Способ лабораторной диагностики стронгилоидоза

 

Изобретение относится к лабораторной диагностике заразных болезней, в частности к диагностике паразитных болезней человека, и может быть применено для диагностики стронгилоидоза человека. Целью изобретения является повьшение чувствительности способа за счет стимуляции миграции личинок гельминта. Для исследования берут навеску фекалий, помещают на металлическую сеточку. Сеточку с фека- . ЛИЯМИ опускают в стеклянную банку и осторожно по стенкам банки .заливают 0,9-1,2%-ным растворо хлористого натрия, подогретым до 40-45 С. Через 20 мин сеточку с фекалиями удаляют. Раствор хлористого натрия, в котором вьщерживались фекалии, сливают в центрифунсные пробирки и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 2 мин. Исследуют осадок путем микроскопирования. При обнаружении подвижных личинок их идентифицируют до вида. Использование 0,9-1,2%-ного раствора хлористого натрия позволяет выявлять больных с низкой интенсивностью инвазии (от 1 до 9 личинок в 3,0) в 85,5-96% случаев, в то время как при использовании водопроводной воды - в 54,4% случаев. При средней интенсивности инвазии (от 10 до 50 личинок в 3,0) выявляемость больных стронгилоидозом обоими способами составляет 100%. Однако при использовании растворов хлористого натрия среднее количество личинок в анализе значительно превьшает таковое при применении водопроводной воды (8,4-11,1 и 5,4 личинки соответственно). Способ позволяет при однократном обследовании населения на стронгилогвдоз выявлять больных не только с высокой, но и в 85,5-96,4% с низкой интенсивностью инвазии. 3 табл. (Л с: оо ю 4:; 05 сд

СООЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (51)4 А 61 В 10 00

1 Ра1

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ, Н ABTOPCHGMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3948916/28-13 (22) 02.09.85 (46) 23.07.87. Бюл. 11 27 (75) А.Ф. Прохоров, В.Г. Бережная и Х.Г. Баринова (53) 616.078.616.995.132.2(088.8) (56) Исупов 10.И. и др. Упрощенный метод лабораторной диагностики стронгилоидоза, Медицинская паразитология и паразитные болезни, 1978, В 2, с. 108-110. (54) СПОСОБ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ СТРОНГИЛОИДОЗА ЧЕЛОВЕКА (57) Изобретение относится к лабораторной диагностике заразных болезней, в частности к диагностике паразитных болезней человека, и может быть применено для диагностики стронгилоидоза человека. Целью изобретения является повьппение чувствительности спо. соба за счет стимуляции миграции личинок гельминта. Для исследования берут навеску фекалий, помещают на металлическую сеточку. Сеточку с фека- . лиями опускают в стеклянную банку и осторожно по стенкам банки .заливают 0,9-1,2Х-ным растворо хлористого натрия, подогретым до 40-45 С. Через

„„SU„„1324645 А i

20 мин сеточку с фекалиями удаляют.

Раствор хлористого натрия, в котором выдерживались фекалии, сливают в центрифужные пробирки и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 2 мин.

Исследуют осадок путем микроскопирования. При обнаружении подвижных личинок их идентифицируют до вида. Использование 0,9-1,2%-ного раствора хлористого натрия позволяет выявлять больных с низкой интенсивностью инвазии (от 1 до 9 личинок в 3,0) в

85,5-96Х случаев, в то время как при использовании водопроводной воды— в 54,4% случаев. При средней интенсивности инвазии (от 10 до 50 личи- t нок в 3,0) выявляемость больных стронгилоидозом обоими способами составляет 100%. Однако при использовании растворов хлористого натрия среднее количество личинок в анализе значительно превьппает таковое при применении водопроводной воды (8,4-11,1 и 5,4 личинки соответственно). Способ ©) позволяет при однократном обследова- ф 1 нии населения на стронгилоидоз выяв- „ф;и, лять больных не только с высокой, но и в 85,5-96,4Х с низкой интенсивностью инвазии. 3 табл.

13246

Изобретение относится к лабораторной диагностике заразных болезней, в частности к диагностике паразитных болезней человека.

Цель изобретения — повьппение 5 чувствительности способа за счет стимуляции миграции личинок гельминта.

Пример 1. Для исследования берут 3,0 r фекалий человека, которые помещают на металлические сеточки, прикрепленные к латунному ободку диаметром 25-27 мм с ручкой. Сеточки с фекалиями помещают в стеклянные баночки объемом 30 мл и осторожно по стенкам баночки заливают 0,9 или

1,2 -ным раствором хлористого натрия в количестве 15 мл, подогретым до

40-45 С..Раствор хлористого натрия целесообразно готовить заранее и хранить перед употреблением в холодильнике до 1 мес, Через 20 мин выдерживания фекалий на сеточках в растворе хлористого натрия сеточку с фекалиями удаляют.

Фекалии сбрасываются в 0,5-литровые стеклянные банки и заливаются 5 .-ным лизолом, а сеточки впоследствии обрабатывают кипячением.

Раствор хлористого натрия, в котором выдерживались фекалии, из баночек сливают в две центрифужные пробирки и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 2 мин. После центрифугирования верхнюю часть жидкости из центрифужных пробирок осторожно сливают, оставляя.в осадке около 1 мл жидкости. Осадок распределяют на два-три предметных стекла и микроскопируют под увеличением Зх7 во всех полях зрения в пределах препарата. При обнаружении подвижных личинок их идентифицируют до вида.

