Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и неспецифических заболеваний легких

 

Изобретение относится к медицине, в частности к фтизиатрии и пульмонологии. Цель изобретения - повышение точности способа. Для этого у больного натощак берут 2 мл венозной крови, отделяют сыворотку и определяют в ней общую антипротеолитическую активность (ОАА). Затем вводят больному 20-50 ЕД туберкулина и через 48-72 ч повторно определяют ОАА. Для определения ОАА к 0,2 мл разбавленной в 100 раз сыворотки добавляют 12,5 мкг трипсина в 0,2 мл раствора, инкубируют 15 мин при 20°С и доводят объем пробы до 1 мл буфером. Добавляют 1 мл 2% раствора казеина и инкубируют 20 мин при 35°С. Реакцию останавливают добавлением 3 мл 5% трихлоруксусной кислоты (ТХУ). Контрольная проба отличается от опытной только тем, что ТХУ добавляют раньше казеина. Пробы центрифугируют 30 мин при 3000 об/мин и определяют оптическую плотность супернатанта опытной пробы против контрольной при 280 нм. С помощью калибровочной прямой находят количество трипсина, связываемого сывороточными ингибиторами. Определяют разницу ОАА до и после туберкулиновой пробы и при ее величине 0,21 7/л и более диагностируют туберкулез, а при величине разности 0,20 г/л и менее - неспецифические заболевания легких (НЗЛ). Изобретение позволяет в 100% случаев проводить дифференциальную диагностику туберкулеза и НЗЛ. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (Н) (51)5 G 01 N33/68

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4249701/28-14 (22) 25.05,87 (46) 23,01.90.Áþë. 1"- 3 (71) Киевский государственный медицинский институт им.нкад.А.А.Богомольцаа (72) P,Ã,Ïðîöþê и В.Н.Пилипчук (53) 616. 07 (088. 8) (56) Гудь М.В. Клиническое значение недостаточности альфа-1-антитрипсина при туберкулезе и нетуберкулезных заболеваниях. — Автореф.дис.канд.мед. наук. Киев, 1983, с.1-22. (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА И НЕСПЕЦИФИЧЕСКИХ

ЗАБОЛЕВАНИЙ ЛЕГКИХ (57) Изобретение относится к медици" не, в частности к фтизиатрии и пульмонологии.. Цель изобретения — повышение точности способа, Для этого у больного натощак берут 2 мл венозной крови, отделяют сыворотку и определяют в ней общую антипротеолитическую активность (ОАА), Затем вводят больному 20-50 ЕД туберкулина и через 4872 ч повторно определяют ОАА. Для

Изобретение относится к медицине, в частности фтизиатрии и пульмонологни, и может быть использовано при дифференциальной диагност) ке туберкулеза и неспецифических заболеваний легких (НЗЛ)

Цель изобретения — повышение точности и дифференциальной диагностики туберкулеза и НЗЛ.

2 определения OAA к 0,2 мл разбавленной в 100 раз сыворотки добавляют

12 5 мкг трипсина в 0,2 мл раствора, инкубируют 15 мин при 20 С и доводят объем пробы до 1 мп буфером. Добавляют 1 мл 2%-ного раствора казеина и инкубируют 20 мин при 35 С. Реакцию останавливают добавлением 3 мл 5%-ной трихлоруксусной кислоты (ТХУ). Контрольная проба отличается от опытной только тем, что ТХУ добавляют раньше казеина, Пробы центрифугируют 30 мин при 3000 об/мин и определяют оптическую плотность супернатанта опытной пробы против контрольной при 280 нм, С помощью калибровочной прямой находят количество трипсина, связываемого

9 сывороточными ингибиторами, Определяют разницу ОАА до и после туберкулиповой пробы и при ее величине

0,21 г/л и более диагностируют туберкулез, а при величине разности

0,20 г/л и менее — неспецифические заболевания легких (НЗЛ). Изобретение позволяет в 100% случаев проводить дифференциальную диагностику туберкулеза и НЗЛ. 1 табл.

Способ осуществляют следующим образом, У больного утром натощак из локтевой вены берут 2 мл крови и выливают в пробирку, где кровь отстаивают для получения сыворотки, Затем к

0,2 мл разбавленной в 100 раз сыв ротки крови добавляют 0,2 мл трипснна (12,5 мкг) в количестве, прс пн я1538127 ющем антипротеолитическую активность сыворотки крови. Реакционную смесь выдерживают 15 мин при 20 С для образования комплекса фермент - ингибитор. Объем пробы доводят до 1 мл

5 мединаловым буфером. Затеи к смеси добавляют 1 мл 2Х-ного раствора о казеина и инкубируют 20 мии при 35 С.

