Способ определения бергаптена

 

Изобретение относится к области фармацевтической химии, a именно к способу определения лекарственного препарата - бергаптена. Цель изобретения - повышение чувствительности и селективности способа.Анализ ведут обработкой раствора анализируемой пробы в спирта раствором хлорамина Б в этаноле, концентрированной соляной кислотой и гидроокисью аммония с последующим нагреванием на кипящей водяной бане и измерением флуоресценции полученного раствора. Чувствительность способа 0,005 мкг/мл. 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

Ф

РЕСПУБЛИН а91 аи дп 4 G 01 И 21/78

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ(СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3810303/23-04 (22) 06.11.84 (46) 15.05.86. Бюл. У 18 (71) Курский государственный медицинский институт (72) О.А,Григорьев и А.А.Хабаров (53) 543.42.063 (088.8) (56) Медицинская промьппленность СССР, 1965, и 4, с. 44-48.

Генкина Г.Л. Методы анализа фурокумаринов. — Химико-фармацевтический журнал, 1981, У 11, с. 108-113. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕРГАПТЕНА (57) Изобретение относится к области фармацевтической химии, а именно к способу определения лекарственного препарата - бергаптена. Цель изобретения — повышение чувствительности и селективности способа. Анализ ведут обработкой раствора анализируемой пробы в спирта раствором хлорамина Б в этаноле, концентрированной соляной кислотой и гидроокисьв аммония с последуккцим нагреванием на кипящей водяной бане и измерением флуоресцелции полученного раствора. Чувствительность способа 0,005 мкг/мп.

3 табл. е

1231443

10 l5

30 5.гаптена втаблетках Псоберана" по 0,01r раствора по отношению к стандартному с содержанием бергаптена 1 мкг/мл. По ка50 либровочному графику определяют содержание бергаптенав пробе. Результаты определения представлены в табл. 2., Пример 3. Количественное определение бергаптена в таблетках "Псоберана" по 0,01 r.

0, 118 г (точная навеска) мелкоизмельченных таблеток помещают в мерную колбу на 100 м;, и растворяют в

Флуоресценция до обработки реактивами

ФлуоресСоединения ценция после обработки реактивами

Бергаптен

Кумарин

Изобретение относится к фармацев— тической химии, а именно к способам определения бергаптена-5-метокси-6

7-фурокумарина, и может быть применено для качественного и количественного анализа этого соединения в различных объектах для фармацевтических исследований.

Целью изобретения является повышение чувствительности и селективности способа.

Пример 1. Качественное определение бергаптена.

К 1-2 мг субстанции бергаптена или порошка мелкоизмельченных таблеток прибавляют 6,5 мл 96%-ного этилового спирта и встряхивают до раст— ворения препарата. Прибавляют 0,2 мл

47 †но раствора хлорамина Б в эта— ноле и 0,5 мл концентрированной соляной кислоты, перемешивают и через

5 мин прибавляют 2,8 мл 25%-ного раствора гидроокиси аммония. В ультрафиолетовом свете со светофильтром

УФС-3 или УФС-6 наблюдают яркую зеленую флуоресценцию.

Время определения6-7 мин.Данныео .флуоресценции бергаптенаи родственных соединений представлены в табл,1.

Пример 2. Количественное определение бергаптена в субстанции.

0,01 г (точная навеска) субстанции бергаптена помещают в мерную колбу на 100 мл и растворяют в 80 — 90 мл

967-ного этилового спирта, доводят до метки объем полученного раствора.

