Питательная среда для культивирования кампилобактерий

 

Изобретение относится к области медицинской микробиологии, в частности приготовлению питательных сред для культивирования кампилобактерий. Цель изобретения - удешевление среды при сохранении ее ростовых свойств. Для приготовления среды смешивают в 1 л воды триптический гидролизат кормовых дрожжей,натрия пируват,натрия метабисульфит, железо нокислое закисное,натрия глутамат, натрий хлористый, агар, натрий углекислый ,рН среды 7,2. Стерилизуют nptf 1 атм.Среда обеспечивает хороший рост кампилобактерий с сохранением биологических свойств. 2 табл. с

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„1386657 (51)4 С 12 N 1/20

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ, 3,,"

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4039522/28-13 (22) 19.03.86 (46) 07.04.88. Бюл. У 13 (71) Научно-исследовательский ин.ститут по производству питательных сред и Научно-исследовательский институт эпидемиологйи и микробиологии им.почет. акад.Н.Ф.Гамалеи (72) П.Ш.Гашимова, З.У.Темирханова, А.Ф.Мороз, Л.Б.Хазенсон

Н.Ф.Сафонова и З.Н.Матвеева (53) 576.8.093.1 (088.8) (56) Oxcid,Selective Microbiology for

Роой and Dairy Laboratories.1985 р.7 (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЪТИВИ»

РОВАНИЯ КАМПИЛОБАКТЕРИИ (57) Изобретение относится к области медицинской микробиологии, в частности приготовлению питательных сред для культивирования кампилобактерий. Цель изобретения — удешевление среды при сохранении ее ростовых свойств. Для приготовления среды сме" шивают в 1 л воды триптический гидролизат кормовых дрожжей, натрия пируват,натрия метабисульфит, железо сер нокислое закисное,натрия глутамат, натрий хлористый, агар, натрий угле" кислый,рН среды 7,2.Стерилизуют про

1 атм.Среда обеспечивает хороший рост кампилобактерий с сохранением биологических свойств. 2 табл.

1386657

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при работе с кампилобакте( риями.

Цель изобретения — удешевление среды при сохранении ее ростовых свойств .

Пример 1. В 1 л дистиллированной воды растворяют, г: триптичес- !0 кий гидролизат кормовых дрожжей 30,0 натрия пируват 0,2; натрия метабисульфит 0,2, железо сернокислое закисное 0,2; натрия глютамат 1,3, натрий хлористый 4,0, агар 12,0, натрий углекислый 0,15 до рН 7,2, что соответствует .минимальной концентрации ингредиентов. Кипятят 23 мин, отфильтровывают через ватный фильтр, стерилизуют при 1 атм 20 (121 С) в течение 20 мин.

Пример 2. Отличается от примера 1 тем, что в 1 л дистиллированной воды растворяют,г: триптический гидролизат кормовых дрожжей 32,5, 25 натрия пируват 0,25, железо сернокислое эакисное 0,25, метабисульфит ! натрия 0,25, глютамат натрия 1,5, натрий хлористый 0,5, агар 12,5, натрий углекислый 0,2 до рН 7,4, 30 что соответствует оптимальной .концентрации ингредиентов.

Пример 3. Отличается от примеров 1 и 2 тем, что в 1 л дистиллированной воды растворяют, г: ( триптический гидролизат кормовых дрожжеи 15,01,,пируват натрия 0,3, метабисульфит натрия 0,3, железо сернокислое закисное 0,3, натрия глютамат 1,7, натрий хлористый 6,0, 40 агар 13,0, натрий углекислый 0,25 до рН 7,6, что соответствует максимальной концентрации ингредиентов.

Питательную среду можно получить в сухом ниде. 45

Пример 4. В шаровую мельницу загружают, г; ферментативный гидролизат кормовых дрожжей 534,04, натрия пируват 6,67, натрия метабисульфит 6,67, железо сернокислое закисное 6,67, натрия глютамат 40,05, натрия хлорид 133,54, агар порошковидный 267,07, натрий углекислый

5,34. Перемешивают в течение 40 мин.

