Способ получения биомассы дрожжей candido тrорiсаlis к-1

 

Изобретение относится к общей и промышленной микробиологии. Цель изобретения - увеличение выхода биомассы дрожжей и упрощение процесса. Способ заключается в том, что в качестве стимулятора роста добавляют в питательную среду коммерческий препарат РНКазу BACILLUS INTERMEDIUS 7Р в концентрации 1<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-5</SP>-1<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-7</SP> мг белка/мл питательной среды. 4 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЯ4АЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

КН,РО, 0,1

К НРО 0,13

Сахароза 20,0

Лиофилизированный дрожжевой ° экстракт 0,2

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21 ) 4320515/31-13 (22 ) 26.10.87 (46) 15. 09. 89. Бюл. М - 34 (71) Казанский государственный университет им,В.И.Ульянова-Ленина (72) С.Ю.Егоров, С.А.Калина, А.И.Колпаков, Ф.Г.Куприянова, И.Б.Лещинская и Л.Г.Мусина (53) 663. 14 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

Р 271470, кл. С 12 N 1/00, 1969.

Авторское свидетельство СССР

11 704173, кл. С (2 N 1/00, 1978.

Изобретение относится к способам культивирования дрожжей и может быть применено в различных областях микробиологической промьппленности, Цель изобретения — повьппение выхода биомассы дрожжей и упрощение процесса.

Способ заключается в том, что в качестве стимулятора роста используют бактериальную РНКазу в низких концентрациях 1 ° 10 -(IO мг белка/мл питательной среды. Рибонуклеаза — фермент, секретируемый споровыми бактериями Вас1(.lus intermedius 7 P..

H p и м е р 1. Суточную культуру С.tropicalis К 1 смывают с поверхности агари"ованной среды и ñóñпендируют в полусинтетической питательной среде Ридер следующего состава, г/л . (ИН ) SO 3 О

МКБ04 0%34

NaCl 5,0

CaN0 4H„0 0,575

„„SU„„1507788 А 1 (51)4 С 12 N 1/16//(C 12 N 1/16, С 12 R 1:72) 2 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЬ1 ДРОЖЖЕЙ CANDIDA ТЕОР?СА?,ХБ К-1 (57) Изобретение относится к об- . щей и промьппленной микробиологии.

Цель изобретения — увеличение выхода биомассы дрожжей и упрощение процесса.

Способ заключается в том, что в качестве стимулятора роста добавляют в питательную среду коммерческий препарат РНКазу Bacillus intermedius

7 Р в концентрации 1 ° 10 -1 -10 мг белка/мл питательной среды. 4 табл.

Полученную суспензию культивируют при 30 С в стационарных условиях до достижения лагфазы роста. Затем клетки отделяют центрифугированием и вно» сят в колбы Эрленмейера емкостью

100 мл, содержащие по 10 мп свежей питательной среды. При этом конечная концентрация клеток составляет 20 млн/мл. РНКазу В,intermedius в концентрациях (1 10 - 1 .10 мг/мл с разницей на порядок) вносят одновременно с инокулятом. B качестве контроля используют клетки, инкубированные в среде, не содержащей фермента.

О приросте биомассы судят по увеличению количества клеток за период

3-часовой инкубации при 30 С в вибро3 150778 терме. Количество клеток определяют путем подсчета в камере Горяева.

Результаты экспериментов представлены в табл, 1.

Пример 2. Процесс ведут аналогично примеру 1, но используют клетки экспаненциальной фазы роста,, Результаты экспериментов представлены в табл. 2.. 10

Пример 3. Процесс ведут ана— логично примеру 1, но используют клетки фазы замедления роста культуры.

Результаты экспериментов представлены в табл. 3. l5

Пример 4. Процесс ведут аналогично примеру 1, но используют клетки стационарной фазы роста культуры. Результаты экспериментов представлены в табл.4.

Таким образом, добавление бактериальной РНКазы в питательную среду в концентрации 1 10 — 1 10 мг/мл способствует увеличению количества клеток С.tropicalis на 30-407. по сравнению с контролем и в 1,5-2,2 раза по сравнению с прототипом, В результате добавления в питательную среду бактериальной рибонуклеазы обеспечиваются следующие преиму30 щества предлагаемого способа: РНКаза

В.Intermedius, используемая в качестве стимулирующей добавки к питательной среде, является дешевым и доступным препаратом микробной природы; 35 стимулирующий эффект проявляется независимо от фазы роста посевной культуры.

Формула и з о р е т е н и я

Способ получения .биомассы дрожжей 4о

Candida tropicalis К-1, предусматривающий культивирование их на питательной среде, содержащей источники угле- рода, азота, фосфора, минеральные соли и ферментный препарат в качестве 45 стимулятора роста, с последующим выделением целового продукта„ о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода биомассы и упрощения процесса, из ферментных препаратов используют РНКаэу, секретируемую бактериями Bacillus intermedius 7Р в концентрации 1 10 — 1 10 мг белка/мл питательной среды.

Таблица1

Влияние РНКазы В.Intermedius на размножение дрожжей С.tropicalis npu использовании посевной культуры лагЙазы роста

Таблица 2

Влияние РНКазы В.intermedius, 7Р на. размножение дрожжей С.tropicalis npu использовании посевной культуры экспоненциальной фазы роста

Концентрация Количество кле- Стимуляфермента ток млн/мп ция % мг/мл

Таблиц а 3

Влияние РНКазы В. intermedius

7Р на размножение дрожжей С, tropicalis при использовании посевной культуры фазы замедления роста

Концентрация Количество кле- Стимуляфермента ток,млн/мл ция, Ж

Контроль

1 10

1.10

1 10

1 ° 10

Контроль

1 10

1 10

1 10

1 -10

Контроль

1 10-4

1 -10

1.10

1 -10

28, 3+О, 9

291 2+0> 6

31, 1+О, 7

37, О+О, 5

32, 4+О, 7

46,7+1,3

55, 110,9

65, О+1,6

67, 1+2,3

58,0+1,9

42,9 1,8 49,4+2) 1

55,8+3,4

56,3+2,9

54,5+2,2

3,2

9,8

30,7

14,4

17,9

24, 1

43,6

24, 1

15,1

30,0

31,2

27,0

1507788

Таблица 4

Влияние РНКазы В,Intermedius 7Р на размножение С.Tropicalis при использовании посевной культуры стационарной фазы роста

Концентрация Количество кле Стимуляфермента, ток, ция, 7 мг/мл млн/мл

Составитель В.Голимбет

Техред М.Моргентал Корректор Л.Бескид

Редактор Л.Пчолинская

Заказ 5516/29

Тираж 501

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям прн ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãîðîä, ул. Гагарина, 101

Контроль

1.10 4

1 10

1 10

1 10

42,2+2,1

47,4+1, 9

56,8+2,6

56,6+2,0

47,5+2,1

12,3

34,5

34,1

12,5