Способ определения амедина

 

Изобретение касается аналитической химии, в частности определения амедина в фармацевтических препаратах и лекарственных формах. Для повышения точности и чувствительности анализа исходную пробу в водном растворе обрабатывают кислотным фиолетовым антрахиноновым красителем при PH 2-5 с последующей экстракцией хлороформом, обработкой экстракта водным раствором щелочи и фотометрированием водного слоя.Эти условия позволяют снизить открываемый минимум амедина с 3400 до 7,3 мкг при относительной ошибке ±2 против ±2,54%. 5 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ.

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИИ

ÄÄSUÄÄ 1483343 А1 (5946 1 N 21 78

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCKOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4274378/28-04 (22) 01.07.87 (46) 30.05.89. Бюл. У 20 (71) Каунасский медицинский институт (72) П.В. Вайн ауск ас (53) 543.432 (088.8) (56) ФС 42-946-75.

Лурье И.И. Справочник по аналитической химии. N. Химия, 1 971, с. 23.

l (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ А1 1ЕДИНА (57) Изобретение касается аналитической химии, в частности определения

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения амедина"2-диметиламиноэтилового эфира APHHJI» циклогексилгликолевой кислоты гидрохлорида — э кстр акционно-фотометрическим методом, и может быть применено в фармацевтическом анализе для количественного определения препарата в субстанции. и лекарственных формах.

Целью изобретения является повышение точности и чувствительности определения и раслирение области применения способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Пример 1. Определение амедина в субстанции, В делительную воронку вносят 1 мл водного раствора амедина (0,024

0,12 мг в пробе), прибавляют 7 мл универсальной буферной смеси с рН

2 амедина в фармацевтических препаратах и лекарственных формах. Для повьппения точности и чувствительности анализа исходную пробу в водном растворе обрабатывают кислотным фиолетовым антрахиноновым красителем прн рН 2-5 с последукщей экстракцией хлороформом, обработкой экстракта водным раствором щелочи и фотометрированием водного слоя. Эти условия позволяют снизить открываежй минимум амедина с 3400 до 7,3 мкг при относительной ощибке «02 против 2,54%.

5 табл.

4,0, 2 мл 0,04Х-ного водного раство- С ра реагента и 10 мп хлороформа.

Смесь взбалтывают в течение 3 мин, затем оставляют для разделения фаз на 10 мин. После разделения фаз хлороформный слой переносят в делитель- 4 ную воронку, содержащую 12 мл 0 1 н. 00 раствора гидроксида натрия, и встря- { ф хивают 10-15 с. После отстаивания фаз ф отделяют окраиенный щелочной раствор. фп

Оптическую плотность окращенного раствора измеряйт с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 (светофильтр при

590+10 нм, кювета 20 мм). В качестве раствора сравнения берут

О, 1 н.раствор, гидроксида натрия.

Построение калибровочного графика.

В делительные воронки вносят по

0,2; 0,4; 0,6; 0,8 и 1,0 мл стандартного раствора амедина, в 1 мл которого содержится 0 12 мг препарата. За1483343 тем во все делительные воронки прибавляют раствор УБС (рН 4,0) до 8 мл, по 2 мл 0,04 -ного раствора реагента и по 10 мл хлороформа и поступают, как указано выше. Используя полученные значения оптической плотности (табл.1, строят калибровочный график.

Подчиняемость закону Бугера-Ламберта-Бера наблюдается в пределах концентраций амедина 0,024-0,12 мг/мл. l0

Используя калибровочный график, определяют количество анализируемого препарата. Этот метод можно применять для количественного определения амедина как в субстанции, так и в таблетах.

Пример 2. Количественное определение амедина в таблетах по

0,003.

Одну таблету взвешивают (точная навеска) и измельчают. Берут около

0,05 (точная :навеска) измельченной таблеточной массы, помещают в мерную колбу емкостью 100 мл, растворяют и доводят до метки раствором УБС (рН 4).

В делительную воронку вносят 8 мл раствора анализируемого препарата и

2 мл 0,04%-ного раствора реагента.

Далее поступают аналогично примеру 1.

Расчет концентрации амедина в таблетах можно производить не только по калибровочному графику, но и по формуле

D 0 000) 2 p.. 11р 100

С,, = — - — — — —.-Я вЂ” - — —, D) - 1„ а ° Ojn03

55 1 — объем исследуемого раствок ра, взятый на анализ;

0,003- количество амедина в исследуемой таблете. где D — оптическая плотность анали40 зируемого раствора;

D — оптическая плотность станс.т дартного раствора амедина (1) = 0,83 при содержании 0,12 мг/мл амедина);

0,00012 — содержание амедина в 1 мл стандартного раствора; точная навеска исследуемой таблеты амедина; а — точная навеска измельченной масси таблеты амедина, взятая на анализ;

)? — объем в котором растворена

Г взятая на анализ навеска таблеты амедина;

Даяние о выборе оптимальных условий количественного определения амедина представлены в табл.2 и 3.

Из результатов, приведенных в табл. 2, следует, что ионный ассоциат амедина и реагента в наибольших количествах экстрагируется хлороформом при рН 2-5. В дальнейших исследованиях использовали раствор универсальной буферной смеси с рН 4.