Навеска среды 37,45 г/л .соответствует оптимальной концентрации.ингредиентов.

После стерилизации среду остужают до 45-50 С, добавляют 5Х стериальной дефибринированной крови, разпивают в чашки Петри по 20-25 мл, После застывания среду подсушивают в термостате в течение 30-40 мин. Возможно использование среды без добавления крови.

Пример 5. Для определения чувствительности и скорости роста проводят посев каждого штамма по

О,! мл взвеси культур из разведения

10 на испытуемую и контрольные среды.

Посевы инкубируют в микроаэрофильных условиях при 42 С, Результать> учитывают через 48 ч (табл.1),средние данные 10 опытов

Показатель эффективности сред определяют путем посева культру на скошенную без столбика поверхность среды, разлитой по 5 мл в стерильные пробирки.

Косяки засевают по 0,1 мл взвеси суточных культур кампилобактерий содержащей 50 млн м.кл, Посевы инкубируют в микроаэрофильных условио ях при температуре 42 С в течение

48 ч.

Показатели эффективности среды приведены в табл.2.

Определение стабильности биологических свойств кампилобактерий проводят путем посева 0 1 мл взвеси культур каждого штамма из разведения

10 и последующего инкубирования в о микроаэрофильных условиях при 42 С. Учет результатов проводят через 48 ч.

Колонии кампилобактерий на среде культивирования — влажные блестящие полупрозрачные кремового цвета круглые или с неровными краями. Диаметр колоний 1,5-2,0 мм.

В мазках, окрашенных по Граму, кампилобактерии просматриваются как грамотрицательные палочки, изогнутые в виде спиралей, занятых, а при микроскопии в темном поле подвижные.

Кампилобактерии продуцируют оксио дазу, каталазу, растут при 42 и 37 С не растут при 25 С не ферментируют углеводы растут в среде, содержащей

1X глицина, Camp jejuni вызывает гидролиз гиппурата.

Таким образом, предлагаемая среда обеспечивает ростовые потребности высокотребовательных к условиям культивирования кампилобактерий, при этом среда более экономичная и не з 1386657 4 трубет для изготовления использова- содержит триптический гидролизат корния пищевых продуктов. мовых дрожжей, в качестве стимулятора роста — натрия глютамат при слеФ о р м у л а и з о б р е т е н и я 5 дующем соотношении компонентов,г/л:

30,0-35,0

1,3-1,7

0,2-0,3

0,2-0,3

0,2-0,3

4,0-6,0

0 15-0,25

12,0-13,0

1 л

Та блица 1 льн

Час вите ность сло воло» ив 100 с easel м.вл. рость та, гнв, цвет, мм

I0 48

104 48

Саар jejaei l I 168 Ь@ нвнан, мремового цвета, 1,5-2,0

2З

20 Ъпимчнаа,кремового цвета, l,0-1,5

Саар 3е5аой 484

13 То це

l0 48

То ае

14

cast jejllai Р5

Саар jejuai 122 Саар соИ, 232

Саар соИ 209

1О

lO-а, 48

10 48 е»

З2

l0 .48 зо

lO 48

1О

48

l0 е

48

Таблица 2

Выход микробных клеток с I мл!!!тамм

Предлагаемая среда

Контрольная среда (без добавления крови) Camp jejuni lll68

4,5

4,7

Camp jejuni 484

7,0

7,5

Camp jejuni 122

9,0

8,7

Camp coli 232

8,5

Camp coli 209

9,2

9,1

7, 66 1, 45

6,64+1,32

М+ш

Питательная среда для культивирования кампилобактерий, содержащая питательную основу, стимулятор роста натрия пируват, натрия метабисульфит, железо еернокислое закисное, натрий хлористый, агар и воду, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью удешевления среды при сохранении ее ростовых свойств, она дополнительно содержит натрий углекислый, в качестве питательной основы она

Триптический гидролизат кормовых дрожжей

Натрия глютамат

Натрия пируват

Натрия метабисульфит

Железо сернокислое закисное

Натрий хлористый

Натрий углекислый

Агар

Вода