Способ определения токсичности биологических жидкостей

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ путем инкубации пробы с тестовыми клетками организма, отличающийся тем, что, с целью снижения токсичности и ускорения способа, тестовые клетки и исследуеяую жидкость берут в соотношении 1:1, а и,нкубацию проводят в течение 60± ±15 мин, при этом в качестве тестовых клеток используют взвесь клеток селезенки крысы в концентрации 7500±800 клеток в 1 мкл и по наличию в пробе нелизированных клеток селезенки определяют токсичность биологической жидкости.

,>SU(„) 1146570

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

4(5Э G 01 N 1 28. А 61 В 10 00

OllNCAHNE ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (2 1) 3458007/28-13 (22) 23.06.82 (46) 23.03.85. Бюл. № 11 (72) О. А.- Радькова, Г. А. Бояринов, . И. Н-. Балишина и К. В. Крылов (71) Горьковский медицинский институт, им. С. М.. Кирова (53) 616(088.8) (56) Фридлянская И, И. Новые методы культуры клеток животных тканей. М., «Мир»

1976, с. 176 — 185.

Корякина И. К., Скуркович С. В. Федоров Н. А. Изучение при помощи методики культуры тканей токсических и антитоксических свойств сыворотки собак после термических ожогов. — «Патофизиология», 1960, 5,56. (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОК-.

СИЧНОСТИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ путем инкубации пробы с тестовыми клетками организма, отличающийся тем, что, с целью снижения токсичности и ускорения способа, тестовые клетки и исследуемую жидкость берут в соотношении

1:l, а инкубацию проводят в течение 60(+ 15 мин, при этом в качестве тестовых клеток. используют взвесь клеток селезенки крысы в концентрации 7500++800 клеток в 1 мкл и по наличию в пробе нелизированных клеток селезенки определяют токсичность биологической жидкости.

1146570

Соста витель 3. Вал ьковска я

Редактор С. Патрушева . Техред И. Верес Корректор Л. Пилипенко,Заказ 1355/32 Тираж 897 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП «Патент», r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медици не и биологии и может быть исполвзовано для индикации токсимии при различных патологических состояниях.

Целью изобретения является снижение токсичности и ускорение способа.

Способ осуществляется следующим образом.

У беспородных белых крыс извлекают селезенку, гомогенизируют ее в физиологическом растворе и доводят концентрацию до 7500»- 800. ядросодержащих клеток в

1 мкл. При этом 0,1 мл взвеси селезеночных клеток добавляют к 0,2 мл- ЗЯ-ной уксусной кислоты (для лизиса эрйтроцитов, затрудняющих подсчет ядерных клеток) и подсчитывают число кариоцитов в 5 больших квадратах камеры Горяева. Концентрацию доводят до 200 клеток в 5 больших квадратах, т. е. 7500 в 1 м кл. Затем взвесь клеток разливают по 0 1 мл или 0 2 мл и до бавля ют к ней равный объем исп ытуемой ж идкости, встряхивают и ставят в термостат. После 60-минутной инкубации при 37 С смесь вынимают из термостата, встряхивают и подсчитывают количество оставшихся клеток.

В качестве контроля используют забуфереиный физиологический раствор. Результат выражают в процентах по отношению к контролю. Расчет ведут по количеству клеток в 5 больших квадратах камеры Горяева.

Так, первоначальная концентрация

7500+-300 клеткам в 5 больших квадратах камеры Горяева. После добавления к взвеси клеток селезенки равного объема испытуемой жидкости концентрация становится равной 100»-10 клеток в 5 больших квадратах. После инкубации повторно подсчитывают количество клеток в 5 больших квадратах камеры Горяева в опыте и контроле. Результат выражают в процентах по отношению к контролю, который и является показателем токсичности.

Расчет ведут по формуле у 100о 0 - АООД. о где Π— количество клеток в опыте;

К вЂ” количество клеток в контроле;

Х вЂ” токсичность, выраженная в процентах.

За 100о принимают количество клеток в контроле, следовательно, процент токсичности в контроле принимают за О.