Из данных, приведенных в табл.3, следует, что для полного образования ионного ассоциата между амедином и реагентом, необходимо прибавить 1,82,5 мл 0,04 -ного раствора кислотного фиолетового антрахинонового красителя, В дальнейших исследованиях прибавляли по 2 мл раствора указанного реагента.

Для достижения оптимальных условий количественного определения амедина, основанного на взаимодействиипрепарата с кислотным фиолетовым антрахиноновым красителем, необходимо брать 1-2 мл раствора амедина, содержащего в этом объеме 0,024—

0,12 мг этого препарата, 6-7 мп растнора универсальной буферной смеси с рН 4, 2 мл 0,04 .-ного раствора реагента и 10 мп хлороформа.

Пример 3. Определение амедина в биологическом материале.

К 100 r мелкоизмельченной печени трупа было добавлено 10 мг амедина и оставлено на сутки при периодическом перемешивании. Исследуемый препарат из печени трехкратно изолируют смесью воды и этанола (1:1), подкисленной до рН 2,0 10 -ным раствором серной кислоты. Объединенные вытяжки фильтруют через 4-5 слои обеззоленных бумажных фильтров под вакуумом, отгоняют этанол. Амедин из вытяжек экстрагируют хлороформом из щелочной среды (рН 9,0-11,0). Сухие остатки вытяжек после отгонки хлороформа растворяют в 40-100 мп универсальной буферной смеси (рН 4,0). Для количественного определения берут 1-2 мл этого раствора и далее поступают, как в примере 1. После определения оптической плотности количество выделенного амедина из биологического .материала рассчитывают по калибровочному графику.

В табл.4 приведены результаты определения при использовании различных щелочей.

Таблица1

Зависимость оптической плотности окрашенных растворов от количества амедина

Оптическая плотность мл мг

0,15 Ов!8 О,IS 0,17

0,33 0,34 0,34 0,34

0,49 0,51 0,51 0,50

0 66 0 67 0 68 0 67

0 82 0 84 0 84 0 83

0,024

0,048

0,072

0,096

0,12

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

Т аблиц а2

Зависимость величины оптической плотности от рН универсальной буферной смеси (УБС) Р (среднее из рР

Взято амедина

Взято

0,04%-ного раствора реагента, мл

УБС трех определений) мг

0,12

0,12

0,12

0,12

0,12

1,0

1,0

1,0

1,0

1,0

0,83

0,83

0,83

0,82

0,72

5 148

Сравнительная оценка количественного определения амедина в субстанции известным и предлагаемым способами и результаты количественного определения амедина в таблетах предлагаемым способом приведены в табл.5.

Таким образом, предлагаемый способ более чувствителен, чем известный (открываемый минимум его 7,3 мкг в пробе, тогда как открываемый минимум известного способа определения амедина в субстанции 3400 мкг).

Предлагаемый способ характеризуется более высокой точностью, чем известный. Относительная ошибка определения амедина в субстанции в таблетах не превышает 2, в то время как относительная ошибка определения амедина в субстанции изестным методом составляет -?,54%.

Предлагаемым способом можно определять амедин не только в субстанции

3343 6 (как известным способом), но и в таблетах и объектах биологического про исхождения.

Формула изобретения

Способ определения .амедина путем растворения анализируемого вещества с последующим измерением его содержания, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, чувствительности определения и расширения области применения способа, растворение проводят в воде, водный раствор обрабатывают кислотным фиолетовым антрахиноновым красителем при рН 2-5, экстрагируют хлороформом, экстракт обрабатывают водным раствором щелочи и измерение содержания анализируемого вещества осуществляют .фотометрированием водного слоя.

1483343

Таблиц a3

Зависимость величины оптической плотности от объема 0,04 -ного раствора реагента

D (среднее из рН

УБС

Взято амедина мг трех определений) 1,0 0,12

1,0 0,12

1,0 0,12

1,0 0,12

1,0 0,12

1,0 0,12

Таб лиц а4

Колич естОптическая плотность при обработке 0,1 н. растворами во амедина мг

КОН

Na0H

Таблица5

Предлагаемый способ

Известный способ

Найде- Иетрологичесно, % кие характеристики

Найдено, %

Иетрологические характеНавеска, г

Навеска; г ристики

Лмедин в субстанции

0,01 99,75 х=100,04

0 01 101,20 S=l 21

О, 01 101, 20 Sg =0, 54

Ою01 98э31 о,щ =1 э50

0 01 99 75 A и =«1 50

Амедин в таблетах по 0,003

Точную навеску амедина (0,01 г) при определении его в субстанции предлагаемым способом растворяют в, 100 мл воды, для анализа беру

1 мл полученного раствора.

0,3

0,3

0,3

0,3

0,3

97,73

97,73

101,10

99,93

102,27

0,12

0,12

0,12

0,12

0,12

x=99,75

8=2,02

S =-0,91 „, =2,53

A н =т2,54

4

4

4.

0,83

0,82

0,83

0,84

0,83

0,05

0 05

0,05

0,05

0,05

Взято 0,04%ного раствора реагента, мл

1,0

1,5

1,8

2,0

2,2

2,5

0,83

0,82

0,83

0,84

0,83

97,50

99,37

101,20

97,50

99,37

0,78

0,81

0,83

0,83

0,83

0,83 х=98,99

8=1,55

Ьт = 0,70

=1,94