Способ получения основы питательных сред для культивирования микроорганизмов

 

Изобретение относится к ветеринарной и медицинской микробиологии и может быть использовано для получения основных питательных сред для биотехнологии . Целью изобретения является повышение ростовых свойств, стандартизация среды и упрощение способа. Органы или мьшечные ткани ластоногих, преимущественно тюленей, имеющих утробный и вторичный волосяной покров, измельчают, заливают водой, подогревают и устанавливают рН 8,0, Добавляют источник ферментов, используя ферментосодержащие органы животного того же вида, после чего проводят гидролиз . Гидролизат фиксируют и высушивают . Для упрощения способа мьшечные ткани ластоногих измельчают вместе с костями. 2 з.п. ф-лы, I табл. а S (Л

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (51)4 С 12 N 1/20

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

gQP p <

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 1 3 „"

И АВТОРСХОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ щрдр, -.... (21) 4196453/28-13 (22) 19.12.86 (46) 15.06.88. Бюл. У 22 (71) Научно-исследовательская лаборатория биологически активных веществ гидробионтов (72) Е.С. Гиршович, Н.В, Козлова, Г.А. Герасимова, Т.Ф. Забара, О.Г.Саканделидзе, В.Г. Лиходед, Г.M. Дробышева, В.П. Горячев, Н.Ф. Бабич, Н.Ф. Касьянов, Б.М. Раскин и С.В.Денисова (53) 576.8.093(088.8) (56) Тезисы совещания экспертов социалиетических стран для стандартизации сухих питательных сред. М.: 1975, с. 34-42.

„„SU„„1402616 А 1 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОСНОВЫ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗ11ОВ (57) Изобретение относится к ветеринарной и медицинской микробиологии и может быть использовано для получения основных питательных сред для биотехнологии. Целью изобретения является повьппение ростовых свойств, стандартизация среды и упрощение способа.

Органы или мышечные ткани ластоногих, преимущественно тюленей, имеющих утробный и вторичный волосяной покров, измельчают, заливают водой, подогревают и устанавливают рН 8,0. Добавляют источник ферментов, используя ферментосодержащие органы животного того же вида, после чего проводят гидролиз. Гидролизат фиксируют и высушивают. Для упрощения способа мьппечные ткани ластоногих измельчают вместе с костями. 2 з.п. ф-лы, 1 табл.

1402б! 6

Изобретение относится к ветеринарной и медицинской микробиологии и может быть использовано для получения основных питательных сред для биотехнологии.

Цель изобретения — повышение ростовых свойств, стандартизация среды и упрощение способа.

В способе получения основы питательных сред гидролизу подвергают органы и мышечные ткани ластоногих, преимущественно молодняка тюленей, имеющих утробный или вторичный воло.сяной покров. Источниками ферментов при гидролизе являются ферментосо:держащие органы того же вида животных. В качестве сырья используют органы и мышечные ткани зеленца, белька,,хохлаченка, серки, сиваря или взрос,лых особей, например нерпы, Кроме того, при использовании для гидролиза мышечных тканей ластоногих их предварительно измельчают

Вместе -с костями, что упрощает способ25

Пример 1. Тушку беломорского тюленя с утробным волосяным покровом (белька), освобожденную от шкуры, Очищают от жира, удаляют внутренние

Органы, голову и заднюю ласту. Мышечную ткань измельчают в мясорубке вместе с костями. 1 кг полученного мясо-костного фарша заливают 2 л водоо проводной воды, подогретой до 50 С, устанавливают рН 8,0, добавляют 100 г фарша поджелудочной железы белька и ! проводят гидролиз в течение 24 ч. Гидролизат отделяют от осадка фильтрованйем, подкисляют уксусной кислотой до рН 5,4, кипятят и фильтруют. Фильтрат вЫсушивают на распылительной сушилке, Содержание аминного азота в полученной основе составляет 7,77.

В отличие от телят, ластоногие не пОдвергаются ветеринарной обработке, поэтому предлагаемое сырье не содержит антибиотиков и других средств, пбдавляющих рост микробов, что положительно влияет на качество получаемых из этого сырья питательных сред для культивирования микроорганизмов. Существенное улучшение качества сред достигается также за счет повышения стандартности сырья путем использовани я преимущественно молодых животных, имеющих утробный или вторичный волося- 5 ной покров. Это объясняется тем, что в силу биологических особенностей организма смена меховых стадий развиt тия модуляции молодых тюленей происходит синхронно и в сжатые сроки.

Например, возраст всей популяции новорожденных тюленей, находящихся в меховой стадии белька (утробный волосяной покров), не превышает 10-12 дней, после чего синхронно наступает стадия линьки, заканчивающаяся к сороковому дню жизни меховой стадией серки вторичный волосяной покров). На этих ранних стадиях развития тюлени питаются только материнским молоком.

Таким образом, предлагаемое сырье стандартно по возрасту и факторам питания, что повышает стандартность получаемых из него питательных сред.

Молодых животных легко отличить по качеству и цвету меха.

Основные питательные среды, полученные по предлагаемому способу, содержат до 8Х аминного азота, т.е. почти в 2 раза больше, чем в прототипе, что выражается в усилении роста микроорганизмов и в снижении расхода основы при приготовлении питательных сред.

