Способ определения чувствительности к аллергенам

 

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУбЛИН (Я)4 А61 В 1000 (21) 3702069/28-14

- (22) 02.01.84 (46) 15.02.86. Бюл, И 6 (71) 1-йЛенинградский ордена Трудо, вого Красного Знамени медицинский институт им. акад..И.П.Павлова (72) С.С,Жихарев, Т.В.Котенко и Т,Ф.Субботина (53) 616.07 (088.8) (56) Фрадкин В.А. Показатель по вреждения нейтрофилов по Фрадкину. . Аплергодиагностика iA ч1йго.

М.: Медицина, 1975, с. 27-65, (54) (57) СПОСОБ ОПРЕД .ЛЕНИЯ ЧУВСТВИ"

ТЕЛЬНОСТИ К А11ЛЕРГЕНАМ путем ис.„Я0„„.1210791 A следования лейкоцитов крови, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности способа при выявлении гиперчувствительности, в опытную пробу добавляют исследу ему аллерген, а в контрольную растворитель аллергена, затем пробы инкубируют в течение 10-20 мнн, экстрагируют липиды и в полученном экстракте определяют концентрацию диеновых коньюгатов, и при увеличении этого показателя в опыте более чем на ЗОХ по сравнению с контролем, определяют гиперчувстви тельность к аллергенам. 1 l

Изобретение относится к медицине, s частности к аплергологии, и может быть использовано для диагностики аллер гической гиперчувствительности больных с лекарственным, пыльцевым и бытовым аллергенам.

Цель изобретения - повышение точности способа при выявлении к ги пер чу в ст вительно сти .

Пример 1. Больная Ч,, 49 лет.

Диагноз: бронхиальная астма, атопи ческая форма, легкое течение, фаза затихающего обострения, Анайнести™ чески выявлялась еткая связь воз никновения приступов удушья с пре быванием дома, с уборкой квартиры, что наводило на мысль о бытовой аллергии. Однако кожные пробы как со станрартными сериями пыли, так и с аутопылью оказались сомнитель ными и гиперчувствительсности не выявили, У больной производили забор крови и определяли концентрацию дисковых конъюгатов следующим образом.

В химическую пробирку наливали

1 мп полиглюкина и добавляли 500800 ЕД (1-2 капли) жидкого гепарина, перемешивали. Эту смесь можно приготовить накануне исследования и хранить в холодильнике.

Кровь из вены обследуемого; взяли утром, натощак, в ту же пробирку в количестве 5-6 мл, перемешивапи осторожным покачиванием и оставляли о в термостате при 37 С дпя спонтанл.. ного осаждения эритроцитов. Время зависит от скорости осаждения и не превышает 1,5 ч. Кровь раздели лась, на 2 слоя: верхний мутный, желтого цвета лейковзвесь, и ниж ний - эритроциты, Верхний слой отобрали пипеткой в отдельную пробирку, перемешали.

В 2 пробирки налилии по 1 мп лейковзвеси опыт и контроль. Если исследуется большее число аллергенов, то берут больше пробирок - по 1 на каждый аллерген. В опытную пробирку внесли стануартнйй аллерген в разведении 10 в количестве 0,1 мп, Сост а

Редактор М.Товтин Техре

210791 2 в данном случае аллерген - домашняя пыпь серии 103; в контрольную пробирку 0,1 мп стандартной разводя щей жидкости. Пробирки поставили в термостат при 37 С на 10 мин.

Таким образом общее количество инкубационной среды 1,1 мп, Из опытной и контрольной пробирок отобрали по 0,1 мп, перенесли в от !

О дельные пробирки и добавили в них до 20,0 мп дистиллированной воды дпя определения белка по методу Лоури °

Дапее из оставшейся лейковзвеси (по 1 мп в опыте и в контроле) про15 извели экстракцию липидов известным методом Фолча и определили в них содержание диеновых коньюгатов по спектрофотометрической методике

Р1acer. Спектрофотометрировали при

2О Я= 232 нм.

Содержание диеновых коньюгатов вычисляется по формуле„ С = /р, где С - искомая концентрация диено вых коньюгатов, Е - показание при 25 бора (величина экстинции); p - моль ная экстинция, равная дпя диеновых коньюгатов 2,20«10

В процессе исследования определено Еоаыт, = 11,8 êAÎ М1 Еродр, зо 7927 10 N.

Содержание белка (А) определено:

Аопыт.= 3,43 rX; Аконтр.= 5,87 rX

Содепжание диеновых коньюгатов рассчитывается на 1 мг больше в

35 робе те в1: О т: 343г%34,3 мг/мп; ДКоом, =344 нМ/мг.

Контроль: 5,87 rX, 58,7 мг/мп;.

ДКотр= 124 нМ/мг. Хаким образом, содержание диено вых коньюгатов в контрольной пробе определено в 124 нМ/мг, в опытнойв 344 HM/ìr. Прирост диеиовых конью гатов составляет 178 .; Диагности руют выраженную аллергическую гиперчувствительность к домашней пыли серии 103. Правильность постановки диагноза в данном случае была подтверждена успешным проведением

50 курса специфической гипосенсибили зации выявленным аплергеном. витель Н.Валеева д,Т.дубинчак корректор Т Колб

Заказ 569/6. Тирад 659 Подписное. ВНИИПИ Гасударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

A 13035, Москва Ж 35, Раушская иаб., д, 4/5

Филиал ППП "Патент, r.Óæãîðîä, ул. П1 оектная, 4