Способ диагностики злокачественных опухолей человека

 

Изобретение относится к медицине , точнее к онкологии, предназначено для диагностики злокачественных опухолей человека. Цель изобретения повышение точности диагностики. Для этого в мазке крови определяют про- .центное содержание малых лимфоцитов диаметром не более 7,5 мкм.У практически здоровых людей этот показатель равен f 25%. При его снижении до 15% и ниже проверяют чувствительность лимфоцитов больного к антигенам злокачественных опухолей в реакции подавления прилипания лейкоцитов. При положительном результате в этой пробе констатируют наличие злокачественной опухоли в организме. Малые лимфоциты идентифицируют по величине клеток и ядерно-цитоплазматическому соотношению при диаметре клетки 7,5 мкм и менее со зрелым, иногда пикнотическим ядром, расположенным эксцентрично , а также к ним относят клетки без цитоплазмы, так называемые голые ядра. S (Л с

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СООИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК ци 4 G 01 1 33/49 (ВСЕСЕОЧИ --, ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н A BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

БНБЛМОТЫА

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4191384/28-14 (22) 09.02.87 (46) 23, 10.88. Бюл. Ф 39 (71) Центральный научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии им. Н,H.Ïðèîðîâà (72) В.И.Говалло и Н.Н.Ефимцева (53) 616.07 (088.8) (56) Говалло В.И., Скуинь Л.M., Космиади Г.А,, Ефимцева Н.И. Некоторые аспекты клинического применения реакции подавления прилипания лейко цитов. — Иммунология, 1983, Ф 2, с. 81-84. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕНHblX ОПУХОЛЕЙ ЧЕЛОВЕКА (57) Изобретение относится к медицине, точнее к .онкологии, предназначено для диагностики злокачественных опухолей человека. Цель изобретения—

„„SU„„НЗаж А1 повышение точности диагностики. Для этого в мазке крови определяют про.центное содержание малыхлимфоцнтов диаметром не более 7, 5 мкм. У практически здоровых людей этот показатель равен ®

©25%. При его снижении до 15% и ниже проверяют чувствительность лимфоцитов больного к антигенам злокачественных опухолей в реакции подавления прилипания лейкоцитов. При положительном результате в этой пробе констатируют наличие злокачественной опухоли в организме. Малые лимфоциты идентифицируют по величине клеток и ядерно-цитоплазматическому соотношению при диаметре клетки 7,5 мкм и менее со зрелым, иногда пикнотическим ядром, расположенным эксцентрично, а также к ним относят клетки без цитоплазмы, так называемые "голые ядра".

1432008 организме. 20 у практически 37Ioposbix людей процентное содержание малых лимфоцитов составляет в среднем 257.. Резкое снижение этого показателя отмечается при раках молочной железы, легкого, пищевода, кишечника, матки, яичников, семенников, злокачественной меланоме, злокачественных костных опухолях. При этом 11ри различных формах туберкулеза, воспалительн11х процессах,30 доброкачественных опухолях и кистах снижения малых лимфоцитов H крови Hp на хондросаркома.

П р и и е р 4. Б-ная П. Содержание мапых лимфоцитов 187.. В РПШ1 положительная реакция с янтигеном остеобластокластомы и отрицательная с янтигеняк остеогенн "!; ярки ы, хонцросаркомь1, рака молочно и железь и легких. Клинически,, рентгенологи 1ески и морфологически диагностирована побрскяЧЕСтВЕННяя O:С-твпб.-я ..-:I>ÊIfяс .-оиа.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для диагностики злокачественных опухолей человека, Цель — повышение точности диагнос— тики.

Поставленная цель достигается за счет дополнительного определения в

f мазке крови процентного содержания малых лимфоцитов (диаметр 7,5 мкм и менее}. При снижении этого показателя до 157 и ниже проверяют чувст вительность лимфоцитов больного к антигенам злокачественных опухолей, в реакции подавления прилипания лей коцитов и в случае положительного результата в этой пробе констатируют наличие злокачественной опухоли в происходит.

Способ осуществляется следующим образом.

В мазке крови, окрашенном по Паппенгейму или Романовскому, среди лимфоцитов подсчитывают процентное со ержание малых лимфоцитов,, которые идентифицируют по величине клеток и ядерно-цитоплазматическому соотношению. Маль1ми лимфоцитами считают клетки диаметром 7,5 мкм и менее с. зрелым, иногда пикнотическим ядром, расположенным эксцентрично.К ним относят клетки без цитоплазмь1, тяк называемые "голые ядра". Диаметр клеток измеряют окуляр-микрометром 108-2-15х.

