Способ определения @ 5-андростен-3в @ -ол-170 в моче

 

. Изобретение относится к аналитической химии и предназначено для диагностики в эндокринологии. Цель изобретения - ускорение способа за счет проведения экстракции диэтиловым эфиром. Пробу мочи IО мл с рН 7,5 в течение 6 ч нагревают на кипящей водяной бане, охлаждают и переносят в делительную воронку с добавлением двойного объема диэтилового эфира. Нижний слой отбрасы-. вают. В эфирную вытяжку добавляют 0,5 объема (от объема эфира) го раствора едкого натра, встряхивают . Нижний слой отбрасывают, Эфир ную вытяжйу промывают 0,5 объема воды. Экстракт высушивают при 40 45 С в течение 12-18 мин. К сухому остатку прибавляют раствор фурфурола , ледяной кислоты и серной. Ставят в водяную баню. После охлаждения приливают 3,0 мл тетрахлорэтана, встряхивают, центрифугируг ют. В нижнем слое определяют коэффициент поглощения, который прямо пропорционален содержанию д -андростен-З -ол- 70Н.. С S W 1C 00 ч со ч 00

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (5ц ф LG 01 N 33 48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

<9 М® 1у, (21) 3711134/28-14 (22) 14,03,84 (46) 15.06.86, Бюл. У 22

Центральная клиническая больница 4-ro Главного управления (72) Й.И.Аржанова и А.М.Рыжов (53) 616.07(088.8) (56) Орлова В.Г. Труды по новой аппаРатУРе и методикам, М.; Вып.8

1969, с.44-49. ° (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ Ь -АНДРОСТЕН-3Р-ОЛ-17ОН В МОЧЕ (57). Изобретение относится к аналитической химии и предназначено для диагностики в эндокринологии.

Цель изобретения — ускорение способа за счет проведения экстракции диэтиловым эфиром, Пробу мочи 1О мл с рН 7,5 в течение 6 ч нагревают

„„SU„„1237978 А 1 на кипящей водяной бане, охлаждают и переносят в делительную воронку с добавлением двойного объема диэтилового эфира. Нижний слой отбрасы-. вают. В эфирную вытяжку добавляют

0,5 объема (от объема эфира) lOX-ного раствора едкого натра, встряхивают. Нижний слой отбрасывают, Эфирную вытяж*у промывают 0,5 объема воды. Экстракт высушивают при 40о

45 С в течение 12-18 мин. К сухому остатку прибавляют раствор фурфурола, ледяной кислоты и серной.

Ставят в водяную баню. После охлаждения приливают 3,0 мл тетрахлорзтана, встряхивают, центрифугиру-. ют, В нижнем слое определяют коэффициент поглощения, который прямо пропорционален содержанию А -андростен-3 -ол-17ОН,1237978

Измерения коэффициента поглощения проводились при длине волны

688 нм. Нижняя граница чувствительности 5 мкг, объем проб 3 мл, тип аппарата — регистрирующий спектро фотометр фирмы "Хитачи", Формулаизобретения

Составитель Н. Валеева

Техред Л.Сердюкова Корректор Г.Решетник

Редактор Н.Горват

Заказ 3283/45 Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д, 4/5 е Фм Ф 4

ПроизводстВенно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к физико-химическому анализу, и может быть использовано в клинической медицине для диагностики эндокринологических заболеваний, Целью изобретения является ускорение способа.

Пример, Пробу мочи в количестве 10 мл с рН 7,5 в течение 6 ч нагревают на кипящей водяной бане, охлаждают и переносят в делительную воронку с добавлением двойного объема диэтилового эфира. Нижний слой отбрасывают, а в эфирную вытяжку добавляют 0,5 объема (от объ- ема эфира) 10% раствора едкого натра встряхивают 1 мин, Нижний слой отбрасывают, а эфирную вытяжку промы" вают 0,5 объемами воды. Экстракт высушивают при 45 С 15 мин. К су" о хому остатку прибавляют 0,8 мл

0,567-ного раствора фурфурола, 0,3 мл ледяной СН СООН, 3,0 мл 16 н серной кислоты и ставят на 12 мин, в водяную баню при 70 С, После о охлаждения приливают 3,0 мл тетрахлорэтана, встряхивают 1-1,5 мин.

Центрифугируют 5 мин при 10001500 об/мин. Б нижнем слое определяют коэффициент поглощения, кото- рый прямо пропорционален содержанию

Ь -андростен-3р-бл-170Н (ДНА). Одновременно ставят холостую пробу и пробы с кристаллическим ДНА (10, 20, 30, 40 мкг).

Диапазон линейной зависимости калибровочной кривой 10-40 мкг.!

5 Содержание ДНА в моче составило

60 мкг.

20 Способ определения Ь -андростен5

-3 -ол-170Н в моче путем нейтрального гидролиза исследуемой пробы

f экстрагирования и очистки экстракта с последующим спектрофотометрированием, о т л и ч а ю m и и с я тем, что, с целью ускорения способа, экстракцию проводят диэтиловым эфиром с последующим высушиванием экстракта при 40-45 С в течение 12о

30 18 мин, а выделение цветного комплекса проводят экстракцией тетрахлорэтаном.