Питательная среда для выделения наеморнilus influenzae

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается питательной среды дпя выделения Н. in- fluenzae. Цель изобретения - повыше- «ие высеваемостн Н. influenzae. В I л дистиллированной воды вносят 10,2 - 11,0 г агар-агара, смесь нагревают до полного расплавления, после охлаждения до 40 - 50°С последовательно вносят 40,8 - .44,0 г казеиново-дрожжевого гидролизата 0,6 - 0,65 г глюкозы, 0,04-0,045 г нитрата железа и 0,03 - 0,04 г 2 - 3 индолиндиона. Устанавливают рН 7,410,2, стерилизуют при 115 с 30 мин. Среда позволяет получить изолированньш колонии при посеве 100 м.кл., в некоторой степени ингибирует рост стафилококка . 1 табл. с S (Л со. со со

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1 (19) (11) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н Д ВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3785873/28-13 (22) 05.07.84 (46) 30.08.87. Бюл. Ìó 32 (71) Научно-исследовательский институт по производству питательных сред

r. Махачкала (72) А.Г.Гаджиева и P.Î.Àëèåâà (53) 576.8.093.1(088.8) (56) Методические рекомендации по выделению и идентификации микроорганизмов рода Haemophilus Приказ N 98, 03.11.81, М3 СССР, 1979.

Костюкова Н.Н. Сухой казеиноводрожжевой агар — единая питательная основа сред для высокотребовательных микроорганизмов. — В кн.: Разработка и стандартизация микробиологических питательных сред для диагностики инфекционных заболеваний и производства медико-биологических препаратов:

Тез. координационного совещания. Махачкала, 1982, с. 24-25. (5D 4 С 12 Q 1/04 // (С 12 Q 1/04, С 12 R 1:21) (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЬ1ДЕЛЕНИЯ

HAEM0PHILUS INFLUENZA (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается питательной среды для выделения Н. in.fluenzae. Цель изобретения — повьппеиие высеваемости Н. influenzae. В

1 л дистиллированной воды вносят

10,2 — 11,0 r агар-агара, смесь нагревают до полного расплавления, пос- . ле охлаждения до 40 — 50 С последовательно вносят 40,8 †.44,0 r казеиново-дрожжевого гидролиэата, 0,6—

0,65 r глюкозы, 0,04 — 0,045 r нитрата железа и 0,03 — 0,04 r 2 — 3 индолиндиона. Устанавливают рН 7,4+0,2, стерилизуют при 115 С 30 мин. Среда позволяет получить изолированные колонии при посеве 100 м.кл., в некоторой степени ингибирует рост стафилококка. 1 табл.

1

13337

Изобретение относится к микробиологии и касается питательных сред для выделения Haemophilus influenzae.

Пель изобретения — повышение вы5 севаемости Н. inf luenzae.

Использование среды иллюстрируется следующими примерами °

Пример 1. В 1 л дистиллированной воды вносят 10,2 r агар-агара лля набухания. Затем смесь нагревают до полного расплавления агара, далее ее охлаждают до 40 — 50 С и последовательно вносят следующие ингредиенты, г: каэеиново-дрожжевойгидролизат

40,8, глюкоза 0,6, нитрат железа

0,04, 2-3-индолиндиона 0,03. Устанавливают рН среды 7,4„0 2, фильтруют и разливают во флаконы, автоклавируют при 115 С в течение 30 мин. Среду охлаждают до 40 — 50 С; разливают в чашки Петри -(20 — 25 мл) или в пробирки -(5 мл для скошенного агара).

Пример 2. Готовят среду по примеру 1, но ингредиенты используют 25 в следующих соотношениях, г: агарагар 10,8, казеиново-дрожжевой гидролизат 41,8, глюкоза 0,62, нитрат же-леза 0,043, 2-3 индолиндион 0,035.

Пример 3. Готовят среду по ЗО примеру 1, но ингредиенты используют в следующих соотношениях, г: агарагар 11,0, каэеиново-дрожжевой гидролизат 44,0, глюкоза 0,65, нитрат железа 0,045, 2-3-индолиндиона 0,04.

Чашки перед посевом подсушивают о в течение 15 — 20 мин при 37 С. Выращивание ведут в термостате нри 36—

37 С в условиях повышенного содержания углекислого газа.

Перед посевом культуры смывают физраствором и готовят ряд разведений. Посевная доза (0,1 мм) содержит

1000 микробных клеток (м. кл.) и в 0,05 мл взвеси 100 м. кл.

Результаты приведены в таблице °

На предлагаемой среде при посеве

11 2 смеси культур Н.,influenzae стрептококка и стафилококка возможна их дифференциация.

Бактерии Н. inf.luenzae формируют на среде выпуклые с ровными краями, гладкие, нежные, чуть сероватого цвета колонии, диаметром 0,5 мм. Колонии стрептококка мелкие, непрозрачные с плотным центром. Колонии стафилококка крупные до 2 мм в диаметре, гладкие, с ровным краем, пигмент хорошо выражен.

Предлагаемая среда сухая, для приготовления ее используется непищевое сырье и реактивы отечественного производства.

При использовании сухого варианта среды навеску в 52-56 г BchlIIBIoT в колбу с 1000 мп дистиллированной во-. ды, оставляют на 5 мин для набухания, затем кипятят на медленном огне 2—

3 мин, фильтруют и далее проводят в соответствии с примером 1.

Формула изобретения

40,8-44,0

0,6-0,65

0,04-0,045

10,2-11 0

0,03-0,04 гидролизат

Глюкоза

Нитрат железа

Агар-агар

2-3 Индолиндион

Вода дистиллированная

1 л

Питательная среда для выделения

Haemophilus influenzae, содержащая казеиново-дрожжевой гидролизат, агарагар, стимулятор роста и воду дистиллированную, отличающаяся тем,.что, с целью повьппения высеваемости Haemophilus influenzae, она дополнительно.содержит глюкозу и нитрат железа, в качестве стимулятора роста она содержит 2-3 индолиндион при следующем количественном соотношении ингредиентов, г/л:

Казеиново-дрожжевой

1333711

ТестКонтрольная среда, м.кл.

Испытуемая среда штамм

Содержание ингредиентов, м. кл. максиоптиминимальное мальное мальное

7/63 24 24 28 20

1 1/64

18

8/63

10

10

П р и м е ч а н и е. В таблице привопятся средние данные из 5 параллельных опытов при коэффициенте вариации, не превышающем 20Х.

Составитель .А. Завадская

Редактор М. Недолуженко Техред N.Ходанич Корректор С. Шекмар

Заказ 3926/24

Тираж 499 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб., д. 5/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4