Подсчет таких лимфоцитов возможен и без микрометра путем сравнения с

5Î диаметром эритроцитов, который не превышает 7,5 мкм.

Вторым этапом исследования служит

Постановка реакции подавления прили55 пания лейкоцитов. В качестве антиГенов используют водно-со-Ipвые экстракты аллогенных опухолей, ;ляленных при хирургическом вмешяте:!»Cтве. Конечняя концентрация белка в экстракте составляет 2 мг/мл.

Для постановки реакции подавления при IHffaHHs лейкоцитов (Р11ПЛ) берут

1 — 1,5 мл крови. Лейкоциты получают отстаиванием крови с гепяринсм при о

37 С, примесь эритроцитов уда..1яют обработкой нядг>садка 0,57. хлоридом аммония. Лейкоциты однократно отмы.вают в сре å 199 и доводят их концентрацию до 10 клеток/мл. Для лов 7 становки реакции смешивают 0,11 мл суспензии JIeHKol!H To!3 1!aIIHtffтя, 0,1 мл экстракта опухоли, 0,1 мл

ЛВ-сыворотки и 0,2 мл среды 199.

Смесь в пробирках инкубируют в горизс,нтальном положении 2 ч при 37 С, после чего недосадочную жидкость исследуют в камере Гряева для опрег1еления неприлипших к поверхности пробирки клеток, Индекс неприлипания

В - A вычисляют по формулp ----,-- x 100

% где  — число неприлипших клеток в опыте; Л вЂ” число неприлипших клеток в контроле. РППЛ считают положительной 11ри индексе Э 30, Г р и !Н е р 1. Гр-нин Ю, донор крови. CQ,öepæa»IIe;: а.-lb!x лимфоцитов в крови 267, РГПЛ с янтигенами из остеогеннсй и хондросаркомы, карциномь1 молочной железы и ле кого отрицательная. Клинически и рентгенологичеcкH консTaтHровяно оTсутcтвие Опу ( холи.!

Пример 2. Б-ной К. Содержание мальгх лимфоцитов 157=, РППЛ с антигеном из ос геогенной саркомы — положитальная, с антигеном остеоблястокластомь1 отрицательная. Клинически, рентгенологически и морфологически был подтвержден диагноз остеогенной сарком»1.

Пример 3. Б-.ной Х. Содержание малых лимфоцитов 5К. В РППЛ положительная реакция с антигенами хондросаркомы. Клинически, рентгенологически и морфологически диагностирова14 32008

Составитель В.Пухальская

Техред . 1. Лиль к Корректор И.Иаксимишинец

Редактор Л.Зайцева

Заказ 5384/16

Тираж 847

Подписное

И!ИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Иосква, R-35, Раушская наб., д. 4/5!!роизводственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Пример 5. !>-ная М-ва. Иалых лимфоцитов 147.. В РПП!! положительная реакция с антигеном рака молочной железы, отрица rest» íàë r антигенами костных опухолей. Епиггический диагноз: рак молочной железы.

Пример 6. Б-ная П-ва A.Ã, Поступила с жалобами на боли в левой половине таза, левой паховой области, ограничение движений в левом тазобедренном суставе. Страдает с июля

1985, лечилась по поводу деформирующего артрита. Ранее пункционная биопсия опухолевых клеток не выявила, но проведен курс дистанционной гамматерапии (10 х 400 рад), не снявший болей. Иммунологическое обследование в ЦИТО показало содержание малых лимфоцитов 12Х, в РППЛ получен отрицательный результат с антигенами остегенной, хондросаркомы и остеобластокластомы. При гистологическом анализе открытой биопсии установлен диагноз хондросаркомы. 25.11.86 произведена межповздошно-брюшная зкэартикуляция слева ° Окончательный диагноэ: хонлросаркома мезенхимальпая левой половины таза.

Преллагаемь;м способом было обсле5 ловано 100 кл:tt!t»÷å< ки здоровых людей более 100 больных травмой, остеомиелитом, сепсисом, артритами и 242 больHhIx c0 злока-.ественггьгмгг опухжгямгг.

Точность диагностики составила при опухолях костной системы 1007, а при раках другой локализации не ниже

95Х.

Формул а изобретения

Способ диагностики злокачественных опухолей человека путем определения сенсибилизапии лимфоцитов крови к опухолевым антигенам, о т л и ч а юttt H и с я тем, что, с целью повышения точности способа, дополнительно в мазке крови определяют процентное содержание малых лимфоцитов (диаметр = 7,5 мкм) и при его снижении до

25 15К и ниже и при наличии сенсибилиза" ции лимфоцитов диагностируют з IîKà÷å ственную опухо tb в организме.