Проводят 327 параллельных анализов фекалий, из них с 0,6, 0,9 и

1,2Х-ми растворами хлористого натрия, а также с водой по 78 анализов. С

0,3Х-ным раствором хлористого натрия проводят 15 анализов.

В связи с обнаруженной недостаточной эффективностью этого раствора анализы с ним прекращают ° Проводят единичные анализы фекалий с 1,5Х-ным раствором хлористого натрия. Результаты представлены в табл. 1, иэ которой видно, что при использовании воды положительные результаты показывают 54,5- 6,7Х анализов, а при ис45 2 пользовании 0,6-1,27-ных растворов хлористого натрия доля положительных результатов воэростает до 80,0-96,47 (р (0,01). Наиболее высокая выявляемость личинок наблюдалась при применении 0,9-1,27-ных растворов (85,596,4Х). При средней интенсивности инвазии результаты всех анализов фекалий, как при использовании воды, так и солевых растворов, положительны.

Наблюдается также разница в средних числах личинок в исследованных навесках фекалий при применении разных жидких сред, представленных в табл. 2. Это число при низкой интенсивности инвазии повышается с

0 75 при использовании воды до 2,23,1 личинок при использовании 0,91,27.-ных солевых растворов. Такая же закономерность наблюдается и при средней интенсивности инваэии.

Таким образом, солевые растворы при определенных концентрациях раздражающе действуют на рабдитовидных личинок и тем самым способствуют более интенсивной их миграции из фекалий. При применении 1,5Х-го раствора хлористого натрия наблюдается также интенсивное выделение рабдитовидных личинок из фекалий, однако в этом растворе через 20 мин наблюдается утрата личинками двигательной способности (до 70Х личинок). Указанная концентрация соли является черезмерно высокой для сохранения жизнеспособности личинок данного гельминта.

Пример 2. В клинических условиях проводят 79 параллельных исследований фекалий. больных стронгилоидозом по модификации, метода Бермана с использованием в качестве жидких сред подогретых до 40-45 С водопроводной воды и 0,97.-го раствора хлористого натрия. Результаты исследования представлены ц табл. 3.

Как видно иэ табл. 3, при использовании водопроводной воды общая выявляемость личинок достигает 89,9Х, но при низкой их концентрации она составляет 46,77. В то же время при применении 0,9Х-го солевого раствора общая выявляемость личинок достигает

97,9, т,е. приближается к максимальному возможному уровню. При низкой концентрации личинок их выявляемость также высока (87,57), намного превы3 1324645 4 шающая соответствующий показатель помещение исследуемого материала на при использовании воды (p (p, 01 ) . металлическую сетку, выдерживание в

Таким образом, способ позволяет горячей воде в течение 20-30 мин с при однократном обследовании населе- последующим исследованием осадка, ння на стронгилоидоз выявлять боль- 5 отличающийся тем, что, ных не только с высокой, но и в 85,5- с целью повышения чувствительности

96,47 с низкой интенсивностью инвазии. способа за счет стимуляции миграции

Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я личинок гельминта, в горячую воду доСпособ лабораторной диагностики полнительно вводят раствор хлористого стронгилоидоза человека, включающий 10 натрия до концентрации 0,9-1,2Х.

Таблица

Низкая концентрация личинок в фекалиях (до 9 в 3 г), Жидкая среда

Средняя концентрация личинок в фекалиях (10 50 в 3 г) коли- из по- Х чество ложиХ+м колииз почество ложианали- тельных акали- тельных зов зов

Водопроводная вода

100

54,5 6,6

55

Раствор хлористого натрия

0,37-ный

60,0 «+ 12,6

80,0 + 5,4

85,5 + 4,7

96,4 й2,5

100

23

0,67-ный

100

23

О, 9Х-ный

100

23

55

1, 2Х-ный

Таблица 2

Низкая концентрация личинок в фекалиях (до 9 в 3 г) Средняя концентрация личинок в. фекалиях (10-50 в 3 r) Жидкая среда всего х+6 х 6 всего личиколичество аналиколичестно личинок анализов нок зов

Водопроводная вода

125 5,4 + «5,9

41 0,75+ I 09

23

Раствор хло ристого натрия

14 0,93 + 1,09

92 1,67+ 2,09 23

121 2,20 2,11 23

171 3,10+ 2,10 23

0,37.-ный

0,6Х-ный

171 7,4 +5,5

194 8,4 - 4,3

О, 97-.ный

1 2Х ный

256 11, 1 89

1324645

Таблица 3

ЮфНВЮ

Концентрация личинок

Водопроводная вода

0,9Х-ный раствор хлористого натрия коли- из них X+ м чество полоана- жительлизов но

° фВ@В аФ ЮФ

7 . 46 7Я2 9 24 21

87,5+6,8

100 124 121

100

71 89, 9+3, 4 145 142

97,9+1,2

Составитель В. Романова

Редактор П. Гереши Техред И.Попович Корректор Е. Рошко

Заказ 2987/3 Тираж 595 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Низкая

Средняя, высокая

Всего коли- из них чество положианали- тельных

sos