Способ исследования взаимодействия лейкоцитов и тромбоцитов

 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в гематологии. Целью изобретения является упрощение и повышение специфичности способа исследования взаимодействия лейкоцитов и тромбоцитов. Способ заключается в определении времени образования клеточных агрегатов путем индукции взаимодействия лейкоцитов и тромбоцитов (в образцах нативной плазмы) гемолизатом эритроцитов в последовательно увеличивающихся разведениях.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51) 4 G 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМ У СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4249537/28-14 (22) 25. 05. 87 (46) 07.08. 89. Бюл. 11 29 (71) Новосибирский медицинский институт (72) Б.О.Архипов, В.И.Субач, Л.З,Баркаган и В.M.Êó÷åðñêèé (53) 615. 475 (088. 8) (56) J. Blood, 1986, v. 67, 113, рр.629-636. (54) СПОСОБ ИССЛЕДОВАНИЯ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ И ТРОМБОЦИТОВ

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в гематологии.

Целью изобретения является упрощение способа и повышение его специфичности.

Способ осуществляют следующим об- разом.

Богатую лейкоцитами и тромбоцитами плаэму получают из стабилизированной 3,8Х-ным раствором цитрата натрия венозной крови путем отстаивания в течение 30 мин при комнатной температуре.

Плазму отделяют от эритроцитов и разливают в две центрифужные пробирки, одну из которых центрифугируют в течение 1 мин при 380 g для осаждения лейкоцитов. Белейкоцитарный надосадок богатый тромбоцитами переносят в отдельную пробирку. Эритроциты, оставшиеся после отстаивания крови, трижды отмывают 0,857-ным раствором хлорида натрия, полученную таким образом суспенэию отмытых эрит„„Я0„„1499234 А 1 (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано в гематологии. Целью изобретения является упрощение и повышение специфичности способа исследования взаимодействия лейкоцитов и тромбоцитов. Способ заключается в определении времени образования клеточных агрегатов путем индукции взаимодействия лейкоцитов и тромбоцитов (в образцах нативной плазмы) гемолиэатом эритроцитов в последовательно увеличивающихся разведениях. роцитов в количестве 0,1 мл гемолизируют в пробирке, содержащей 1 мп дистиллированной воды (маточное разведение, обозначаемое как 10 ), Затем из маточного разведения, используя 0,857.-ный раствор хлорида натрия, готовят рабочие разведения:

10,- 10, 10 и т.д. Готовят две центрифужные пробирки: в одну из них наливают 0,2 мп плазмы, содержащей только тромбоциты без лейкоцитов (контроль), в другую — 0,2 мл -плазмы, богатой лейкоцитами и тромбоцитами (опыт).

Пробирку с опытным обраэцом плазмы (с лейкоцитами) и пробирку с гемолизатом в разведении 10 прогревают в микротермостате при 37 С в течение 1 мин. Затем 0,05 мл гемолизата добавляют в пробирку с исследуемой плазмой и тотчас включают секундомер. Определяют время появления первых видимых глазом в проходящем свете клеточных агрегатов (в ниде мелких 1крошек") . Повторяют исследо1499234

3 ванне с контрольным образцом плазмы (без лейкоцитов) и тем же разведением гемолизата. Лналогично проводят исследовайия с другими разведениями гемолизата эритроцитов (ГЭ). Обычно

5 используют два разведения: 10 и 10, исследования с промежуточными разведениями в целях экономии плазмы можно не проводить. По полученным результатам определяют разницу во времени агрегацпи ЛВЛ в опытном (с лейкоцитами) и контрольном (без лейкоцитов) образцах ппазмы, которая характеризует cTcflpIII> взаимодействия лейкоцитов и тромбоцитов.

Пример, Больная М.Л. 52 лет, страдлоцая хроническим миелглейкозом, Клинические проявления тромбогеморрагпческого характера отсутствуют. 20

Показатели коагуляционного гемостаза без каких-либо отклонений от нормы.

Агрегация. тромбоцитов (14 и 16 с на разведениях 10 и 10 " соответствепно) также в пределах нормы. Одна- 25 ко исследование вэаимодействия лейкоцитов с трс мбоцитами выявило выраженную активацию этого процесса: йВА

4 составил 4,5 и 28 с на разведениях

ГЭ 10 и 10 соответственно (время смешанноклеточной лейкоцитарно-тромбоцитарной агрегации составило на разведении ГЭ 10 9,5 с и 10 18 с при норме 11,0+О,б с и 39,0 1,7 с соответственно) . Таким образом, была выявлена повышенная степень тромбогенного риска (предтромботическое состояние) и с профилактической целью больной были .назначены дезагреганты.

Формул а из о бр е т ения

Способ исследования вз аимодействия лейкоцитов и тромбоцитов путем определения времени образования клеточных агрегатов после добавления индукторов агрегации, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения специфичности и упрошения способа, в качестве индуктор а вз аимодей— ствия лейкоцитов и тромбоцитов используют гемолизат эритроцитов в последовательно увеличиваюцихся разведениях а исследование проводят в образцах нативной ппазмы, Сост.авитель А. Чирков

Техред И, Ходанич

Корректор М.Максимишинец

Редактор И.Горная

Заказ 4684/42 Тираж 789 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

1!3035, Москва, Ж35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101