Способ диагностики инфаркта миокарда

 

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ИНФАРКТА МИОКАРДА путем постановки реакции торможения миграции лейкоцитов с использованием в качестве антигена миокардиального белка с последующим определением индекса миграции, отличающийся тем, что, с целью повьшения точности способа, в качестве антигена используют миокардиальные белки актин и тропомиозин в концентрации 25-50 мкг/мл и при значении индекса миграции ниже 80% диагностируют инфаркт миокарда.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (Бц4 А 61 В 10/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3728819/28-14 (22) 26,04.84 (46) 15.09.85. Бюл. N 34 (72) Е.В.Цыбулина, А.В.Бондаренко, С.В.Симаков и Г.Ф.Сычева (71) Волгоградский государственный медицинский институт (53) А616-07(088.8) (56) Евстропов В.M. Актуальные вопросы кардиологии. Цхалтубо, 1980, с. 154-155.

Земсков В.И. и др. Сб.науч.трудов 2-й ИОЛГИИ им.Пирогова, 1982, т. 176, сер. "Терапия", в. 17, с. 40-42 °

ÄÄSUÄÄ 1178412 А (54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ИНФАРКТА

МИОКАРДА путем постановки реакции торможения миграции лейкоцитов с использованием в качестве антигена миокардиального белка с последующим определением индекса миграции, о т— л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности способа, в качестве антигена используют миокардиальные белки актин и тропомиозин в концентрации 25-50 мкг/мл и при значении инцекса миграции ниже 80Х диагностируют инфаркт миокарда.

1178412

Средний вес эон миграции с антигеном 100

ИнДекс мигРации Средний вес эон миграции без антигена

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано в клинической практике для диагностики инфаркта миокарда.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Получают актин и тропомиозин из миокарда, взятого иа аутопсии у эдо- 10 рового человека не подзнее 6-8 ч пос ле несчастного случая.

Актин выделяют по методу Хайтлиной С.Ю. Экстракцию актина осуществляют из приготовленного ацетонового 15 порошка миокарда, который может храниться в герметически закрытой посуде,при t 0- 4. С в течение 6-8 мес. . о

Белок очищают высаливанием сульфатом аммония при 25Х-ном насыщения. 2р

Тропомиозин выделяют по методу

Бейли. Полученный тропомиозин может храниться при 70Х-ном насыщении сульфатом аммония при t 0 — +4 в течение 6-8 мес. 25

Перед использованием в РТИЛ проводят изоэлектрическое осаждение белка при рН 4,5 с одновременным диализом до полного удаления сульфатиона. Гелеобразный осадок растворяют Зр в бидистиллированной воде с рН 7,0.

Готовые стерильные растворы актина и тропомиозина сохраняются при t О

;4 С (актин 8-10 сут, тропомиозин

4-6 сут.).

Белки применяют в концентрации

25-50 мкг/мл, так как в других соотношениях они оказывали неспецифический эффект торможения миграции лейкоцитов доноров.

РТИЛ проводят по методу БфВК Q x

xBendixen, в модификации В.Я.ГергерРеакцию оценивают положительной при индексе миграции ниже 80%, а свыше

80K — отрицательной.

Пример 1. Больной P., 55 лет. На ЭКГ при поступлении заре- 50 гистрирована полная блокада обеих ветвей левой ножки пучка Гиса, по которой было трудно сделать заключение о наличии свежих очаговых изменений миокарда. Активность фермен- 55 тов сыв, ротки крови была в пределах нормы. При постановке теста торможения миграции лейкоцитов с использовата. Кровь забирают из локтевой вены или подключичного катетера сухим стерильным шприцем в количестве 1015 мл и переносят в стерильную силиконированную пробирку, в которой находится гепарин в соотношении

