Способ получения пептидов

 

Изобретение относится к химии пептидов, в частности к получению пептидов, и может найти применение в пептидной химии. Цель - повышение выхода и упрощение процесса. Получение пептидов ведут реакцией N - защищенного производного аминокислоты - карбоксильной компоненты с производным другой аминокислоты или пептида (содержащим реакционноспособную N-концевую аминогруппу - аминокислотной компоненты) в присутствии цианурилхлорида (конденсирующий агент) и пиридина в среде этилацетата. Процесс ведут при молярном соотношении карбоксильный компонент: цианурилхлорид: аминокомпонент: органическое основание 3:1:3:3. Способ позволяет полностью избежать рацемизацию аминокислоты и сократить время проведения процесса. Выход 85-91%. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„Я0„„1544778 А 1 (51)5 С 07 К 1/08

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

М А ВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР (21) 4335277/31-04 (22) 26.10.87 (46) 23.02.90. Бюл. М 7 (71) Институт элементоорганических соединений им. А.Н.Несмеянова (72) Т.Н.Головина, Ю.А.Давидович и С.В.Рогожин (53) 547.964.407 (088..8) (56) Ventkataraman К., Wagle D R.

Cyanuric chloride: à useful reagent

for converting carboxylic acids into

chlorides esters, amides and peptides. — Tetrahedron Lett., 1979, Ф 32, р. 3037-3040. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕПТИДОВ (57) Изобретение относится к химии пептидов, в частности к получению пептидов, и может найти применение

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения пептидов, который может найти применение в пептидной химии.

Целью изобретения является упрощение процесса и повышение выхода.

Пример 1. Получение этилового эфира N-бензилоксикарбонилглицилглицина.

К раствору 1,04 г (5,0 ммоль)

N-бензилоксикарбонилглицина и 0,5 r (5,0 ммоль) пиридина в 20 мп этилацетата при перемешивании и (С прибавляют ло каплям раствор 0,31 г (1,66 ммоль) цианурилхлорида в 5 мл серноro эфира. После пятиминутной выдержки при 0 С в реакционную смесь в пептндной химии. Цель — повышение выхода и упрощение процесса. Получение пептидов ведут реакцией N-защищенного производного аминокислоты — карбоксильной компоненты с производным другой аминокислоты или пептида (содержащим реакционноспособную N-концевую аминогруппу) — аминокислотной компоненты в присутствии цианурилхлорида (конденсирующий агент) и пиридина в среде этилацетата. Процесс ведут при молярном соотношении карбоксильный компонент: цианурилхлорид:аминокомпонент:органическое основание = 3:1:3:3. Способ позволяет полностью избежать радемизацию аминокислоты и сократить время проведения процесса. Выход 85-91Х.

l табл. вносят 0,5 r (5,0 ммоль) триэтиламина и 0,69 г (5,0 ммоль) гидрохлорида этилового эфира глицина. Температуру реакционной смеси поднимают до 18-20 С и делают выдержку в течение 10 ч, затем разбавляют ацетатом,промывают водой. Органический слой сушат сульфатом натрия, растворитель удаляют. В остатке белое кристаллическое вещество — этиловый эфир N-бензилоксикарбонилглицилглицина, Вещество хроматографически гомо генно. R g О, 75 (хлороформ. метанол о

=9:1, силуфол:нингидрин: 100

10 мин).Выход 1,47 г (98X).

Вычислено, 7: С 57,14; Н 6,!6;

N 9,51

1544778

С 4Н Ч 0

Найдено, .: С 57, 34; kl 6, 01; Б 9,35

Пример 2. Получение метилового эфира N-бензилоксикарбонилаланилглицина.

К раствору 1, 0 r (4,48 ммоль)

КБЗ-аланина и 0,35 r (4,48 ммоль) пиридина в 15 мл этилацетата прибав- 1О ляют по каплям при перемешивании и

+5О С раствор 0,29 r (1,49 ммоль) цианурилхлорида в 5 мп этилацетата.

Через 5 мин в реакционную смесь вносят 0,62 г (4,93 ммоль) гидрохлори- 15 да метилового эфира глицина и 0,95 r (9,39 ммоль) триэтиламина. Температуру поднимают до комнатной (20 С).

Через 8 ч реакционную смесь перено— сят в делительную воронку, разбавля- 2р ют 30 мл этилацетата, промывают

20 мл дистиллированной воды, 10 мп

57-ного водного раствора бисульфата калия, насьпценным раствором бисульфа=а калия, насьппенным ра твором хло- 25 ристого натрия, сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляют, в результате получая целевой продукт в виде белого кристаллического вещества. Выход 1,19 г (85 ), т.пл. 97 С, 3р г I о сИ1 q> = — 17, 5 (с= l, хлороформ); R g

О, 50 (хлороформ: метанол =9: 1, силуфол: нингидрин 100 10 мин).

Вычислено, .: С 57,13; Н 6,16;

И 9,51

9 7

Найдено, .: С 57,45; Н 6,48;

N 9,51

Пример 3. Получение метилового эфира Г)-трет.-бутилоксикарбонил- 40 пропилметионина.

