Способ приготовления препаратов политенных хромосом слюнных желез

 

Для улучшения качества препарапутем окрашивания гетерохроматиновых зон хромосом слюнные железы живой личинки фиксируют в спирт-уксусной смеси (3:1) и на предметном стекле помещают в 40%-ный раствор молочной кислоты. Препарат раздавливают и вьздерживают при 2-4 с в течение 3- 5 сут. Перед окрашиванием препарат промьтают в трех сменах 96-градусного спирта. 00 ю о а ( 4

СОЮЗ СОРЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (дц 4 G 01 N 1/28, А 61 В 10/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ, 1

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3859394/28-14 (22) 20.01.85 (46) 30.06.87. Бюл. Ф 24 (7 1) Саратовский государственный медицинский институт (72) Л.Е.Сигарева (53) 616-0.88.8(088.8) (56) Белянина С.И., Сигарева Л.Е.

Приготовление препаратов политенных хромосом. — Цитология, 1978, 20, 6, 707.

„,Я0„„1320 94 А1 (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ

ПОЛИТЕННЫХ ХРОМОСОМ СЛЮННЫХ ЖЕЛЕЗ (57) Для улучшения качества препаратов путем окрашивания гетерохроматиновых зон хромосом слюнные железы живой личинки фиксируют в спирт-уксусной смеси (3: 1) и на предметном стекле помещают в 407-ный раствор молочной кислоты. Препарат раздавливают и выдерживают при 2-4 С в течение 3о

5 сут. Перед окрашиванием препарат промывают в трех сменах 96-градусного спирта. 1320694

Составитель M.Ïoçíÿê

Техред А.Кравчук Корректор С.Шекмар

Редактор Н.Слободяник

Заказ 2652/46

Тираж 776 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, в частности к цитогенетическим методам анализа политенных хромосом.

Целью изобретения является улучшение качества препаратов за счет окрашивания гетерохроматиновых зон хромосом.

Пример 1 ° Слюнные железы живой личинки IV возраста вида Chironomus plumosus вычленяют в капле гемолимфы личинки, фиксируют 3 мин в спирт-уксусной смеси (3: 1) и помещают на середину 1/3 части предметного стекла в каплю 40%-ной молочной кислоты. Препаровальной иглой под микроскопом отделяют клетки с хромосомами от секрета железы, который удаляют со стекла. Клетки накрывают другим предметным стеклом и осторожно надавливают большим пальцем через слой фильтровальной бумаги в месте соприкосновения двух стекол. Далее о препарат выдерживают при +4 С в течение 3 сут, после чего предметные стекла разъединяют, осторожно растягивая их скользящим движением в противоположные стороны. Полученные препараты проводят через три смены 96градусного этилового спирта, высушивают на воздухе и используют для дифференциальной окраски.

Пример 2. Слюнные железы живой личинки вида Cryptochironomus

obreptans вычленяют в капле гемолимфы личинки, фиксируют 3 мин в спиртуксусной смеси (3:1) и помещают на середину 1/3 части предметного стекла в каплю 40 -ной молочной кислоты.

Под микроскопом отделяют клетки с хромосомами от секрета железы, накрывают предметным стеклом и выдерживают при +2 С в течение 5 сут, после чего предметные стекла разъединяют.

Полученные препараты проводят через три смены 96-градусного этилового спирта, высушивают на воздухе и используют для дифференциальной окраски. Хромосомы этого вида длинные с многочисленными инверсиями, поэтому для получения качественного препарата их выдерживают с молочной кислотой при +2 С в течение 5 сут. На таких препаратах при дифференциальной окраске по С-методу четко окрашивается центромерный район, который не выявляется морфологически при обычной ацетоорсеиновой окраске политенных хромосом данного вида.

Качество препарата обеспечивается продолжительным сроком выдерживания хромосомных препаратов с молочной кислотой, что позволяет добиться максимального расправления хромосом и освобождения от цитоплазмы.

Формула изобретения

Способ приготовления препаратов политенных хромосом слюнных желез путем инкубации клеток в растворе мо"0 лочной кислоты на стекле, их раэдавливании и выдерживании в том же растворе при 2-4 С с последующим их окрашиванием, отличающийся тем, что, с целью улучшения качества

35 препаратов за счет окрашивания гетерохроматиновых зон хромосом, инкубацию проводят в 40 -ном растворе молочной кислоты и выдерживают в ней до 3-5 сут, а перед окрашиванием пре40 параты промывают в трех сменах 96градусного спирта.