Способ определения активности спермы

Авторы патента:

БЕЛОИВАНЕНКО ВИКТОР ИВАНОВИЧ

ДАХНО ФЕДОР ВЛАСОВИЧ

КРАМАР МАРИЯ ИОСИПОВНА

ЧУРИЛОВ ЮРИЙ СЕМЕНОВИЧ

ЧАДАЕВ ВАЛЕРИЙ ЕВГЕНЬЕВИЧ

ПАРАЩУК ЮРИЙ СТЕПАНОВИЧ

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

A61D7/02 - Способы или устройства для введения твердых, жидких или газообразных медикаментов и других веществ в организм животных или для нанесения их на кожу животных (для размножения или оплодотворения A61D 19/00; шприцы A61M)

Изобретение относится к медицине и ветеринарии. Целью изобретения является повышение точности способа. Элкулят разбавляют фосфатно-солевым буферным раствором. Б полученную суспензию вводят агглютинирующий агент. В качестве агглютинирующего агента используют лектины растительного происхождения. Кинетику агглютинации непрерывно регистрируют самопишущим потенциометром. Оценку двигательной способности спермиев осуществляют по величине, обратной скорости образования клеточных агрегатов. (Л 00 СП

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (д11 4 А 61 D 7/02 С 01 N 33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ККС <1)3

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ !1 тг.

О (21) 4050846/30-15 (22) 17.02.86 (46) 07.12.87. Бюл. И - 45 (71) Специальное конструкторско-технологическое бюро с опытным производством Института проблем криобиологии и криомедициныАН УССР иИнститут проблем криобиологиии криомедицины

АН УССР (72) В.И.Белоиваненко, Ф.В.Дахно, M.È.Крамар, Ю.С.Чурилов, В.Е.Чадаев и Ю.С.Паращук (53) 612.616.2(088.8) (56) Инструкция по организации и технологии работы станций по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. вЂ” M.: 1968.

Авторское свидетельство СССР

Ф 974270, кл. С 01 N 33/48, 1976.

„.SU„, 1357018 А1 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ

СПЕРМЫ (57) Изобретение относится к медицине и ветеринарии. Целью изобретения является повышение точности способа.

Элкулят разбавляют фосфатно-солевым буферным раствором. В полученную сус= пензию вводят агглютинирующий агент.

B качестве агглютинирующего агента используют лектины растительного происхождения. Кинетику агглютинации непрерывно регистрируют самопишущим потенциометром. Оценку двигательной способности спермиев осуществляют по величине, обратной скорости образования клеточных агрегатов.

Формула изобретения

Составитель А.Филиппова

Техред М.Дидык Корректор С.Черни

Редактор А.Шандор

Заказ 5917/3

Тираж 595 Подписное

ВНИИПИ Госудасртвенного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4! 13570

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к способам оценки активности спермы, и может быть использовано в акушерстве и гинекологии для диагностики бесплодия, в животноводческой практике при проведении искусственного осеменения и может найти применение в биологии для объективной оценки эффективности методов низкотемпературной обработки и длительного хранения спермы сельскохозяйственных животных.

Целью изобретения является повышение точности способа. 15

Пример 1.Исследуют сперму человека, полученную от 12 доноров.

Перед определением активности спермы зякулят разбавляют фосфатно-солевым буферным раствором (0,01M, рН

7,2-7,4) в соотношении 1:20 и объемом в 2,5 мл вносят в термостатируео мую при 37 С прозрачную кювету, оборудованную системой "мягкого" перемешивания. Контроль процесса агллютина. вЂ” 25 ции проводят на экспериментальной установке методом измерения угловой анизотропии светорассеяния испытуемой суспенэии. В качестве агглютинирующего агента используют лектин растительного происхождения вЂ” фитогемагглютинин (ФГА)> вводимый в испытуемую суспенэию из расчета

15 мкг на миллилитр. Кинетику агглютинации непрерывно регистриуют само35 пишущим потенциометром КСП-4. Скорость образования клеточных агрегатов (агглютинатов) оценивается наклоном регистрируемой кривой.

Для сравнения результатов парал 40 лельно проводят оценку активности спермы визуальным методом под микроскопом по 5-бальной системе.

Анализ коррелятивных связей между активностью спермы и обратной величи- 45 ной скорости образования клеточных агрегатов позволяет сделать вывод о

2 применимости предлагаемого способа для диагностической оценки качестваспермы.

Пример 2 ° Определяют активность образцов криоконсервированной спермы быков-производителей. Размораживание осуществляют по общепринятой методике на водяной бане. После от таивания образцы спермы разбавляют фосфатно-солевым буферным раствором в соотношении 1:10 и проводят определение активности предлагаемым способом аналогично примеру 1. В качестве агглютинирующего агента используют препарат агглютинина зародышей пшеницы в концентрации 1000 мкг в I мл физиологического раствора. Для определения активности в исследуемую суспензию с помощью микропипетки вводят 50 мкл растворенного препарата.

В качестве агглютинирующего агента могут быть использованы любые, нетоксичные к сперме, биологически активные соединения, вызывающие аг-. глютинацию исследуемых клеток, Кроме фитогемагглютинина фасоли и агллютинина зародышей пшеницы, аналогичный эффект даст применение конкановоллина (лектина чеснока).

Способ определения активности спермы, включающий разбавление ее активирующей средой и оценку двигательной способности спермиев в полученной суспензии, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, после разбавления спермы активирующей средой в полученную суспензию вводят агглютинирующий агент и фиксируют скорость образования клеточных агрегатов, а оценку двигательной способности спермиев осуществляют по величине, обратной скорости образования клеточных агрегатов.