Реакцию проводят по методике примера 2. Целевой пептидный продукт получают в виде белого сристаллического вещества, т.пл. 95-97 С, выход 45

93 .: (d ) = — 18,0 (c=1, ДМФ); RР

О, 66 (хлороформ: метанол =9: l, силуфол: нингидрин: 100;10 мин) .

Вычислено, : С 53,32; Н 7,83;

7,77; S 8,88 5р

С1ь Н ьNg0zS

Найдено, .: С 53,45; Н 7,63;

N 7,85; S 8,65

Li р и м е р 4. Получение метилово го эфира N-трет, -бутилоксикарбонил- 55 лейцилгистидина.

Реакцию проводят по методике примера 2. Целевой продукт получают в виде слегка желтоватого кристаллического вещества, т.пл. 141-143 С. Выход 83 . о

° о1 (4 1 z = -24, 84 (c= ) метанол); R, 0,21 (хлороформ:метанол =9:1: силуфол. нингирдин: 100 > 10 мин).

Вычислено, %: С 56,67; Н 7,661

N 14,69

С п Н М О

Найдено, %: С 56, 75; Н 7, 35;

N 14,51

Пример 5. Получение метиловогс эфира N-бензилоксикарбонилфенилаланилглицина.

Реакцию проводят аналогично примеру 2 ° Продукт получают с количественным.выходом в виде бегого кристаллического вещества, т.пл. )18-119 С.

Rg 0,70 (хлороформ .метанол =9:1: силуфол:нингидрин: 100 ; 10 мин); и

= -71,43 (c=), метанол).

Вычислено, %: С 64,85; Н 5,98;

N 7,56

Найдено, .: С 64,68; Н 5,91;

N 7,74

Пример 6. Получение метилового эфира N-трет.-бутилоксикарбониллейцилглицина.

Реакцию проводят по методике примера 2. Пептидный продукт получают с выходом 92, т.пл. 133-134 C, Rg 0,50 (хлороформ: метанол =9: l, силуф л. нингидрин: )00 10 мин);(d j " = -34,6 (с=), метанол).

Вычислено, : С 55,61 Н 8,67;

N 9,26

С „Н „) .,О, Найдено, -.: С 55,53; Н 8,75;

N 9,13

Пример 7. Синтез пептидных продуктов (указаны в таблице) проводят по следующей общей методике.

К раствору 5,0ммоль соответствующей N-защищенной аминокислоты и

5,0 ммоль пиридина в 20 мл этилацетата прибавляют при перемешпвании и охлаждении до О С раствор 1,67 ммоль цианурилхлорида в 10 мл этилацетата.

После завершения прибавления реако ционную смесь перемешивают при О С еще 5 мин и затем добавляют 5,0 ммоль аминокомпонента. Протекание реакции аминолиза контролируют методом тонкослойпой хроматографии (по исчезновению на хроматограмме пятна аминокомпонента). Когда ТСХ-проба показывает исчерпание аминокомпонента (через ч), реакционную смесь переносят в делительную воронку и промыва1544778 ют водой для удаления гидрахлорида пиридина и циануровой кислоты, после чего промывают при необходимости

5Х-ным водным раствором бикарбоната натрия и/или биосульфата калия. Далее этилацетатный слой сушат и упаривают; последующее выделение и очистку продукта проводят обычными методами.

Удельно е оп тич есВыход, 70 кое врашение

Найденное Литературные данные

-20,0 -20,0 (с=1, МеОН) 85

BOG-Leu-OH Н-Tyr-OMe

BOG-Leu-TyrОМе

-20,9" -21,0 (с=1, MeOH) 91

Н-Ala-His-OMe

ВОС-Lys(Z)—

Ala-His-OMe

ВОС-Lys-OH

BOG-Ala-0Í

Н-Pro-Se r (ОВг I ) -Gly-OE t

-24, 1 -24, 2 (с=1, ДМФА) 90

ВОС-Ala-Pro-Ser(OBzI)-Gly-OEt

-26,5О (с=1, EtOH) 2 Va1 Gly OE t 92

Н-Gly OEt

Z Val ОН

Составитель В. Волкова

РедактоР M.ÄåÐáàê ТехРед А.Кравчук Корректор М. Кучерявая е

Заказ 469

Тираж 308 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101

Осуществление предлагаемого способа за счет сокращения расхода реагентов, использования вместо триэтиламина пиридина и в качестве растворителя — этилацетата позволяет увеличить вдвое выход целевого продукта, полностью избежать рацемиэации аминокислоты, используемой в качестве карбоксильной компоненты, сократить вре- 20 мл проведения процесса.

Карбоксильный Аминокомпонент Продукт компонент формула изобретения

Способ получения пептидов путем взаимодействия N-защищенного пооизводного одной аминокислоты — карбоксильной компоненты с производным другой аминокислоты или вептида, содержащим реакционно-способную N-концевую аминогруппу аминокислотной компоненты, в присутствии цианурилхлорида как конденсирующего агента и органичес- кого основания в среде органического растворителя, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повыпения выхода и упрощения процесса, взаимодействие проводят при молярном соотношении карбоксильный компонент: цианурилхлорид:аминокомпонент:органическое основание Э:1:3:Э, в качестве органического основания используют пиридин, а в качестве органического растворителя - этилацетат.