Способ получения (s)-альфа-этил-2-оксо-1-пирролидинацетамида

 

Изобретение касается замещенных пирролидина, в частности получения ( S) -ot.-3Tmi-2-oKco-1 -пирродинацетамида, который обладает антигипоксической и антиишемической активностью и может быть использован в медицине. Цель изобретения - создание активного и малотоксичного вещества указанного класса. Синтез ведут циклизацией

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„14281

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н IlATEHTY

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4027938/23-04 (62) 3898053/23-04 (22) 13.08.86 (23) 14.aS.85 (31) .8412317 (32) 15.05.84 (33) GB (46) 30.09.88. Еюл. и 36 (71) ЮЦБ С.А. (BE) (72) Жан Гобэр, Жан-Пьер Жерт и Ги Бодзон (BE) (53) 547.743.1.07 (088.8) (56) Патент Великобритании

Ф 1309692, кл. С 2 С, .1973. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ (S) -АЛЬФАЭТИЛ-2-ОКСО-1-ПИР РОЛИЦИНАЦЕТАИИЦА (57) Изобретение касается замещенных пирролидина, в частности получения (S)-о»;этил-2-оксо-1-пирродинацетамида, который обладает антигипоксичес 511 С 07 D 207/26, А 61 К 31/40 кой и антиишемической активностью и может быть использован в медицине.

Цель изобретения — создание активного и малотоксичного вещества указанного класса. Синтез ведут циклизацией (S)-2-аминобутанамида общей ф-лы

Х-(СН ) -Y-NH-СН,С Н ) С(О) ИН, где а) Х - С(О)0(С,-C4)алкил; Y " метилен; б) Х вЂ” галоидметилен; Y- карбонильная группа. Процесс проводят в среде органического растворителя (толуоле) в присутствии катализатора

2-оксипиридина или тетрабутиламмонийо бромида преимущественно при 110 С

12 ч. Выход до 747, т.пл. 117 С; 6 о (Ы) ц=-90 (c=1; ацетон); минимальная I эффективная доза 0,032 ммоль/хг. (протин гопоксии).и 0,16 ммоль/кг (против Я ишемии), токсичность .р 1081 мг/кг ( (для мьппей) и 1038 мг/кг (для крыс), 3 табл..

1428195

Изобретение относится к получению нового соединения — (S)-альфа-этил2-оксо-1-пирролидинацетамида, обладающего антигипоксической и антиишемической активностью.

Цель изобретения — разработка на основе известных методов способа получения нового соединения, обладающего ценными фармакологическими свойст- 1ð . вами при низкой токсичности.

Пример 1. а) Получение этил(S)-4-//1-(аминокарбонил) пропил/.

/-амино/бутирата, К суспензии 47,75 г (0,345 моль) хлоргидрата (S)-2-аминобутанамида ((альфа,: +26, 1 ; с 1, метанол) в

400 мл толуола добавляют 143,6 мл (1,035 моль) триэтиламина. Смесь нагревают до 80 С и вводят в нее по каплям 67,2 r (0,345 моль) этил-4бромбутирата, Выдерживают реакционную среду при о

80 С в течение 10 ч, затем фильтруют в горячем состоянии с целью удаления 25 солей триэтиламина. Фильтрат выпаривают нри пониженном давлении и получают 59.r маслянистого остатка, состоящего в основном из продукта моноалкилирования и содержащего незначительное количество диалкилпроизводного.

Полученный неочищенный продукт использован как таковой без дополнительной очистки для получения (S)альфа-этил-2-оксо-1-пирролидинацета35 мида циклизацией. б) Получение ($)-альфа-этил-2оксо-1-пирролидинацетамида.

Растворяют 54 г неочищенного продукта, полученного в а), в 125 мл толуола в присутствии 2 r 2-оксипио ридина. Выдерживают смесь при 110 С в течение 12 ч.

Нерастворимое вещество отфильтро- 45 вывают в горячем состоянии. Затем выпаривают фильтрат при пониженном давлении. Остаток очищают методом хроматографии на колонке 1,1 кг диоксида кремния (диаметр колонки 5 см; 50 элюент — смесь этилацетата, метанола и концентрированного аммиака в объемном соотношении 85:12:3).

