Способ консервирования спермы человека

 

Изобретение относится к медицине , предназначено для низкотемпературного консервирования спермы человека для искусственной инсеминации. Цель изобретения - повышение выживаемости спермы человека. Для этого сперму помещают на.25-30 мин в термостат () для разжижения. Затем к сперме добавляют в соотношении 1:1 консервирукицую среду со следующими компонентами, мае. %: глюкоза 3,7- 4,3; натрий лимоннокислый 1,1-1,4 желток куриного яйца 24,0-30,0; 20%- , ный р-р холннахлорида 1,6-2,4; пшцерин 4,6-6,0; вода дистиллированная - остальное. Затем сперму разливают в подключичные катетеры после 45-60 мин эквшшбрации при комнатной температуре. Замораживают с начальной скоростью 0,5 град/мин до +2 - +5°С, затем 90-100 град/мин до температуры от -180 до , переносят в жидкий азот для хранения. 1 табл. (Л

„„SU„„ 155212 А 1

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСГ1УБ ЛИК

А О1 Б 1/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

В

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3781563/28-14 (22) 22,06.84 (46) 30. 11.87. Бюл. В 44 (71) Институт проблем криобиологии и криомедицины АН УССР (72) В.И.Грищенко, Ю.С.Паращук и Ю.В.Калугин (53) 616.314 (088.8) .(56) Авторское свидетельство СССР

В 1103837, кл. А 01 N 1/00 ° 1982. (54) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ СПЕРМЫ

ЧЕЛОВЕКА (57) Изобретение относится к медицине, предназначено для ниэкотемпературного консервирования спермы человека для искусственной инсеминации.

Цель изобретения « повышение выжива" емости спермы человека. Для этого сперму помещают на.25-30 мин в термостат (37 С) для разжижения. Затем к сперме добавляют в соотношении 1:1 консервирующую среду со следующими компонентами, мас. Х: глюкоза 3,74,3; натрий лимоннокислый 1, 1-1,4, желток куриного яйца 24,0-30 0 20X-, ный р-р холинахлорида 1,6-2,4, глицерин 4,6-6,0; вода дистиллированная — остальное. Затем сперму разливают в подключичные катетеры после

45-60 мин эквилибраиии при комнатной температуре. Замораживают с начальной скоростью 0 5 град/мин до

+2 — +5 С, затем 90-100 град/мин до температуры от -180 до -190 С, переносят в жидкий азот для хранения.

1 табл.

1, 1-1,4

25

1 13552

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при ниэкотемпературном консервировании спермы человека с целью искусственной инсе5 минации.

Целью изобретения является повышение выживаемости спермы человека.

Способ осуществляют следующим образом. 10

Сперму помещают на 25-30 мин в термостат (37 С) для разжижения. После этого к сперме в соотношении 1:1 добавляют консервирующую среду, содержащую следующие компоненты, мас.,: 15

Глюкоза 3,7-4,3

Натрий лимоннокислый

Желток куриного яйца 24,0-30,0

20 -ный раствор холинахлорида 1,6-2,4

Глицерин . 4,6-6

Вода дистиллированная Остальное

После 45-60 мин эквилибрации при комнатной температуре сперму разливают в подключичные катетеры.

Замораживание осуществляют сначала со скоростью 0 5 град/мин до 2 — 30

5 С, а затем со скоростью 90

100 град/мин до температуры от -180 о до -190 С, после чего переносят в жидкий азот для хранения. Размораживание осуществляют в водяной бане при 40 С в течение 5-7 с.

Пример 1. Для опыта взяли сперму со следующими показателями: объем эякулята 2,4 мл, общее количество сперматозоидов 136 млн в 1 мл, 4р иэ них активно подвижных 65Х, подвижных форм 71, нормальных форм 80, лейкоцитов 1-2 в поле зрения, простатические тельца изредка, вязкость нормальная. 45

K 2 мл спермы после ее разжижения добавили 2 мл среды, содержащей,мас. :

Глюкоза 4,0

Натрий лимоннокислый 1,2

Желток куриного яйца 26,0

Глицерин 5,0

20Х-ный раствор холинахлорида 2,0

Вода дистиллированная Остальное

Через 45 мин после этого спермой заполнили подключичные катетеры диаметром 1,4 мм по 0,3 мл и заморозили

Скорость охлаждения на II этапе

Подвижность спермов после размораживания, замораживания, С/мин

48,81+1,48

100

46, 13+3,42

Приведенные примеры свидетельствуют о том, что применение глицерина в концентрации 4,6-6 и ведение замораживания на II этапе со скоростью

90-100 град/мин способствует повышению выживаемости спермы после размораживания, что является весьма существенным для последующей инсеминации.

Формула изобретения

Способ консервирования спермы «еловека путем двуступенчатого заморао живания до -180 -190 С в криокон12 2 ее сначала со скоростью 1 град/мин до +2 С, а затем со скоростью

90 град/мин до -180 С, после чего образцы перенесли для хранения в жидкий азот. Размораживание осуществляли через 3 недели хранения в водяной бане при 40 С в течение 5 с.

Данные сперматограммы: рН 7,4, общее количество спермиев в 1 мл 62 млн, подвижных спермиев 55Х, активно подвижных 43, спермиев нормальной формы 72 .

Пример 2. Для опыта взяли

2 пробы спермы по 2 мл и добавили к ней по 2 мл среды, содержащей,мас. :

Глюкоза 4,0

Натрий лимоннокислый 1,2

Желток куриного яйца 26,0

Глицерин 5 0

20 -ный раствор холинахлорида Остальное

После расфасовки спермы по 0,3 мл в подключичные катетеры ее заморозили: сначала обе пробы заморозили со скоростью 1 град/мин до +5 С, а затем одну пробу замораживали со скоростью 90 град/мин, другую — со скоростью 100 град/мин. После того как обе пробы заморозили до -180 С, их перенесли для хранения в жидкий азот.

Через три недели разморозили в водяной бане. При этом получены следующие результаты:

13552

Составитель Л.Гохштейн

Редактор М.Циткина Техред Л.Сердюкова Корректор В.Бутяга

Заказ 5731/4 Тираж 628 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная., 4 серванте, содержащем глицерин, со скоростью замораживания на первом этапе 0 5-1 0 град/мин до температуры не выше +5 С, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повышения выживаемости спермы, замораживание осуществляют в глюкозо-желточ12 4 но-цитратном консерванте, концентрация глицерина в котором составляет

4,6-6, а отношение объема последнего к объему замораживаемой спермы составляет 1:1, при этом замораживание на втором этапе ведут со скоростью, 90-100 град/мин.