Например, для приготовления 1 л питательного бульона, содержащего

100 MrX аминного азота, необходимо израсходовать 12,5 r сухой основной среды, полученной по предлагаемому способу и содержащей 87. аминного азота. В то же время пептического гидролизата, полученного по способу-прототипу и содержащего 2,67, аминного азота, для приготовления 1 л бульона потребуется израсходовать 38 r, что примерно в 3 раза больше.

Повышенное содержание аминного азота (до 87.) в основных средах, получаемых по предлагаемому способу, достигается оптимизацией условий гидролиза за счет испольования ферментосодержащих органов ластоногих того же вида, например поджелудочной железы тюленя, что способствует более высокому сродству между ферментами и субстратом.

Повышение качества основных питательных сред, полученных по предлагаемому способу, выражающееся в существенном улучшении их ростовых свойств, иллюстрируются данными, приведенными в табл. 1 и 2.

Результаты оценки качества образцов основных питательных сред, полученных по предлагаемому способу, в сравнении с производственной серией

140261

ЗО

Формула изобретения

1. Способ получения основы питательных сред для культивирования мик— роорганизмов путем ферментативного. гидролиза животного сырья, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью улучшения ростовых свойств среды, в качестве сырья используют органы и ткани ластоногих, а в качестве источника ферментов для гидролиза — ферментсодержащие органы животных того же вида ластоногих. среды на основе триптического пептона, полученного по способу-прототипу, приведены в таблице.

Результаты оценки качества образ5 цов основных питательных сред, полученных по предлагаемому способу, в сравнении с основной питательной средой фирмы "Difсо" (ClllA) следующие:

Основа среды Рост культуры

Китта-Тароцци clostridium novyi Coedematiens штамм 198

Ферментатив- Рост типичный ный гидроли- Спорообразование 15 зат мясоко- низкое стного фарша белька + печень белька

Ферментативный Рост типичный гидролизат Спорообразование сердца сива- низкое ря + печень сиваря

Питательный Рост отсутствует бульон "ПЫсо из мяса крупного рогатого скота (США) +

+ печень КРС

Из данных, приведенных в таблице, видно, что основные среды, приготовленные по предлагаемому способу, существенно превосходят по ростовым свойствам среду, приготовленную на основе триптического гидролизата мяса теленка. Например, количество микробных клеток на среде из мяса теленка через 48 ч примерно в 10 тыс. раз меньше, чем на среде из сердца бель- 40 ка и почти в 10 раз меньше, чем на среде из мясокостного фарша серки.

Результаты, приведенные вышее, свидетельствуют о более высоком качестве основных сред, полученных по предлагаемому способу, чем известный питательный бульон фирмы "Difco" (США), изготовленный из мяса крупного рогатого скота и являющегося одиним из лучших зарубежных образцов. Указан50 ные основы были использованы в среде

Китта-Тароцци для "требовательной" культуры анаэроба clostridium novyi (ocdematiens), на импортной среде рост культуры отсутствовал.

Низкое спорообразование у бакте55 риальных клеток на средах из сырья ластоногих свидетельствует об их высокой питательной ценности. б

При использовании в качестве сырья мышечных тканей ластоногих их можно измельчать и гидролизовать вместе с костями, что обеспечивается особенностями костно-мышечной системы молодых ластоногих. Это также способствует поны— шению питательной ценности целевого продукта. Кости являются источником, необходимых для роста микроорганизмов

2+ таких неорганических ионов, как Са

РО<, а также продуктов гидролиза кол3 лагена, составляющего 90-96 органического матрикса кости. Помимо повышения качества это исключает трудоемкую стадию отделения мяса от костей и повышает выход целевого продукта за счет безотходного использования мяса.

В отличие от используемых в прототипе телят, являющихся ценным пищевым продуктом, предлагаемые виды сырья ластоногих не являются пищевыми продуктами. Кроме того, используемые в предлагаемом способе такие ферментосодержащие органы ластоногих, как кишечник, желудок, поджелудочная железа, являются неутилизируемыми отходами зверобойного промысла.

Поэтому предлагаемый способ высокоэкономичен. Он позволяет значительно расширить. сырьевую базу для промышленного получения высококачествен- ных стандартных микробиологических сред за счет рационального и комплексного использования полноценного в питательном отношении, но непищевого сырья ластоногих, в том числе отходов регулярного зверобойного промысла.

Наряду с повышением качества, уменьшением расхода готового продукта и расширением сырьевой базы, предлагаемое новое техническое решение позволяет также упростить способ получения сред и повысить выход целевого продукта.

3. Способ по пп. и 2, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью стандартизации среды, в качестве сырья, используют органы и ткани тюленей, имеющих утробный или вторичный волосяной покров.

Вид сырья Основа среды

24 48

Ферментативный гидролизат

Мясо костный фарш серки

1,1 )О

5,2 ° 10

Ферментативный гидролизат

Сердце белька

1,0 10

Триптический пептон (серия 76) Мясо теленка

1,5 10

1,8 .10

Составитель Н.Кузенкова

Редактор Н. Киштулинец Техред A.Кравчук Корректор С. Шекмар,1

Заказ 2826/18 Тираж 520 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

5 1402616

2. Способ по и. 1, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью упрощения способа, мышечные ткани ластоногих измельчают вместе с костями.

Рост культуры Зегsinia entorocolivica (кол-во микробн. кл./мл), через ч