Способ выделения опаковой формы кукурузы

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к генетическим исследованиям зерновых культур, и может быть использовано для селекционной оценки зерна и выделения опаковых форм кукурузы. Цель изобретения - упрощение и ускорение процесса выделения. Образец размолотого зерна кукурузы обрабатывают водой в течение 15-60 мин с получением белковой фракции. Очищенную белковую фракцию помещают в оптическую кювету и анализируют по спектру кругового дихроизма в области 205-240 нм. Опаковую форму выявляют по возрастанию отношения оптической плотности при 221-230 нм к оптической плотности при 208-215 нм. 1 ил., 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5D 4 А 01 Н 1 04

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

llO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4244518/31-13 (22) 13.05.87 (46) 15.05.89. Бюл. № 18 (71) Днепропетровский государственный университет им. 300-летия воссоединения

Украины с Россией (72) А. Н. Винниченко, В. С. Феденко и О. А. Ливенская (53) 631.521.3 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР № 1201769, кл. А 01 N 33/02, 1985. (54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ОПАКОВОЙ

ФОРМЫ КУКУРУЗЫ (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к генетическим ис1

Изобретение относится к сельскому хозяйству, к генетическим исследованиям зерновых культур и может быть использовано для селекционной оценки зерна с целью выявления опаковых форм кукурузы.

Цель изобретения — упрощение и ускорение процесса выделения.

На чертеже представлены спектры исходной 1 и опаковой 2 форм кукурузы.

Способ осуществляют следующим образом.

Образец размолотого зерна кукурузы обрабатывают водой при 0 — 25 С 15 — 60 мин с получением белковой фракции, которую очищают от механических примесей центрифугированием и фильтрованием. Анализ раствора образца в оптической кювете ведут по спектру кругового дихроизма в области 205 — 240 нм. По полученным данным определяют опаковую форму кукурузы по возрастанию оптической плотности при

221 †2 нм по сравнению с оптической плотностью при 208 †2 нм. Определение проводят параллельно, используя спектры кругового дихроизма водорастворимой вытяжки исходной (кривая 1) и опаковой

„„SU„„1479028 A1 следованиям зерновых культур, и может быть использовано для селекционной оценки зерна и выделения опаковых форм кукурузы. Цель изобретения — упрощение и ускорение процесса выделения. Образец размолотого зерна кукурузы обрабатывают водой в течение 15 — 60 мин с получением белковой фракции. Очищенную белковую фракцию помещают в оптическую кювету и анализируют по спектру кругового дихроизма в области 205 — 240 нм. Опаковую форму выявляют по возрастанию отношения оптической плотности при 221 †2 нм к оптической плотности при 208 †2 нм.

1 ил., 1 табл.

2 (кривая 2) форм кукурузы. В качестве исходного материала для испытания использовано зерно обычной и высоколизиновой кукурузы (линии W 155; %1 9; А 204;

W 64А).

Пример 1. К 2,5 r муки кукурузы линий А 204+/+ и А 204о2/о2 прибавляют

10 мл воды, выдерживают 60 мин. при 4 С, центрифугиф ют 20 мин при 3000 об/мин, фильтруют, раствор белковой фракции помещают в 0,1 см кювету и получают спектр кругового дихроизма в области

205 — 240 нм.

Результаты определения соотношения оптических плотностей линий кукурузы приведен ы в та бл и це.

Приведенные в таблице результаты свидетельствуют, что для опаковой формы наиболее существенные отличия наблюдаются в возрастании оптической плотности при

221 †2 нм по сравнению с оптической плотностью при 208 †2 нм. Анализ с использованием значений оптической плотности ниже 208 нм не дает достоверных различий между исходной и опаковой формами кукурузы, а при определении опти1479028

Формула изобретения

А 204 +/+

А 204о2/о2

ОО+0,0447

ЯО+0,239

+0,341

13+0,323

5+0,5 7

7+0,451

5+3,660

О+0,540 и+О,ОчО

19,37+0

7,43+0, 6,47+0., 3,95+0, — з 7+Оэ

1, 92+0, 0,67+0, 0,24+0, 0,12+0, пА;;,; пА;.Ã ë . пАьо; пА,, пА;, .

/,.

21

/лА,,, пА-,„.

I пА "!г, 736

723

633

451

259

166

043

017

17, 1), 13, 10, 7,1

- о

1,7

Q 2 лА, пА р, лА„., ьА,, ПА.,, АА;: ° лА, .„

hA пЛ „.

3 ческой плотности выше 230 нм приходится анализировать незначительные изменения определяемых величин, что снижает достоверность оценки.

Пример 2, К 2,5 г муки кукурузы линии

W 155+/+ и W 155o2/о2 прибавляют

10 мл воды, выдерживают 15 мин при 5 С, центрифугируют 20 мин при 3000 об/мин, фильтруют, раствор белковой фракции ломещают в 0,1 см кювету, получают спектр кругового дихроизма в области 205 — 240 нм и определяют отношение оптических плотностей при 223 и 210 нм. . W 155+/+ W 155о2/о2

3,38 1-1,400 12,47 1-0,871

Пример 3. К 2,5 г муки кукурузы линии

W 64А+/+ и W 64Ао2/о2 прибавляют

10 мл воды, выдерживают 30 мин при 0 С, центрифугируют 20 мин при 3000 об/мин, фильтруют, раствор белковой фракции помещают в 0,1 см кювету, получают спектр кругового дихроизма в области 205 — 240 нм и определяют отношение оптических плотностей при 222 и 208 нм.

W 64А+ /+ . W 64Ао2 j о2

6,7! 0,273 13,55 + 0,497

Пример 4. К 2,5 г муки кукурузы линии

Wf 9+/+ и Wf 9о2/о2 прибавляют

10 мл воды, выдерживают 45 мин при 25 С, центрифугируют 20 мин при 3000 об/мин, Соотношение оптических плотностей фильтруют, раствор белковой фракции помещают в 0,1 см кювету, получают спектр кругового дихроизма в области 205 — 240 нм и определяют отношение оптических плотностей при 221 и 208 нм.

Wf 9+/+ Wf 9о2/о2

11,15 1-0,609 13,81 w -00,362

Использование предлагаемого способа в сравнении с известным позволяет ускорить и упростить способ, так как выявление опаковой формы проводят сразу после выделения белковой фракции без предварительной подготовки образца.

Способ выделения опаковой формы кукурузы, включающий получение из образца размолотого зерна водорастворимой белковой фракции, ее анализ и выявление опаковой формы по результатам анализа, отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения процесса выделения, анализ осуществляют путем получения спектра кругового дихроизма и измерения оптической плотности в области 205 — 240 нм, а опаковую форму выявляют по возрастанию отношения оптической плотности при

221 — 230 нм к оптической плотности при

208 — 215 нм.

1479028,7.7 7

«

< о<тввит<,и, I:

> I> <. t !< >Ii

"рс 1. I! Вв» ! < ррвв > <, > ир<>»< >

II

t ti ff < t«><

« > tI « ><> р < ° «,< (, <5 р, в "", kill «,; I<>IItfSf .II;t t«<-, <в:, >1

< -р,д 3 (>, «. и.><»> < !и<.шы . .;» и >jlifi> I (>! !! !! !! I I I <>нули рс < нвl(II<) f в».: и .

I >()3>..Ч > ви, I iI><>IIIIâ<>ëñTâ<. íí<>-ив . «<> г.и1< ии f <>

Л,ьм

УЯ7