Способ определения гиперлипопротеидемии

 

Изобретение относится к биофизическим методам исследования. Цель изобретения - ускорение способа. По предлагаемому способу перед началом анализа сьшоротку крови в течение 5 мин выдерлснвают в бане. В кювету вносят раствор KCi, приготовленный на фосфатном буфере, 1%-ную гидроперекись третичного бутила и 1 мл . 10 м М раствора ионов двухвалентного железа. Содержимое кюветы перемешивают . Последнюю ставят в светонспроницаемун) камеру устройства и закрьшают створку. Измеряют шумовой сигнал устройства за 1 мин. При открытой створке камеры измеряют интенсивность свечения приготовленного раствора. В кювету вводят 0,5 мл сыворотки кровн и измеряют интегральную интенсивность хемилюминесценции липидов и их компонентов. При уровне светосуммы хемилюминесценции от 12340 до 27700 имп/с с учетом злектро форетического исследования липопротеидов определяют гиперлипопротеидемию. (Л С

СОЮЗ СО8ЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

«е а» (50 4 G 01 N 33/49

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

И АВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 334810)/28-14 (22) 23.10.81 (46) 07.09.86. Бюл. И» 33 (72) Б.А.Клюшин, Г.Е.Брикач, А:С.Не:любин, Е.И.Кузьмина и К,Н.Конторщикова (53) 616.07 (088.8) (56) Дислипротеидемии и ишемическая болезнь сердца,/Под ред. E.È.×àýîâà и А.И.Климова. — И.: Медицина, 1980 с. 61 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГИПЕРЛИПО

ПРОТЕИДЕИИИ (57) Изобретение относится к биофи зическим методам исследования. Цель изобретения - ускорение способа. По предлагаемому способу перед началом анализа сыворотку крови в течение

5 мин выдерживают в бане. В кювету вносят раствор KCi приготовленный на фосфатном буфере, 17.-ную гидроперекись третичного бутила и 1 мл

10 м И раствора ионов двухвалентного железа. Содержимое кюветы пере- мешивают, Последнюю ставят в светонепроницаемую камеру устройства и закрывают створку. Измеряют шумовой сигнал устройства эа 1 мин ° При. открытой створке камеры измеряют интенсивность свечения приготовленного раствора. В кювету вводят 0,5 мл сыворотки крови и измеряют интегральную интенсивность хемилюминесценции липидов и их компонентов. При уровне а светосуммы хемилюминесценции от

12340 до 27700 имп/с с учетом электрофоретического исследования лнпопротеидов определяют гиперлипопротеидемню, 1 1?5

Изобретение относится к медицине, а именно к биофизическим методам исследования параметров сыворотки крови человека с целью диагностики гиперлипопротеидемии (ГЛП).

Цель изобретения — ускорение способа.

Способ осуществляется следующим образом, В пробах сыворотки крови измеряют интегральную интенсивность процессов перекисного окисления липидов и их комплексов с помощью индуцирова <ной хемилюминесценции, 11ля, автоматического анализа можно использовать устройство для анализа биохемилюминесцеиции м<лкроорганизмов.

Перед началом анализа сыворотку крови oб<ьемом 0 5 мл в те-<ение 5 ми выдерживают в бане с t 37 С., Все остальные р>зQI<тиBBI IIBгpеты дО коглна r ttой температуры. В кювету вносят 8>5> и>

О, 10 >"! раствора КС1 „приготовленного на фосфатном буфере (рН 7 > 45), О, 2 >4II 1 Х-HOH rH pip oIIepe K . <. I >H0ro бутила и 1 мл раствора ионов двухвалентногo железа 10 м .<<< !r"SC> 7Ы, О, Затем кювету с внесенными растворамл ставят в светонепроницаемую камеру устройства, тщательно пер емеп:ивавт содержимо е кюветы и закрывают камеру .

При закрытой створке прерь>вателя светового потока темновой камеры измеряЮт ДЛЯ КОНТРОЛЯ ШУМОВОЙ <..HBÃHBri ИЗМЕрительного тракта устройства. Затемстворка темновой камеры Открывается и происходит измерение интенсивности свечения приготовленного раствора (фон) для учета в последующем анализе светового потока хемилюмннесценции сыворотки крови. Не вынимая кювету иэ камеры, в специальное отверстие вводят, например шприцем 0,5 мiI сыворотки крови и измеряют интегральную интенсивность хемилюминесценции липидов H их комплексов Б сыворотке крови в течение 1 мип. При этом полученные результаты автоматически выводятся на цифровой регистратор устройства.

Затем измеряют шумовой сигнал устройства за минуту и интенсивность свечения приготовленного раствора (фон) .

В кювету вводят 0,5 мл сь>воротки крови больного и измеряют интегральную интенсивность хемиюпоминесценции липидов и их компонентов в сыворотке .» крови в течение 1 мин, которая состав: ляет за вычетом фона 12343 имп. Это соответствует норме, поэтому у больного диагностировано отсутствие ГЛП.