Реакцию останавливают добавлением

3 мл 5Х-ного раствора трихлоруксус-: ной кислоты (ТХУ), Параллельно проводят контроь.ьную пробу, которая отличается от опытной тем, что ТХУ вносят перед добавлением казеина., В про- 15 зрачной надосадочной жидкости, полученной после центрифугирования проб при 3000 об/мин в течение 30 мин, определяют оптическую плотность опыт ной пробы против контрольной при 20

280 нм. Количество оставшегося фермента рассчитывают по калибровочной кривой, составленной по кристаллическрму трипсину. Количество связан"-ного сывороточными ингибиторами трип- 25 сйна определяют по разнице между количеством добавленного фермента и фермента, оставшегося после инкуба-:ции с сывороткой. Антнпротеолитическую активность выражают в миллиграм=. иах инактивированного фермента в

1 мл сыворотки. После этого больному подкожно у нижнего угла лопатки вводят 1-2,5 мл раствора, содержащего

20-50 ед туберкулина РРД, Через. 48-72 ч повторно утром натощак из локтевой ве. л берут 2 мл кро-. ви и определяют общую антипротеолиt тическую активность сыворотки крови.

Рассчитывают разность величин общей антипротеолитической активности сыворотки крови до и после введения туберкулина Й . при значении ее

0,20 г/л и ниже диагностируют пневмонию, а при значении от 0,21 r/ë и более — туберкулез легких»

Пример 1. Больной К., 38 лет, поступил в клинику с подозрением на наличие туберкулеза легких, БК(-).

При поступлении: жалобы на кашель с выделением около 50 мл мокроты в сутки. Общий анализ крови: лейкоциты 5,7 ° 10 /л, эозинофильные грануло9 циты 1, палочкоядерные нейтрофильные гранулоциты 3, сегментоядерные

55 нейтрофильные гранулоциты 53, моноциты 13, лимфоциты 31, СОЭ 18 мм/ч, Общий анализ мочи без особенностей.

Анализ мокроты БК-.. Реакция Манту с 2 туберкулиновыми единицами (ТЕ)).

РРД-папула диаметром б мм. Рентгенологически в верхней доле правого легкого определяется гомогенная тень без четких контуров Зх5 см.

Общая антипротеолитическая активность сыворотки крови,цо введения туберкулина равнялась 2,25 г/л, а после подкожного введения 20 ТЕ РРД

2,68 г/л. Разница составляет 0,43 г/л.

Диагноз туберкулеза легких в дальнейшем был подтвержден эффективностью проводимого противотуберкулезного лечения.

Пример 2. Больной А., 40 лет, поступил в клинику с подозрением на наличие туберкулеза легких, БК(-), )

При поступлении: жалобы на кашель ,с выделением до 40 мл мокроты в сутки.

Общий анализ крови: лейкоциты 5,8 " 10 /л, эозинофильные гранулоциты 2, сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты 51, палочкоядерные нейтрофильные гранулоциты 4, лимфоциты 28, моноциты 11, СОЭ 18 мм/ч, Общий анализ мочи без особенностей. Анализ мокроты БК-. Реакция Манту с 2 TE-папула диаметром 1О мм, Рентгенологи-. чески в верхней доле левого легкого определяется гомогенное затемнение без четких контуров 4хб см, Общая антипротеолитическая активность сыворотки крови до введения туберкулина равнялась 1,12 г/л, после подкожного введения 20 ТЕ РРД 1,15 г/л. Разница составила 0,03 г/л.

Диагноз пневмонии в дальнейшем был подтвержден эффективностью проведения неслецифического антибактериального лечения.

Пример 3. Больной А,, 40 лет, Поступил с подозрением на наличие туберкулеза легких, БК (-).

Разница величин общей антипротеолитической активности сыворотки крови до и после подкожного введения

20 ТЕ РРД 0,20 г/л.

Диагноз пневмонии в последующем был подтвержден эффективностью проведения неспецифического антибактериального лечения, Пример 4. Больной П., 29 лет, Поступил с подозрением на наличие туберкулеза, легких, БК (-).

Разница величин общей антипротеолитической активности сыворотки крови до и после подкожного введения 20 ТЕ РРД 0,21 г/л, 5 15

Диагноз туберкулеза легких в дальнейшем был подтвержден эффективностью проведения противотуберкулезного лечения, Пример 5, Больной Б., 55 лет, поступил с подозрением на туберкулез легких, БК (-).

