами. Содержание эритромицина составляет 4500 ед/мл (в производственных условиях). П р и м е р 3. Ферментацию проводят, как в примере 2, только выращивание посевного материала в аппаратах ведут в две стадии, сначала в инокуляторе вместимостью 2 м3, потом в посевном аппарате вместимостью 10 м3. Процесс ферментации проводят в ферментаторе вместимостью 50 м3 в течение 144 ч. Содержание эритромицина в культуральной жидкости в конце процессе составляет 4000 ед/мл. Использование штамма Streptonyces erythreus 85-1 позволяет получать эритромицин на питательной среде без пропилового спирта с созданием высокой продуцирующей активности. Кроме того, способность штамма 85-1 расти при температуре 35 1оС дает возможность снизить расход охлаждающей воды, необходимой для поддержания температуры культивирования.
Формула изобретения
