Среда для разбавления и замораживания спермы животных

 

СРЕДА ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯ И ЗАМОРАЖИВАНИЯ СПЕРМЫ ЖИВОТНЫХ, содержащая дисахарид-лактозу, желток куриного яйца, глицерин,трис-(оксиметил ) аминометан и воду, о т л ичающаяся тем, что, с целью повышения выживаемости и оплодотворяющей способности спермиев после замораживания, она дополнительно содержит :двунатриевзяо двуводную соль этилендиаминтетрауксуснуго кислоту и декстрин при следующем соотношении компонентов, мас.%: 6,0-10,0 Дисахарид-лактоза Трис-(оксиметил) 0,05-0,10 аминометан Двунатриевая двуводная соль этилендиамйнтетра0 ,06-0,12 уксусной кислоты 3.0-5,0 Декстрин Желток куриного 13,0-14,0 яйца § 8,0-9,0 . Глицерин Вода дистиллиро (Л Остальное. ванная с 2. Среда по п. 1, отличающ а я с я тем, что двунатриевая двуводная соль этилендиаминтетрауксусной кислоты и трис-(оксиметил )аминометан взяты в молярном соотношении 1:2,5. ф о: Од

,.SU„„1197660

СОЮЗ СООЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУЬЛИН улаф А 61 D 7/02

1 ОСУДАРОТНЕННЬЙ КОМИТЕТ СССР

llO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 4 .« ве ъ. с

"ь и ( (21) 3699067/30-15 (22) 14. 12. 83 (46) t5.12.85. Бюл. У 46 (71) Всероссийский научно-исследовательский институт племенного дела (72) Е.И.Платов, И.А.Кузнецова и Л.И.Леонтьева

1 (53). 591.463.1(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

В 604556, кл. А 61 9 7/02, 1976.

Авторское свидетельство СССР

В 655285, кл. А 61 D 7/02, 1978.

Авторское свидетельство СССР

В 852324, кл. А 61 D 7/02, 1979. (54)(57) СРЕДА ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯ И

ЗАМОРАЖИВАНИЯ СПЕРИЫ ЖИВОТНЫХ, содержащая дисахарид-лактозу, желток куриного яйца, глицерин, трис-(оксиметил) аминометан и воду, о т л ич а ю щ а я с я. тем, что, с целью повышения выживаемости и оплодотворяющей способности спермиев после замораживания, она дополнительно содержит:двунатриевуюдвуводную соль зтнлендиаминтетрауксуснув кислоту и декстрин при следующем соотношении компонентов, мас.X:

Дисахарид-лактоза 6,0-10,0

Трис-(оксиметил) аминометан 0,05-0,10

Двунатриевая двуводная соль зтилендиаминтетрауксусной кислоты 0,06-0, 12

Декстрин . 3,0-5,0

Желток куриного яйца 13 0-14 0

Глицерин 8,0-9,0 . Е

Вода дистиллированная Остальное.

2. Среда по и. f, о т л и.ч а ющ а я с я тем, что двунатриевая.". двуводная соль зтилендиаминтетра- Я уксусной кислоты и трис-(оксиметил)аминометан взяты в молярном "е соотношении 1:2,5. 4ewL I 1

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, например овец.

Целью изобретения является повышение эффективности среды.

Предлагаемая среда содержит дисахарид-лактоэу, желток куриного яйца, глицерин, трис-(оксиметил)аминометан, двунатриевую двуводную соль этилендиаминтетрауксусную кис лоту, декстрин и воду при следующем соотношении компонентов, мас,7. .

Дисахарид-лактоза 6,0-10,0

Трис-(оксиметил) аминометан 0,05-0,10

Двунатриевая двуводная соль этилендиаминтетрауксусной кислоты 0,06-0,12

Декстрин 3,0-5,0

Желток куриного яйца 13,0-14,0

Глицерин 8,0-9,0

Вода дистиллированная Остальное

Причем двунатриевую двуводную соль этилендиаминтетрауксусной кислоты и трис- (оксиметил)аминометан взяты в молярном отношении 1:2,5.

Примеры составов используемой среды приведены в табл. 1.

Каждый состав среды испытывался в лабораторных условиях на подвижность и выживаемость сперматозоидов после оттаивания спермы (число пробэякулятов 10).

Полученные результаты представлены в табл. 2.

Пример приготовления среды. В чистую .химическую колбу вносят по рецепту лактозу, трис-(оксиметил)ами нометан, двунатриевую двуводную соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, декстрин, заливают прокипяченной горячей дистиллированной водой (80-90 С). Колбу помещают в водную баню с кипящей водой до полного растворения всех компонентов. Расто вор охлаждают до 35-40 С и вносят желток куриного яйца и глицерин.