К 0,5 мл данного раствора (аликвотная часть) прибавляют в пробирке

6 мл 96%-ного этилового спирта,0,2 ил

4%-ного раствора хлорамина Б в этаноле и 0,5 мл концентрированной соляной кислоты, перемешивают. Через

5 мин прибавляют 2,8 мл 25%-ного рас— твора гидроокиси аммония и перемешивают. Нагревают пробирку с раствором на кипящей водяной бане до 100 С и быстро охлаждают. Измеряют интенсивность флуоресценции полученного

80-90 мл 967-ного этилового спирта, довести до метки объем полученного раствора. 1 мл полученного раствора наносят на приготовленную хроматографическую пластину с тонким закрепленным слоем силикагеля марки LC

5/40ILI, чехословацкого производства и хроматографируют восходящим методом в системе растворителей гексанэтилацетат (3:1). Зону бергаптена, отмеченную в УФ-свете по величине

Rf (равной 0,58) или по отношению к стандарту, .количественно переносят в пробирку и элюируют 6,5 мл 967. этилового спирта. Жидкость после элюирования сливают с осадка, а к полученному раствору прибавляют 0,2 мл 4% раствора хлорамина Б в этаноле и

0,5 мл концентрированной соляной кислоты, перемешивают. Через 5 мин при— бавляют 2,8 мл 25% раствора гидроокиси аммония, перемешивают. Нагревают пробирку с раствором до 100 С и быстро охлаждают. Измеряют интенсив— ность флуоресценции полученного раствора по отношению к стандартному с содержанием бергаптена 4 мкг/мл. По калибровочному графику определяют содержание бергаптена в исследуемом образце. Содержание бергаптена в 1 таблетке колеблется от 0,0035 до

0,0045 r, что составляет около 407 от суммы двух фурокумаринов, содержащихся в таблетке. Результаты определения берпредставлены в табл.3.

По,цобной реакции не дают и не мешают определению близкие по структуре соединения:кумарин, ксантотоксин, виснадин, неодикумарин, фепромарон, синкумар,зоокумарин,что былодоказано на образцахданных соединений. Данные о флуоресценцииродственных бергаптену соединений представленыв табл,1.

Чувствительность способа

0,005 мкг/мл, что в 400 раз выше ра нее известного (2 мкг/мл).

Таблица1

Слабая ro- Яркая зелубая леная

Нет Нет

3 1231443

Продолжение табл. 1

КсантотокСлабая зе- э Слабая син зеленая леная

Таблица 3

Нет

Нет

Виснадин

Взято на анализ субстанции, г

Неодикумарин

Найдено бергаптена, г

Фепромарон

Синкумар

15 0,01

0,0098

0,0096

0,0098

0,0099

0,0095

Зоокумарин

Герниарин

0,01

Голубая

0,01

20 б-Метилкумарин

0,01

Нет

0,01

0,01

0,0097

Результаты определения бергаптена в таблетках "Псоберана" по 0,01 г представлены в табл.2.

Та блица 2

Oi01

0,0097

0,0098

0,0099

0,0095

0,01

Навеска иэмель- Найдено бергапченных таблеток, г тена, г

0,01

0,01

О, 1183

О, 1184

О, 1182

ВНИИПИ Заказ 2559/49

Тираж 778 Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

О, 1184

О, 1183

О, 1184

О, 1189

О, 1184

О, 1184

О, 1183

0,0036

0,0037

0,0039

0,0049

0,0042

0,0044

0,0040

0,0037

0,0045

0,0039

Содержание бергаптена в таблетках различной серии при одинаковой навеске, взятой на анализ, колеблется от 0,0035 до 0,0045 г в расчете на одну таблетку. Результаты количественного определения бергаптена в субстанции приведены в табл.3.

Содержание бергаптена в субстанции колеблется от 0,0095 до 0,0099 г.

Формула изобретения

Способ определения бергаптена, включающий обработку химическим реагентом и фотометриррвание, о т— л и ч а ю шийся тем, что, с целью повьппения чувствительности и селективности определения, раствор анализируемой пробы в спирте последовательно обрабатывают раствором хлорамина Б в этаноле, концентрированной соляной кислотой и гидроокисью аммония с последующим нагреванием на кипящей водяной бане и измерением флуоресценции полученного раствора.