Устройство для исследования аффинитета иммуноглобулинов
Изобретение предназначено для биотехнологии. Цель изобретения - повышение точности измерения константы равновесия. Устройство содержит диффузионную камеру 1 с отсеками для клеток, прозрачную гибкую ленту 2, расположенную на бабине 3, свето чувствительный прибор 5, подключен- i ный к электронному блоку 4 управления . Проточная кювета 6 для раствора ингибитора соединена через магистраль 7 с градиентным смесителем 8 и через магистраль 9 - с перистальтическим насосом 10. Лента 2 выполнена с возможностью последовательного взаимодействия с кюветой 6| камерой 1 и светочувствительным прибором 5. Постоянство состава растворов в проточных кюветах 14 и 18 поддерживается за счет создания потока жидкости из емкостей 16 и 20 по магистралям t5 и 19 перистальтическим насосом 10. 1 ил.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИ Х
РЕСПУБЛИК (51) 4 С 01 N 33/60
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ HOMHTET СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4044542/28-14 (22) 03.03.86 (46) 23,09.88, Бюл. 11> 35 (75) А.Ю.Голубев (53) 615.47(088.8) (56) Ierne N.Ê, et а1. Transplantation reviev, 1974, v.18, рр. 130-150. (54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
АФФИНИТЕТА ИИМУНОГЛОБУЛИНОВ (57) Изобретение предназначено для биотехнологии. Цель изобретения повышение точности измерения константы равновесия. Устройство содержит диффузионную камеру 1 с отсеками для клеток, прозрачную гибкую ленту
2, расположенную на бабине 3, светочувствительный прибор 5, подключенный к электронному блоку 4 управления. Проточная кювета 6 для раствора ингибитора соединена через магистраль
7 с градиентным смесителем 8 и через магистраль 9 — с перистальтическим насосом 10. Лента 2 выполнена с возможностью последовательного взаимодействия с кюветой 6> камерой 1 и светочувствительным прибором 5. Постоянство состава растворов в проточных кюветах 14 и 18 поддерживается за счет создания потока жидкости из емкостей 16 и 20 по магистралям
15 и 19 перистальтическим насосом 10 °
1 ил.
1425550
Изобретение относится к технике, предназначенной для изучения физикоХимических свойств иммуноглобулинов, и применяется в экспериментальной биологии и биотехнологии.
Целью изобретения является повышение точности измерения константы равновесия, На чертеже изображено устройство, общий вид.
Устройство содержит диффузионную камеру 1 с отсеками для клеток, про рачную гибкую лeíòó 2, предназначеную для нанесения монослоя эритроциов и расположенную на бабине 3, существляющей ее непрерывное переме-! щение, и соединенная с электронным блоком 4 управления, светочувствительный прибор 5., включающий в себя 20 источник лучистой энергии и некоторое количество светочувствительных элементов, равное количеству отсеков диффузионной камеры 1 и подключенный электронному блоку 4 управления, проточную кювету 6 для раствора ингибитора, соединенную через магистраль с градиентом смесителя 8 и через
Магистраль 9 с перистальтическим Йасосом 10, автоматический клапан
11, расположенный на магистрали 7 и соединенный через магистраль 12 с емкостьк 13 для физиологического
;раствора, проточную кювету 14 для раствора усиливающей антисыворотки, 35 соединенную через магистраль 15 с емкостью 16 для раствора усиливающей антисыворотки и через магистраль 17 с перистальтическим насосом 10, проточную кювету 18 для раствора комплемента. соединенную через магистраль
19 с емкостью 20 для раствора комплемента и через магистраль 21 с перистальтическим насосом 10. Градиентный смеситель 8, перистальтический насос 10, автоматический клапан 11
45 подключены к электронному блоку 4 управления. Гибкая лента 2 выполнена с возможностью последовательного взаимодействия с кюветой диффузионной камерой 1 и светочувстьительнымэ0 прибором 5. !
Устройство работает следующим образом.
Для измерения константы равновесия, р акции "антитело — антиген" необходимо получить известными методами гибридо-, му, специфичную к исследуемому антигену, и измерить константу равновесия моноклональных антител, секретируемых полученной гибридомой, методами равновесного диализа или равновесной фильтрации.
После этого на гибкую ленту 2 наносят монослой эритроцитов конъюгированных с антигеном. Закрепление монослоя проводят с использованием раствора полилизина для предварительной обработки поверхности ленты 2 °
Емкости (в том числе и градиентного смесителя) заполняют соответствующими растворами, в отсеки диффузионной камеры 1 вносят суспензии исследуемых антителообразующих клеток и клетки гибридомы. Инкубируют клетки при
37 С весь период опыта. Включают
О движитель ленты и прочие приборы и механизмы. Антителообразующие клетки и клетки гибридомы синтезируют и секритируют в экстрацеллюлярное пространство иммуноглубулины, специфичные к данному антигену. Они диффундируют через пористое дно камеры 1 и попадают на смоченную поверхность ленты 2, реагируют с иммобилизованными актигенами и при последующей обработке участка ленты аитисывороткой в проточной кювете 14 и комплементом в проточной кювете 18 обнаруживают зоны гемолиза, количественно оцениваемые посредством светочувствительного прибора 5. В дальнейшем, работа градиентного смесителя 8 и перистальтического насоса 10 приводит к возрастанию концентрации растворимого антигена в проточной кювете 6, что ведет за собой возрастание его количества на поверхности ленты 2, и, как следствие, уменьшение размеров зон гемолиза. Концентрацию ингибитора, при которой происходит двукратное уменьшение размера зоны гемолиза (ширины) безотносительно ее абсолютных размеров, регистрирует электронный блок 4 управления для каждой зоны независимо. После достижения последней зоной состояния двукратного уменьшения электронный блок 4 управления переключает автоматический клапан 11 на магистраль 12, соединенную с емкостью 13 с физиологическим раствором и тем самым исключает влияние растворимого антигена на формирование зон гемолиза. Затем операция повторяется. Постоянство состава растворов в проточных кюветах 14 и 18 поддерживается за счет создания потока
Составитель С.Кныпкин
Редактор Г.Волкова Техред А.Кравчук Корректор В.Романенко
Заказ 4762/41 Тираж 847
Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д. 4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4
3 1425550
4 жидкости из емкостей 16 и 20 по ма- целью повышения точности измерения гистралям 15 и 19 соответственно пе- константы равновесия, устройство ристальтическим насосом 10, соединен- снабжено кюветой с раствором ингибиным с кюветами 14 и 18 магистралями тора, светочувствительным прибором, 17 и 21. электронным блоком управления и бабиной с гибкой лентой, при этом гибФормул а и з обретения кая лента расположена с возможностью
Устройство для исследования аффи- последовательного взаимодействия с нитета иммуноглобулинов, содержащее 10 кюветой, диффузионной камерой и сведиффузионную камеру для клеток, о т — точувствительным прибором, который .л и ч а ю щ е е с я тем, что, с связан с электронным блоком.