Выделенный продукт повторно кристаллизуют из 50 мл этилацетата. Полу- 55 чают таким образом 17,5 r ($)-альфаэтил-2-оксо-1-пирролидинацетамида °

Т.пл, 117 С (альфа,: -90,0 (с=1, ацетон). Выход 417.

Пример 2. a) Получение (S) -N-/

/1- (аминокарбонил) пропил/-4-хлор бутанамида.

Смешивают 345,6 r (2,5 моль) измельченного карбоната калия и 138,5 r (1 моль) хлоргидрата (S)-2-аминобутанамида в 2,5 л ацетонитрила. Реакционную смесь охлаждают до темперао туры приблизительно 0 С и вводят в нее по каплям раствор 129,2 г (1,2 моль) 4-хлорбутирилхлорида в

500 мл ацетонитрила, По окончании добавления реакционную смесь оставляют нагреваться до температуры окружающей среды, Отделяют нерастворимое вещество фильтрованием и выпаривают фильтрат при пониженном давлении, Полученный неочищенный остаток перемешивают в течение 30 мин в 1,2 л безводного эфира при 5-.10 С. Осадок отфильтровывают,.промывают его дваж- . ды 225 мл эфира и сушат в вакууме.

Получают таким образом 162,7 г ($)N-/1-(аминокарбонил)пропил/4-хлорбутанамида. Т.пл. 118-123 С. (альфа)д .

-18 (с=1, метанол) . Выход 78,7Х.

Полученный таким образом неочищенный продукт вполне пригоден для следующей стадии циклизации. Однако он может быть очищен путем перемешИванйя в течение 1 ч в безводном этилацетате, Т.пл. 120-122 С. (альфа» :-22,2 (с=1, метанол). б). Получение (S)-альфа-этил-2-оксо-1-пирролидинацетамида °

При 0 С в атмосфере азота смешивают в 45 мл дихлорметана 6,2 r (0,03 моль) (S)-N-(1-(аминокарбонил) пропил/-4-хлорбутанамида и 0,484 r (0,0015 моль) тетрабутиламмонийбромида. Добавляют в течение 30 мин, не превышая температуры реакционной смеси +2 С, 2,02 r (0,036.моль) порошкообразного гидроксида калия ° Затем смесь перемешивают в течение t ч. К ней добавляют еще 0,1 г (0,0018 моль) измельченного гидроксида калия и перемешивают еще в течение 30 мин при о.

О С. Оставляют нагреваться до температуры окружающей среды.

Удаляют нерастворимое вещество фильтрованием и концентрируют фильтрат при пониженном давлении. Полученный остаток кристаллизуют повторно в 40 мл этилацетата в присутствии

1,9 r молекулярного сита 0,4 нм, которое удаляют затем фильтрованием í горячем состоянии. Получают таким обра3 14281 зом 3,10 r (S)- альфа-этил-2-оксо-1о пирролидинацетамида. Т, пл. 116,7 С, (альфаД : -90, 1 (с=1, ацетон). Выход 60,7Х.

Пример 3. Получение (Б)-альфа-этил-2-оксо-1-пирролидинацетамида.

Этот пример. иллюстрирует вариант способа, указанного в примере 2, согласно которому промежуточное соедине- 10 ние 4-хлорбутанамиц, полученный in

situ, не выделен.

К суспенэии 69,25 г (0,5 моль) хлоргидрата (S)-2-аминобутанамида в

600 мл дихлорметана добавляют при температуре окружающей среды 84 r безводного сульфата натрия. Охлаждают до 0 С и добавляют 115 r измельченного гидроксида калия, затем 8,1 r .. (0,025 моль) тетрабутиламмонийброми" да, растворенного в 100 мл дихлорметана. При энергичном перемешивании о добавляют .по каплям при 0 С раствор

77,5 r 4-хлорбутилхлорида в 100 мл дихлорметана. Спустя 5 ч реакции добавляют еще 29 г измельченного гидроксида калия. Через 2 ч реакционную смесь фильтруют через hyf1o-се1 H выпаривают фильтрат при пониженном давлении. Остаток (93,5 r) дисперги руют в 130 мл горячего толуола в те" чение 45 мин. Фильтруют и выпаривают при пониженном давлении. Растворяют остаток (71,3 г) в горячем состоянии в 380 мл этилацетата, к которому прибавлено 23 г молекулярного сита

0;4 нм в виде порошка. Эту смесь на- ° гревают с рефлюксом и фильтруют в горячем состоянии. После охлаждения фильтрата целевой продукт кристаллизуется. Получают таким образом 63 г (S)-альфа-этил-2-оксо-1-пирролидинацетамида. Т.пл. 117 С. (альфа)

-91,3 (c=i, ацетон). Выход 74,1Х.

