Способ определения жизнеспособности мирацидиев трематод

 

Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной паразитологии (гельминтологии). Цель изобретения - повышение точности определения жизнеспособности мирацидиев трематод . Вначале проводят обработку яиц Dicrocoelium lanceatum стимулирующим раствором, состоящим из смеси бутанола и О,1-0,5%-ного водного раствора хлорида натрия (или 0,05- 0,4%-ного водного раствора хлорида калия) в соотношении (5-7): (93-95). После этого яйца инкубируют при 27- З8 с в течение 1-5 мин. Перед микроскопированием полученный субстрат выдерживают 1,5-2 ч на предметном стекле, периодически добавляя в него 0,5-1,5%-ный водньш раствор бутанола. Сочетание указанных приемов приводит к открыванию крьшечки у яиц и выходу мирацидиев именно у данного вида трематод. Эффективность способа определения жизнеспособности мирацидиев трематод составляет 85%. 1 з.п. ф-лы. (Л со to vj 00

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (И) 2 2 А1

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4046989/30-15 (22) 28.03.86 (46) 07.08.87. Бюл. 1(- 29 (71) Институт медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского (72) С.M.Герман, С.А.Беэр и Н.М. Стратан (53) 615.777/779 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

У 550156, кл. А 61 В 10/00, 1975.

Авторское свидетельство СССР

Р 1082402, кл. А 61 В 10/00, 1984. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБ-:

НОСТИ МИРАЦИДИЕВ ТРЕМАТОД (57) Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной паразитологии (гельминтологии). Цель изобретения — повышение точности определения жизнеспособности мирацидиев тре(51) 4 А 61 В 10/00, А 01 K 67/00 матод, Вначале проводят обработку яиц Oicrocoelium lanceatum стимулирующим раствором, состоящим из смеси бутанола и 0,1-0,5Х-ного водного раствора хлорида натрия (или 0,050,4Х-ного водного раствора хлорида калия) в соотношении (5-7):(93-95).

После этого яйца инкубируют при 2738 С в течение 1-5 мин. Перед мнкроскопированием полученный субстрат выдерживают 1,5-2 ч на предметном стекле, периодически добавляя в него

0,5-1,5%-ный водный раствор бутанола.

Сочетание указанных приемов приводит к открыванию крышечки у яиц и выходу мирацидиев именно у данного вида трематод. Эффективность способа определения жизнеспособности мирацидиев трематод составляет 85Х. 1 з.п. ф-лы.

1327882 2

40

Препарат просматривают под обычным световым микроскопом при 100200-кратном увеличении. Перечисленные операции занимают 2-2,5 ч.

Пример 2. Приготовление среды и раствора.

Среду готовят из 7 ч, бутанола и

93 ч. О,l -ного раствора NaCl, приготовленного на дистиллированной воде. Раствор готовят из 0,5 ч. бутанола и 99,5 ч. дистиллированной воды, Определение жизнеспособности мирацидиев проводят как в примере 1, но

Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной паразитологии (гельминтологии), а именно к способам определения жизнеспособности мирацидиев трематод„ патогенных для человека и хозяйственно полезных животных

Цель изобретения — повышение точности определения жизнеспособности мирацидиев.

Пример 1. Предварительно осуществляют приготовление среды и водного. раствора бутанола.

Среду готовят иэ 5 ч, бутанола и

95 ч. 0,5Х-ного раствора NaCl приготовленного на дистиллированной воде. Приготавливают 1,5Х-ный раствор бутанола на дистиллированной воде. Среда и раствор могут храниться

3 сут.

Определение жизнеспособности мира-; цидиев.

Одну каплю взвеси яиц гельминта в воде вносят пипеткой в центрифужную пробирку, Пробирка со взвесью должна содержать 100-500 яиц (меньшее их число может повлиять на репрезентативность результатов, а большее затрудняет подсчет). Пробирка становится в штатив на 1-2 мин для того, чтобы яйца опустились на дно. Полоской фильтровальной бумаги осторожно отсасывают воду и пастеровской пипеткой в пробирку с подсушенными таким образом яйцами добавляют О,l мл среды и инкубируют на водяной бане о при 27 С 5 мин. Затем пробирку встряхивают и содержимое пипеткой переносят на предметное стекло и оставляют на 1,5-2 ч при комнатной темпера-. туре (18-22 С), через каждые 25-35 мин (по мере подсыхания капли) добавляя 0,05 мп 1,5Х-ного раствора бутанола, пробирку со взвесью яиц в среде инкубируют при 35 С 2 мин, Пример 3. Приготовление среды и раствора, Среду готовят из 6 ч, бутанола и

94 ч. 0,3 -ного раствора NaCl, приготовленного на дистиллированной воде, Раствор готовят из 1 ч, бутанола и 99 ч. дистиллированной воды. Определение жизнеспособности мирацидиев проводят как в примерах 1 и 2, но пробирку со взвесью яиц в среде инкубируют при 38 С 1 мин, 1

Пример 4, Приготовление среды и раствора.

Среду готовят из б ч. бутанола и

94 ч. 0,4 .-ного раствора КС1, приготовленного на дистиллированной воде. Раствор готовят из 0,8 ч. бутанола и 99,2 ч, дистиллированной воды.

Определение жизнеспособности мирацидиев проводят. как в примерах 1,2 и 3, но пробирку со взвесью яиц в среде инкубируют при 30 С 3 мин, Испытание метода проводили на яйцах дикроцелиумов (01сгосоеl|шп

1anceatum) полученных из гельминтов Ъ желчи спонтанно инвазирован1 ных овец из очагов дикроцелиоза в

Курской .области и Молдавской ССР.

Полученные таким образом яйца гельминтов различное время (от нескольких недель до 6 мес) содержались в воде при 5"10 С, Эффективность предлагаемого способа определения жизнеспособности мирацидиев трематод составляет 85 .

Формула изобретения

1 „Способ определения жизнеспособности мир ацидиев трематод, включающий обработку яиц стимулирующим раствором с последующим микроскопированием и подсчетом мирацидиев, о т л и— ч ающий с я тем, что, сцелью повышения точности определения, после обработки яиц стимулирующим раствором проводят инкубирование яиц при

27-38 С в течение 1-5 мин, а перед микроскопированием полученный субстрат выдерживают при комнатной температуре на предметном стекле в течение

1,5-2 ч, при этом периодически через

25-35 мин добавляют в него 0,5-1,5Хный раствор бутанола в дистиллирован-. з 132788?

4 ной воде, при этом в качестве стимули- 2. Способ по п.1, о т л и ч а юрующего раствора используют смесь, шийся тем, что концентрация содержащую бутанол и водный раствор водных растворов хлоридов натрия и хлоридов натрия или калия в соотно- калия составляет соответственно О,1шенин (5-7):(93-95). 0,5Х и 0,05-0,47.

Составитель Е.Дмитриченко

Редактор Е.Папп Техред N.Ходанич Корректор С.Черни

Заказ 3417/4 Тираж 595 Подписное

- ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д,4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул.Проектная,4