Способ определения состояния сенсибилизации организма к вирусу гриппа

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТОЯНИЯ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ОРГАНИЗМА К ВИРУСУ ГРИППА путем исследования миграционной активности лейкоцитов в присутствии антигена с последующим учетом полученных результатов, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, клетки зоны миграции фиксируют, окрашивают по Романовскому-Гимза, определяют состав мигрирующих клеток и по преобладанию в зоне миграции лимфоцитов при отсутствии нейтрофилов диагностируют сенсибилизацию к вирусу гриппа.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТ ИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

15р а А 61 В 10/ОО (21) 3662551/28-13 (22) 14.! 1. 83 (46) 15.12.85. Бюл. ll 46 (71) Одесский научно-исследовательский институт вирусологии и зпидемиологии им. И. И. Мечникова (72) А. Г. Стопчанская, Г. И. Олейник и Н. В. Пилипенко (53) i д 616.07(088.8);". (56) Авторское свидетельство СССР

У 919179, кл. А 61 В 10/00, 1982. (54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТОЯНИЯ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ОРГАНИЗМА К

„„SU„„l I 97642

ВИРУСУ ГРИППА путем исследования миграционной активности лейкоцитов в присутствии антигена с последующим учетом полученных результатов, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности способа, клетки зоны миграции фиксируют, окрашивают по Романовскому-Гимза, определяют состав мигрирующих клеток и по преобладанию в зоне миграции лимфоцитов при отсутствии нейтрофилов диагностируют сенсибилизацию к вирусу гриппа.

Обр эец

1» Лимфоциты

1 Лимфоциты

0,7

0,6

0,8

Нейтрофилы

1,0

1,0

1,5

1,1

1,2

Нейтрофилы

Лимфоциты

0,8

0,8

0,9

0,4

0,7

Нейтрофилы +

Лимфоциты

2,6

0,8

10 Нейтрофилы

ll Лимфоциты

0,9

0,5

1,4

12 Нейтрофилы

П р и м е ч а н и е. 12 3 нейтрофилы, 9 лимфоциты ср, 1,09

8 7 нейтрофилов 1 лимфоцит ср. 1,11.

1 r после I прививки.

++ - 4,5 мес после И прививки. P 7 0,05.

Изобретение относится к медицине, в частности,к иммунологии, и может быть использовано для оценки состояния сенсибилизации организма при проведении вакцинации и ревакцинации, а также в научных исследованиях для установления закономерностей формирования противогриппозного иммунитета.

Целью изобретения является повышение точности способа., Пример. Лейкоциты вьщеляют из гепаринизированной крови привитых и добавляют аллантоисную жидкость, содержащую вирус гриппа, о смесь инкубируют 30 мин при -4 С, надосадочную жидкость удаляют из клетки, культивируют в среде 199 с 1Е альбумина человека. Камеры для постановки PHMJI монтируют на высушенных предметных стеклах, предварительно обработанных хромпиком и хранящихся в соляно-кислом спирте (l часть HCP и 10 частей 96 спирта).

На каждое предметное стекло наклеивают 3 камеры и с помощью четырех капель парафина укрепляют на стекле, 197642 2 используемом для постановки РИМЛ, После учета РИМЛ тонко оттянутой .пастеровской пипеткой отсасывают культуральную жидкость, на нарушая зоны миграции, после чего препараты высушивают, фиксируют в метило.вом спирте 3 мин и окрашивают по Романовскому-Гимза. С промытых и высушенных препаратов удаляют ка1

10 меры, а предметные стекла снимают со стекла для постановки РИИЛ, Готовые препараты исследуют под микроскопом с использованием объективов х20, х 90. При этом определяют ос15 новной тип мигрирующих клеток (нейтрофилы либо лимфоциты).

Преобладание в зоне миграции лимфоцитов и отсутствие нейтрофилов указывает на активный синтез

20 фактора, ингибирующего миграцию нейтрофилов.

Результаты определения вида мигрирующих клеток и индекса миграции у вакцинированных и ревакцинированных инактивированной гриппозной вакциной представлены в таблице.

1197642

Составитель Т. Козлова

Редактор Т. Митейко Техред Ж.Кастелевич Корректор М.Самборская

Заказ 7645/4 Тираж 721 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-З5, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Из приведенных в таблице данных видно, что величина индексов миграции у первично и повторно привитых заметно не отличалась. Вместе с тем у большинства первично привитых через год после иммунизации в зоне миграции обнаруживали лимфоциты (что указывает на сенсибилизацию к вирусу гриппа), тогда как у повторно привитых — нейтрофилы.

Наличие в зоне миграции лимфоцитов указывает на нецелесообразность либо даже противопоказанность ревакцинации в период сохранения организмом сенсибилизации к вирусу гриппа.

Таким образом, точность определения состояния сенсибилизации орL ганизма при использовании предлагае1мого способа повышается в 4 раза (по прототипу — состояние сенсибилизации определено у 16,6Ж, а при предлагаемом способе 75X).