Фармацевтические испытания.

Рацемический альфа-зтил-2-оксо-1- 45 пирролидинацетамид (продукт А) и (S)альфа-этил-2-оксо-пирролидинацетамид (продукт В), полученный согласно изобретению, были подвергнуты фармакологическим испытаниям. 50

1. Защита против гипоксии (мыши).

Принцип этого испытания состоит в измерении выживаемости. организма, подвергнутого действию атмосферы, прогрессивно обедняемой кислородом.

Принимая во внимание особую чувствительность нервной системы к поражениям такого типа, полученные результаты;

4. этого испытания можно интерпретировать как меру сопротивляемости нервной системы. Следовательно, продукты, повышающие сопротивляемость животных, пригодны для лечения и предупреждения агрессий центральной нервной системы гипоксического характера.

Методика. Прибор представляет собой герметичную прозрачную клетку высотой 37 см, глубиной 39 см и шириной 97 см. Эта клетка объемом 140 л имеет 60 прозрачных отсеков размерами

6 10 10 см, позволяющих содержать в изоляции 60 мьппей.

Вентилятор обеспечивает.перемеши- вание атмосферы, циркулирующей по отсекам через решетчатый пол. Клетка оборудована устройством для ввода азота с постоянным расходом и отвер стием, сообщающимся с окружающим воздухом.

В качестве животных взяты мышисамцы (NMR1) весом 20-22 г. Им перестают давать пищу накануне испытания.

Опыт проводят на следующий день одновременно с тремя группами по 20 мышей: контрольная группа получает орально воду (25 мл/кг), а остальные две группы получают каждая испытуемый продукт орально..

Через 25 мин после введения животных перераспределяют наудачу между отсеками таким образом, чтобы ни одна из трех групп не попала в лучшее место в клетке.

Через 30 мин после введения клетку закрывают и вводят азот с постоянным расходом (7,750 л технического азота в 1 мин) в течение приблизительно 37 мин. К этому времени атмосфера содержит 3,7Х кислорода. Клетку оставляют закрытой до критического момента — когда из двадцати контрольных животных остаются в живых не более трех. В это время клетку открывают и впускают в нее окружающий воздух. Через несколько мгновений подсчитывают количество выживших животных в каждой группе.

Опыты -повторяют для каждой дозы испытуемого продукта один или два раза. Результаты подытоживают для получения минимум 40 (или 60) животных на дозу и 40 (60) соответствующих контрольных животных, Для. каждой дозы испытанного продукта количество, выживших животных

28195 лорода, Статис этой разности

Fischer-Gates.

В табл,1 пр полученные для дуктов А и В.

Таблиц тическое значение (Pj оценивается тестом иведены результаты, возрастающих доз проа 1

Количество выживших животных контр.: обработанны

12/60 16/60

0,032

8/60

7/60 NS

У

t2/60 NS

0ь1

12/60

0,16

10/60

30/60 <0 001

0,32

0,016 5/40 11/40 NS

8/40 17/40 0,6

0,032

0,1 6/40 19/40 е О, 005

0,16

0,32

П р и м е ч а н и е. - NS - разность неэначи«

4 тельная

5 14 среди обработанных данным продуктом сравнивают с количеством выживших контрольных животных, Разность между этими числами выражает защитную активность продукта по отношению к гипоксии, вызванной недостатком кисИспытуемый Доза при ораль продукт ном введении, ммоль/кг

В этом опыте левовращающий знан.тиомер, полученный согласно изобретевию (продукт В), повьппает выживаемость животных, лишенных кислорода, начиная с дозы 0,032 ммоль/кг. Рацемат (продукт А) проявляет подобную активность только начиная с дозы

0,32 ммоль/кг (первая эффективная доза)., а следовательно, он в 10 раз менее активен левовращающего энантио" мера.