25 ед. на 1 мл крови. Кровь быстро перемешивают 2-3 раза и ставят в термостат при 37 на 1 ч. Полученную плазму осторожно отсасывают пастеровской пипеткой, центрифугируют 7 мин при 1000 об/мин для получения лейковзвеси, после чего надосадок удаляют. Полученный лейкоцитарный осадок трижды ресуспендируют в среде ¹ 199 и осаждают, центрифугируя по 7 мин при 1000 об/мин. В клеточный осадок вносят по 0,1 мл культуральной жидкости (смесь среды № 199 и бычьей сыворотки 10:1) и заполняют стеклянные капиляры с внутренним диаметром

0,8-1 мм и длиной 10 см. Последние запаивают с одного конца парафином и центрифугируют 5 мин при 1000 об/

/мин. Затем их обрезают с двух сторон на границах жидкости и парафина таким образом, чтобы получились одинаковые фрагменты (4-5 мм), которые немедленно погружают на дно камеры, заполненной культуральной жидкостью беэ антигена (контроль) и с антигеном (опыт). Капиляры фиксируют на предварительно нанесенной стерильным вазелином полоске. Камеры герметически закрывают стеклами 24 24 мм и ставят в термостат при 37 на 24ч, После инкубации зоны миграции зарисовывают, проецируя на рентгеновскую пленку с помошью фотоувеличителя (в масштабе 1:4), вырезают и взвешивают на торзионных весах. Индекс миграции вычисляют по формуле нием в качестве антигенов актина и тропомиозина получены положительные результаты (индекс торможения миграции составил 67,4 и 77,5Х соответственно,что свидетельствует о ГЗТ к этим белкам, а также позволяет предположить развитие повторного инфаркта миокарда. Учитывая клиникобиохимические показатели и динамику ЭКГ (исчезновение на вторые сутки полной блокады левой ножки пучка Гиса и появление крупноочаговых изменений в передке-перегородочной области ле.

Составитель М.Поздняк

Редактор Т.Митейко Техред M.Ky Корректор Е.Сирохман

Заказ 5579/4 Тираж 722 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35,,Раушская наб., д.4/5

Филиал ППП "Патент", г.Ужгород, ул.Проектная, 4

3 11 вого желудочка) был подтвержден диагноз острого повторного крупноочагового инфаркта миокарда передне-перегородочной области левого желудочка.

Пример 2. Больной И, 55 лет.

При поступлении в инфарктный центр на ЭКГ отмечена депрессия интервала

Т и инверсия Т . Проведенная

3 реакция торможения миграции лейкоцитов не выявила ГЗТ к актину и тропомиозину (индексы миграции 108,6 и

101,2Х соответственно). Биохимические показатели сыворотки крови были без отклонения от нормы. При поступлении болевой синдром бып купирован наркотическими аналгетиками и в дальнейшем не рецидивировал. Наблюдение за больным с учетом характера клиники течения заболевания, иммунно-биохимических и инструментальных тестов позволило отвергнуть предварительный диагноз острого инфаркта миокарда. У больного имела место нестабильная стенокардия.

78412 4

П.р и м е р 3. Больной К., 73 года. В кардиореанимационном отделении на ЭКГ определяются рубцовые изменения в передне-перегородоч; ной и задне-диафрагмальной области левого желудочка. На ЭКГ признаки повторного инфаркта миокарда были неубедительными. Показатели иссле- дования ферментов сыворотки крови

1О (ЛДГ = 157 е/л, КФК = 40 е/л) соответствовали нормальным параметрам.

При постановке РТМЛ с актином, тропомиозином и миозином были получены следующие результаты, Ж: индекс миграции с актином 53, тропомизином

66,5, миозином 86, что свидетельствует о появлении ГЗТ к актину и тропомизину. В процессе наблюдения за больным на 4 сут на ЭКГ зарегистрирована отчетливая динамика повторного инфаркта миокарда в зоне рубцов заднедиафрагмальной области левого желудочка. Проведенная PTMJI с актином, тропомиозином и миозином дала следующие показатели: индекс миграции 71,8, 63,3, 65,1Х соответственно.