При поступлении жалобы на слабость, сухой кашель, Общий анализ крови: лейкоциты 5,8 10 /л, эозинофильные гранулоциты 2, палочкоядерные нейтрофильные гранулоциты 4, сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты

52, моноциты 11 лимфоциты 31, СОЭ .

21 мм/ч. Общий анализ мочи без осо" бенностей, Анализ мокроты: микобакте; рии туберкулеза и атипические клетки не обнаружены. Реакция Манту с 2

ТЕ РРД вЂ” папула диаметром 8 мм. Рентгенологически в верхней доле правого легкого определяется гомогенная тень без четких контуров 3,5х4,5 см, Общая антипротеолитическая активность сыворотки крови до введения туберкулина равнялась 2,41 г/л, после подкожного введения туберкулина 20 ТЕ

РРД 2,54 г/л. Разница полученных результатов 0,13 г/л. Поставлен диагноз — опухоль первого и второго сегментов правого легкого, Произведена резекция верхней доли правого легкого. Диагноз опухоли легкого подтвержден гистологически.

Пример 6. Больной С,, 63 лет, поступил в клинику с подозрением на туберкулез легких, БК (-).

При поступлении: жалобы на кашель с выделением мокроты до 15 мл в сутки, боли в левой половине грудной клетки. Общий анализ крови: лейкоци-, ты 6,6 10 /л, эозинофильные грануло9 циты 1, сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты 53, палочкоядерные нейтрофильные гранулоциты 5, лимфоциты 29, моноциты 12, СОЭ 22 мм/ч, Общий анализ мочи без особенностей, В мокроте микобактерии туберкулеза и атипические клетки не обнаружены. Реакция Манту с 2 ТЕ РРД вЂ” папула диаметром 11 мм, Рентгенологически в верхней доле левого легкого определяется гомогенное затемнение без четких контуров 4,5х6 см. Общая антипротеолитическая активность сыворотки крови.до введения туберкулина равнялась 2,27 г/л, после подкожного . введения 50 ТЕ РРД 2,38 г/л. Разница полученных результатов 0,11 г/л.

38127

Лечение неспецифическими антибиотиками в течение. двух недель не эффективно. Произведена пункция опухоле». видного образования левого легкого.

Диагноз опухоли легкого подтвержден .гистологически.

Показатели общей антипротеолитической активности: сыворотки крови больных туберкулезом и. НЗЛ до и после подкожного введения 20-50 ТЕ РРД (М+ш) приведены в таблице.

Показатель антипротеолитической активности сыворотки крови у больных туберкулезом и НЗЛ до введения туберкулина существенным образом не отличается. После подкожного введе20 ния туберкулина у больных туберкулезом и НЗЛ отмечается повышение показателей антипротеолитической активности сыворотки крови. Причем при туберкулезе зто повьппение более суще25 ственное, а разница (более 0,21 г/л) становится статистически достоверной (р (0,05).

У всех обследованных больных с

3р пневмонией и опухолями легких разница величин общей антипротеолитической активности сыворотки крови до и после подкожного введения туберкулина колебалась от 0,01 до 0,20 г/л, а у больных туберкулезом легких эта разница составила 0,21 г/л и более, Ложноположительных и ложноотрицательных результатов зарегистрировано не было, Таким образом, предлагаемый спо4р соб позволяет у всех больных в 1007 случаев проводить дифференциальную диагностику.

Формула и з о б р е т е н и я

Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и неспецифических заболеваний легких путем исследования антипротеолитической активности сыворотки крови больного, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью повьппения точности способа, определяют общую антипротеолитическую активность сыворотки крови до и после введения туберкулина, рассчитывают разницу, при ее значении 0,20 г/л и ниже диагностируют неспецифические заболевания легких, а при значении

0,21 г/л и выше — туберкулез легких, 1538127

Заболевание Кол-во больных

2,30030,065 2,553+0,065

2,296+0,044 2,386+0,053

32

Составитель А,Яхьяев

Редактор Н,Тупица Техред И„Ходаннч

Корректор Т.Палий

Заказ 161 Тираж 500 Подписное

BHHHIlH Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. й/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101

Туберкулез легких (НЗЛ

0АА до введения туберкулина, г/л

ОАА после подкожного введения туберкулина, г/л

Разница величин до .и после подкожного введения туберкулина,г/л

О, 253+0, 004 р (0,05

0,090=0 010 р >0,05