2. Защита против церебральной ишемии (крысы).

Принцип. Электроэнцефалографические проверки показывают,,что перевязка двух общих сонных артерий у крыс вызывает истинную ишемию головного мозга: кривая электроэнцефалограммы становится плоской и даже изоэлектрической (электрическая пауза).

Методика. Крыс-самцов Mistar весом

250-350 г анестезируют пентобарбиталом, который вводят ннтраперитонеально в дозе 50 мг/кг (0 5 мл/100 r).

Сразу же после анестезии животным вводят интраперитонеально, из расчета

6/40 19/40 (О, 005

5/40 17/40 (0,01

0,5 мл/100 r, либо испытуемый продукт, 35 растворенный в иэотоническом растворе хлорида натрия (обработанные животные), либо только иэотонический раствор хлорида натрия, или плацебо (контрольные животные).

40 Приблизительно через 20 мин снима.ют лигатуру с обеих общих сонных артерий и приблизительно через 10 мин их одновременно перевязывают. Эту операцию проделывают одновременно

45 на контрольных и обработанных животных.

Через 1 ч после введения испытуе-. мого продукта или плацебо вводят сно-. ва интраперитонеально такую же дозу

50 либо испытуемого продукта (обработанным животным), либо плацебо (контрольным животным).

Через 5 ч после первого введения вводят в третий раз дозу либо испытуемого продукта (вьпкившим обработанным животным), либо плацебо (выжившим контрольным животным).

Через 24 ч после первого введения проверяют у всех животных под анесте1428195

Та блица 3

ЬПэ0, мг/кг

Мыши крысы

Испытуемый продукт. А 1790 1500

1038

1 08 1

Испы туемый

Доза при м/п вве-! дении, ммоль/кг про дук

О, 32 6/29 8/29 NS

О, 64 11/30 21/30 О, 01

О, 1 9/29 14/29 NS

Ов 16 6/29 14/30 Оэ 05

О, 32 8/30 19/29 О, 01

Формула изобретения

Способ получения (S)-альфа"этил"

2-окса-1-пирролидинацетамида, о тлич ающий с я тем, чо (S}-2аминобутанамид общей формулы

35 Х-СН -СН вЂ” У-NHCH(C Н )СОНН, где Х вЂ” ZOOC npu Y -СЙ„-, где Z—

С С -алкил, или Х вЂ” На1СН при У -СО-, где На1 галоген, 40 подвергают циклиэац в среде инертного органического растворителя в присутствии в качестве катализатора

2-оксипиридина или тетрабутиламмонийбромида соответственно.

П риме ч а ни е. NS — разность незначительная

Из табл.2 следует, что рацемат (продукт А) активен лишь начиная с дозы 0,64 ммоль/кг. Напротив, левовращающий энантиомер, полученный согласно изобретению (прадукт В), Составитель Н ° Бочарова

Редактор И.Касарда Техред A.Êðàâ÷óê Корректор Л.Патай

Заказ 4870/59 Тираж 370 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д, 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 зией, вызванной пентобарбиталом, эффективность лигатуры путем рассечения сонных артерий ниже лигатуры.

Отмечают количество выживших животных как из обработанных, так и из контрольных животных. Для каждой дозы испытанного продукта количество выживших животных из обработанных данным продуктом сравнивают с количеством выживших животных иэ контрольных.

Разность выражает защитную активность продукта против летальности, вызван-. ной одновременной лигатурой обеих сонных артерий, Статистическое эначе- 15 ние (Р) этой разности оценивается тестом Brandt — Snedecor. . В табл,2 приведены результаты, полученные для возрастающих доэ продуктов А и В.

Т а блица 2 защищает животных от смерти, вызванной одновременной лигатурой обеих сонных артерий, начиная с дозы

О, 16 ммоль/кг, следовательно, он в четыре раза более активен, чем рацемат, Токсичность. В табл.З приведены для продуктов А и В значения ЬР ) мг/кг, при внутривенном введении, определенные у мышей-самцов и крыссамцов.

Из табл.3 следует, что левовращающий энантиомер, полученный согласно изобретению (продукт В), является, как и рацемат (продукт А), очень малотоксичным, и что токсичная доза гораздо больше активной дозы.