Способ обнаружения яиц гельминтов в пробах почвы и донных отложениях

 

Изобретение относится к области медицинской паразитологии, а именно к способам санитарно-гельминтологического обследования объектов внешней среды. Цель изобретения - повьшение точности способа. Для этого весь надосадочный слой флотационного раствора с удельной плотностью 1 ,40г-1 ,42 (оптимальной для Диффузии яиц гельминтов из осадка в надосадочную жидкость ) переносят в чистые пробирки

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1 (19) (ll) (504 G 01 N 33 48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

3а,.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3824754/28-14 (22) 17.12.84 (46) 30 05.87. Бюл. 11/ 20 (71) Институт медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И. Марциновского (72) А.С. Шурандин, Н.А. Романенко и Л.А.,Новикова (53) 612.015(088.8) (56) Романенко Н.А. Медицинская паразитология. 1968, Ф 6, с. 728. (54) СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ ЯИЦ ГЕЛЬИНТОВ В ПРОБАХ ПОЧВЫ И ДОННЫХ ОТЛОЖЕНИЯХ (57) Изобретение относится к области медицинской паразитологии, а именно к способам санитарно-гельминтологического обследования объектов внешней среды. Цель изобретения — повышение точности способа. Для этого весь надосадочный слой флотационного раствора с удельной плотностью 1,40-. 1,42 (оптимальной для диффузии яиц гельминтов из осадка в надосадочную жидкость) переносят в чистые пробирки (20 шт.) и разбавляют водой до удельной плотности раствора 1,05. После центрифугирования осадок концентрируют и микроскопируют. Пробы обрабатывают в стандартных пробирках ЗХ-ным раствором калиевой или натриевой щелочи по 6 мл. Содержимое пробирок центрифугируют при 1500 об/мин в течение 3-5 мин, надосадок сливают, осадок промывают водой, к нему добавляют насыщенный раствор соли, вновь центрифугируют, образовавшийся надосадок переливают в чистые пробирки, а доливают воды, встряхивают и вновь е центрифугируют, надосадок сливают, а осадок из 20 пробирок переливают в 4, Добавляют в пробирки воду и сверху наслаивают эфир. Пробирки встряхивают, центрифугируют, сливают надосадок, а осадок микроскопируют.

1314268

Изобретение относится к медицинской паразитологии, а именно к способам санитарно-гельминтологического обследования объектов внешней среды, Целью изобретения является повышение точности способа.

Сущность способа заключается в .следующем.

Весь надосадочный слой флотационного раствора с удельной плотностью

1,40-1,42, оптимальной для диффузии яиц гельминтов из осадка в надосадочную жидкость и послойного распределения последних в зависимости от их собственного удельного веса, переносят в чистые пробирки и разбавляют водой, снижают удельную плотность раствора до 1,05. После центрифугиI рования полученный осадок концентрируют и микроскопируют. Пробы обрабатывают в стандартных клинических пробирках, используют малогабаритную клиническую центрифугу ОПн-З.

При этом в 20 клинических пробирок предварительно наливают по б мл

ЗЖ-ного раствора калиевой или натриевой щелочи, после чего в каждую пробирку вносят по 2-2,5 г обрабатываемого материала. Содержимое пробирок тщательно перемешивают и центрифуги.— руют,надосадочную жидкость сливают, а осадок одноразово промывают водой, после чего к осадку добавляют 3 мл насыщенного раствора соли, содержащего в определенных количествах натриевую и аммиачную селитру с удельной плотностью 1,40, содержимое перемешивают и центрифугируют. Образовавшуюся надасадочную жидкость переливают в чистые пробирки.

К перенесенному раствору флотационной жидкости доливают в каждую пробирку определенное количество воды, пробирки встряхивают и центрифугируют, после чего надосадочную жидкость сливают, а образовавшийся осадок из 20 пробирок концентрируют в 4.

К осадку в каждую пробирку добавляют воду и сверху наслаивают эфир. Пробирки встряхивают и центрифугируют, надосадочный слой сливают,а осадок микроскопируют.

Пример. Приготовление солевого раствора.

Для приготовления насыщенного раствора можно применять как химически чистую соль, так и техническую селитру.

