Способ окраски эритроцитов на гистологическом препарате
СПОСОБ ОКРАСКИ ЭРИТРОЦИТОВ НА ГИСТОЛОГИЧЕСКОМ ПРЕПАРАТЕ, включающий обработку в фиксаторе, промывку и протраву с последующей докраской красителем, отличающийся тем, что, с целью выявления инсулинотропных эритроцитов, фиксацию проводят в течение 1530 мин при 60-65 С, причем в качестве фиксатора использзтот состав, содержащий бихромат калия, хромат калия и фосфат натрия одноэамещенный при следующих соотнощениях компонетов , мае. %: Бихромат калия 15,0-15,5 Хромат калия 1,0-1,5 Фосфат натрия однозамещенный1 ,5-1,6 ВодаОстальное 3 а в качестве протравы используют 1%-ный раствор фосфорно-вольфрамата натрия.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
РЕСПУБЛИН
agl 01) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Ьеыайм1", К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТЮ (2 1) 3488998/28-13 (22) 01.09.82 (46) 30.07.84. Бюл. 9 28 (72) Г.А.Золенко (71) Чечено-Ингушский государственный университет им. Л.Н.Толстого (53) 615.475(088.8) (56) 1. Лилли P. Патогистологическая техника и практическая гистохимия.
М., "Мир", 1973, с. 11.
2. Сандуляк Л.И. Эритроциты как депо и система транспорта инсулина.
Доклады Академии наук СССР, 1974, 219, 4, с . 1020-1022. (54)(57) СПОСОБ ОКРАСКИ ЭРИТРОЦИТОВ
НА ГИСТОЛОГИЧЕСКОМ IIPEIIAPATI:, включающий обработку в фиксаторе, промывку и протраву с последующей
ЭЮ С 01 Ы 1/28 А 61 В 10/00 докраской красителем, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью выявления инсулинотропных эритроцитов, фиксацию проводят в течение 1530 мин нри 60-65 С, причем в качестве фиксатора используют состав, содержащий бихромат калия, хромат калия и фосфат натрия однозамещенный при следующих соотношениях компонетов, мас. 7.:
Бихромат калия 15,0-15,5
Хромат калия 1,0-1,5
Фосфат натрия однозамещенный 1,5-1,6
Вода Остальное а в качестве протравы используют
1Х-ный раствор фосфорно-вольфрамата натрия.
1105468
Изобретение относится к медицине, I а именно к области цитохимических исспедований крови.
Известен способ окраски эритроцитов, включающий их обработку в фиксаторе и докраску красителем Романовского-Гимза (1) .
Однако данный способ не позволяет выявить инсулинотропные эритроциты.
Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности является способ окраски эритроцитов на гистологическом препарате, включающий обработку в фиксаторе, промывку и протраву в фосфорно-вольфрамовой кислоте с последующей докраской красителем (2) .
Однако данный способ также не позволяет выявить инсулинотропные эритроциты.
20
Целью изобретения является выявление инсулинотропных эритроцитов.
Поставленная цель достигается тем, что согласно способу окраски эритроцитов на гистологическом препарате, включющему обработку в фиксаторе, промывку и протраву с последующей докраской красителем, фиксацию проводят в течение 15-30 мин при 60-65 С, причем в качестве фиксатора использу30 ют состав, содержащий бихромат калия, хромат калия и фосфат натрия однозамещенный при следующих соотношениях компонентов, мас. %:
Бихромат калия 15,0-15,5
Хромат калия I 0-1,5
Фосфат натрия однозамещенный 1,5-1, 6
Вода Остальное а в качестве протравы используют
17-ный раствор фосфорно-вольфрамата натрия.
Способ осуществляют следукщим образом.
Приготавливают мазок крови, просушивают на воздухе, после чего обрабатывают фиксатором, содержащим бихромат калия, хромат калия и фосфат натрия однозамещенный при следую-Ы щих соотношениях компонентов, мас.%:
Бихромат калия 15, 0-15,5
Хромат калия 1,0-1,5
Фосфат натрия однозамещенный 1,5-1,6 55
Вода Остальное
Фиксацию проводят в течение 1530 мин при 60-65 С.
После промывания в воде мазки об рабатывают 1%-ным раствором фосфорно-вольфрамата натрия. После чего вторично промывают в воде, просушивают, докрашивают фуксином Пфейфера и исследуют под микроскопом.
Инсулинотропные эритроциты имеют под микроскопом ярко †син окраску.
При фиксации в течение меньше
15 мин или больше 30 мин и температуре ниже 60 С и выше 65 С эритроциты имеют либо слабую синюю окраску, либо не окрашиваются совсем.
Пример 1. Мазки крови просушивают и обрабатывают фиксатором, содержащим бихрсмат калия, хромат калия и фосфат натрия однозамещенный при следующих соотношениях компонентов, мас. %:
Бихромат калия 15,0
Хромат калия 1,0
Фосфат натрия однозамещенный 1,5
Вода
Остальное
Фиксацию проводят. в течение 15 мин о, при 60 С. Мазки после промывания в воде обрабатывают 1%-Мым раствором фосфорно-вольфрамата натрия, после чего вторично промывают в воде, просушивают, докрашивают фуксином Пфейфера и исследуют под микроскопом.
Инсулинотропные эритроциты имеют ярко-синюю окраску.
Пример 2. Мазки крови просушивают и обрабатывают в фиксаторе, содержащем бихромат калия, хромат калия и фосфат натрия однозамещенный при следующих соотношениях компонентов, мас. %:
Бихромат калия 15,5
Хромат калия 1,5
Фосфат натрия однозамещенный 1,6
Вода Остальное
Фиксацию проводят в течение 30 мин при 65 С. Мазки после промывания в воде обрабатывают 1%-ным раствором фосфорно-вольфрамата натрия. После чего вторично промывают в воде, просушивают, докрашивают фуксином Пфейфера и исследуют под микроскопом.
Инсулинотропные эритроциты имеют ярко-синюю окраску.
Предложенный способ позволяет выявить инсулинотропные эритроциты.
1105468
Составитель Л.Стебаева
Редактор Л.Веселовская Техред Т.Маточка Корректор И.Эрдейи
Заказ 5533/17 Тирак 464 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раувская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", r.Ужгород, ул.Проектная, 4
Кроме того, применение данного фиксатора позволяет сохранить структуру эритроцитов, Дацко способ нашел применение
/ в диагностике диабетических состояний у людей.