Свежеприготовленная среда перед разбавлением спермы должна быть исследована по внешнему виду, цвету, запаху и периодически по показателю водородных ионов и осмотическому давлению. Предлагаемая синтетическая среда по физико-химическим свойствам должна отвечать следующим. требованиям: внешний вид — однородная

197660 эмульсия беэ осадка и механических примесей, цвет — светло-желтый, без запаха, рН 6,7++0,1, осмотичес" кое давление при О С в атмосфере (без глицерина) 9,0 t 0,5.

Приготовленную среду используют для разбавления спермы в течение не более 6 ч. Хранят при температуре 4-18 С, перед употреблением нагревают до необходимой температуры.

При использовании испытуемой среды сперму вначале 1 1 (в 2 раза) разбавляют рецептом, в состав которого не входит глицерин, а затем вновь . раза — средой с глицерином

О

24 + 2 С. Разбавление производят медленно, среды (особенно с глицерином) добавляют небольшими порциями по стенке при постоянном помешивании.

В табл. 3 представлены результаты обоснования состава предлагаемой

1 синтетической среды.

Если содержание ингредиентов выходит за границу крайних нижних

;или верхних значений предлагаемой

35 ф)

55 среди, то это дает худшие результаты и не приводит к достижению поставленной цели (табл. 3).

Оптимальный (второй) вариант предлагаемой среды, мас.Х: лактоза 8,0, трис-(оксиметил)аминометан

0,07, двунатриевая двуводная соль зтилендиаиинтетрауксусной кислоты 0,09; декстрин 3,3; желток куриного яйца 13,3, глицерин 8,8, вода дистиллированная до 100, имеет более высокие криозащитные свойства в сравнении с другими вариантами и контролем. Подвижность после оттаивания составляет 4,5 « 0,06 баллов, абсолютный показатель выживаемости

22.1 + 17 3 усл. ед.

Результаты испытания приведены в табл. 4.

Испытания показали, что предлагаемая среда обладает лучшими холодоэащитными свойствами при более вы-. соких степенях разбавления, в результате чего повышается оплодотворяющая способность спермы, разбавленной в 4 раза (1:3), íà 12Х по сравнению с контролем. Эффективность использования спермы повышается в 1,3 раза, так как оплодотворяющая способность. спермы, замороженной в предлагаемой среде при разбавлении 1:3, не уступает сперме, замороженной в контрольной среде и разбавленной всего лишь 1:2.

Таблица

Составы

Компоненты

2-ой

3«ий

6,0

10,0

8,0

Лактова

Трие-(оксиметил)аминометан

0,07

0,05

Двунатриевая двуводная соль этилендиаминтетрауксусной кислоты

0,0&

0,12

0,09

5,0

3,3

3,0

9,0., До 100, До 100

До 100

Таблица 2

Подвижность сперматозоидов после оттаивания спермы в баллах (5 параллельных образцов в каждой пробе, т,е. 5 10 = 50 проб)

N m

4,2+ 0,08

Первый вариант

Второй вариант

4,5 + 0,0б

Третий вариант

4,3 0,05

4,0+ 0,08

Таблица 3

Качественные показатели отта иной спермы при следующем содержании ингредиентов, мас.Х

Ингредиенты среды и качественные показатели оттаянной спермы

10,2

0,04

0,11

Дв уна трне на я дв ув одна я с ол ь этилендиаминтетрауксусной кислоты

0,14

0..05

5,2

2,8

Декстрин

Декстрин

Желток куриного яйца

Вода дистиллированная

Состав среды (вариант) Контроль (ЛЖГТЦГ среда) Лактоэа

Трис-(оксиметил)аминометан бсолвтный показатель

ыживаемости s оттаянной перме (в условных единиах при 2-4 С.

И+ m

219 11,1

221«+ 17,3

220+ 15,1

174+ 16;3

4 Продолкение табл.З, 1197560

14,3

12,5 йелток куриного яйца

7,8

Глицерин

До 100

До 100

Води дистиллированная

Показатели Подвивиость. (И 1 m) 3,5 и 0,03 3,0 k 0,04

1284 938

Абсолютный показатель выкиваемости (И и а) 108 и 12,4

«ВЮФВМФЮВВВ (Е

Таблица 4

Степень раз-" бавления спермы средой

Из них объягнилось

Осеменено овец

Синтетическая среда

Голов

ЮЮ Ю ЬФ

145

59

185

Контроль

+7 .:Ю

Лактоэо-иелтоЧно-гуммиарабико-трис-цитратиая среда

"Составитель M,Велоусова

Техред Т.Тулик . Корректор.М.Иаксимииинец

Редактор Т.Иитейко

Заказ . 218 Тираа 722 .. Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам иаобретений и открытий 113035, Москва, %-35, Рауиская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г.Уигород, уА.Проектная, 4

Предлагаемая (оптимальный вариант) 1:;3

1гЗ

1 3

Х, Разница в пользу предлагаемой среды