Реактивы смешивают с водой в следующей пропорции . 800 г NaNO +400 г

ИН ЫОэ+1л Н О, что соответствует молярному соотношению 9,4:5 соответственно, и доводят до кипения, ложкой снимая накипь. Раствор кипятят на небольшом огне 10 — 15 мин, после чего его охлаждают и ареометром измеряют удельную плотность, которая должна быть 1,40-1,42, Раствор хранят при комнатной температуре в закрытых емкостях в течение 7-10 дней.

Обработка пробы почвы.

В 20 клинических центрифужных пробирок объемом 10 мл наливают по

6 мл 2 -ного раствора едкого натра, Затем в каждую пробирку вносят такое количество почвы, чтобы объем раствора, налитого в пробирку, увеличился до 7 мл. Такое увеличение объема на l мл соответствует весу почвы от

2 до 2,5 rp. При исследовании пробы в 20 клинических пробирках общий вес навески составит от 40 до 50 гр.

Стеклянной палочкой тщательно перемешивают содержимое пробирок, после чего пробирки центрифугируют при

1500 об/мин в течение 3 мин. В дальнейшем режим центрифугирования оставляют постоянным.

После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют 8 мл воды. Содержимое тщательно перемешивают и центрифугируют.

Надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют 3 мл раствора, содержащего натриевую и аммиачную селитру при молярном соотношении 9,4:5 соответственно. При этом удельная плотность раствора 1,40-1,42 обеспечивает переход яиц гельминтов из осадка в надосадочный слой жидкости.

Яйца, обладающие удельной плотностью менее 1,40-1,42, флотируются .в поверхностную пленку, а с удельной плотностью более 1,40 распределяются по всему столбику надосадочной жидкости. Содержимое пробирок перемешивают и центрифугируют. Отцентрифугированные пробирки оставляют в состоянии покоя в течение 5 мин, после чего надосадочную жидкость переливают в следующий чистый ряд пробирок topна в одну) и далее работают только с ней. К перенесенному раствору флотационной жидкости доливают в каждую пробирку воду до отметки 10 мл. При этом удельная плотность раствора па1314268 4 я- му добавляют до 0,5 мл воды и просматривают из всего осадка только

О,! или 0,2 мл, а полученный резуль- ица тат пересчитывают на весь объем осадка, умнож.-".я в первом случае на 5, а

rx во втором на 2,5. Результаты просмотра осадка из каждой пробирки суммиов- руют.

Составитель Е. Колмакова

Редактор А. Лежнина Техред Л.Олийнык Корректор С. Черни

Заказ 2208/46 Тираж 777 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная,4

3 дает с 1,40 до 1,05. Пробирки встр хивают и центрифугируют при

1500 об/мин в течение 5 мин. Этот прием позволяет сконцентрировать я" гельминтов в осадке. Надосадочную жидкость сливают, а осадок из каждь

l0 пробирок переносят в 2 из них.

Осадок из пробирок собирают пастер ской пипеткой. Таким образом, из 20 пробирок остается только 4, в которых и сконцентрирован весь осадок, содержащий яйца гельминтов.

В каждую пробирку к осадку доливают 7 мл воды и сверху наслаивают

1 мл эфира. Пробирки интенсивно встряхивают в течение 30-40 с и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 3 мин.

Затем надосадочный слой жидкости сливают, стенки пробирки вытирают ватным тампоном, при этом пробирка находится в горизонтальном положении.

Полученный осадок из каждой пробирки переносят пастеровской пипеткой на предметное стекло и накрывают двумя покровными стеклами размером

20 20. В случае если осадка в пробирке малое количество, то его просматривают весь, если большое — то к неФормула изобретения

Способ обнаружения яиц гельминтов в пробах почвы и донных отлОжениях, заключающийся в обработке проб щелочным раствором, водой и флотационной

15 жидкостью с последующим центрифугированием, микроскопированием и подсчетом яиц гельмннтов, о т л и ч а ю— шийся тем,, что,,с целью повышения точности, исследуют пробу 4020 50 r, разделив на равные по весу части, помещают в пробирки центрифугирование проводят при 1500 об/мин в те1 чение 3-5 мин, добавляют в каждую пробирку флотационный раствор плотностью 1,40-1,42, образующуюся надосадочную жидкость переносят в чистые пробирки и разбавляют водой, повторно центрифугируют и микроскопируют осадок.