После этого из полученного значения интегральной интенс IBIIOOTH хемипюминесценции вычитается значение фана за этот отрезок времени и результат фиксируется на регистраторе устройства. Затем полученный резуль-тат сравнивается с параметрами нормы и, если он превышает на 10Х и более граничное значение нормы, тс диагностируют наличие ПП!, если же он лежит в пределах нормы, то диагностируют отсутствие ГЛП, Пример 1. У больногс М, 45 лет, берут 0,5 мл сыворотки крови, которую затем выдерживают в течение

5 мин в бане с t 37 С. В кювету устройства вносят 8,5 мл 0,105 И раство10 ра КС1, приготовленного на >осфатном буфере (рн 7,45), 0,2 мл 1Х-ной гидроперекиси третичного бутила и 1 мл раствора ионов двухвалентного железа ъ

10 N PeS04 7Н 0 и тщательно пере15 мешивают содержимое кюветы, Затем кювету с внесенными растворами ставят в светонепроницаемую камеру устройства и закрывают створку. Измеряют шумовой с>пиал устройства за 1 мин, 20 который сос †;àâëÿåò 780 имп,, затем при открытой створке камеры измеряют интенсивность свечения приготовленнога рас! Вора (фон) > Iso ra par. ;За 1 мин составляет 2100 имг, 2-"> !ОСЛЕ ЭТОГО В К>ОБЕту ШПрИПЕМ вводят 0,5 мл сынорот«и IH больного 1!. и измеряют интегральную интенсивносгь хемилюминесценции липидов и их комплексов в сыворотке крови O пакете Б темени ) ми>„ которая со< тавляет за вычетом фона 11023 имп, Это значение соответствует норме для этого возраста„ поэтому у больного 11 диагностировано отсутствие

1"ЛП „

Пример2,,У больного М. (номер истории болезни 11> 248) берут

0 > 5 мл сь>БОротки крОБИ о В iB eTy устройства вносят 8,5 мл 0,105 н.

4<1 раствора КС1„ приготовленного на фосфатном буфере (рН 7,15), 0„2 мл

1Х-ной гидроперекиси третичного бутила и 1 мл раствора ионов двухвалентного железа 10>4 1! Ре80 7г1 0

;>5 и тщательно перемешивали содержимое к>оветы.

1255925

П. р и м е р 3. У больного Х.

59 лет, берут 0,5 мл сыворотки крови, Аналогичным образом в кювету устройства вносят 8,5 мл 0,105 M раствора КС1, приготовленного на 5 фосфатнам буфере (рН 7,45), 0,2 мл

1Х-ной гидроперекиси третичного бутила и мл раствора ионов двухвалентнаго железа 10„ M PeS04 7Н 0 и тщательно перемешивают содержимое кюветы.

Затем измеряют шумовой сигнал устройства в течение 1 мин, который составляет 740 имп, и интенсивность свечения приготовленного раствора 15 (фона}, которая составляет 2050 имп, В кювету вносят шприцем 0 5 мл сыворотки крови больного Х,и измеряют интегральную интенсивность хемилюминесценции липидав и их комп- 20 лексов в сыворотке крови в течение

1 мин, которая составляет за выче- том фона 13670 имп, Это значение превышает более„ чем на 107. значение нормы для э ого возраста, поэтому у больного Х.диагностировано наличие . ГЛП, П р и и е р 4; У больного К.интегральная интенсивность хемилюминесценции липидов и их комплексов в сыворотке. крови в течение 1 мин составляет эа вычетом фана 27707 имп.

У него так же диагностировано наличие ГЛП. г

Способ определения гиперлипопротеидемии путем исследования крови с посл дующим электрофоретическим вы30 явлением гиперлипопротеидемий, о т— л и ч а ю шийся тем, что,.с целью ускорения способа, исследование крови осуществляют с помощью хемилюминесценции сыворотки, при,, 35 э 1 ом хемилюминесценцию инициируют

1Х-ным раствором гидроперекиси третичного бутила и 10 M раствором

НоНоВ двухвалентного железа и при уровне светосуммы хемилюминесценции

4р от 1 2340 до 27700 имп/с с учетом электрофоретического исследования липопратеидов определяют гиперлипопротеидемию, Составитель И,Куэенкава

Техред М.Ходанич

Корректор B. Синицкая

Редактор Н,Рогулич

Заказ 4815/43

Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д.4/5. Производственно-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул.Проектная,4

Для контроля с помощью известного способа проведено исследование количества ХС и ТГ у больных N.è Х., которое соответственно составляет: дпя больного M. — ХС = 173 мг.7., ТГ = 85 мг.X — норма, для больного

Х. — ХС = 300 мг.7., ТГ = 180 мг,X

ГЛП. Это подтверждает достоверность диагностики по предлагаемому способу, При этом затраты времени соответ-ственно составляют по.известному способу 12,5 ч, а по предлагаемому способу 0 25 ч..

Таким образом, за счет применения предлагаемого способа достигается существенное ускорение и упрощейие. диагностики ГЛП при минимальных затратах ручного труда исследователя, что дает возможность эффективно использовать его (совместно с другими методиками) при массовых профилак" тических обследованиях населения для определения степени риска развития сердечно-сосудистых заболеваний.

При этом, предлагаемый способ ориентирован на применение биофиэического метода измерения параметров сыворотки крови, для которого создано высокопроизводительное устройство, что обеспечивает высокую автоматизацию способа.

Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я