Способ получения сорбента для аффинной хроматографии

 

Изобретение относится к получению сорбентов на основе целлюлозы и может быть использовано в аффинной хроматографии. Изобретение позволяет повысить сорбционную емкость целевого продукта с 1,0 до 3,0-4,9 мг/г, что достигается обработкой 2-(3 1-амино-4-β-метоксифенил)сульфанилэтилового эфира целлюлозы, модифицированного глутаровым альдегидом до содержания альдегидных групп 0,10-0,16 мг-экв/г, 2-5%-ным раствором инсулина в карбонатном буфере при PH 9,5-10 и массовом соотношении 2-(3 1-амино-4-β-метоксифенил)сульфанилэтилового эфира целлюлозы и инсулина (2,2-3,0):(0,22-0,75). 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕ ГЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

flQ ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) .4439106/28-05 (22) 20.06.88 (46) 15.07.90, Бюл. 9 26 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт текстильно-галантерейной промышленности (72) 3.Н.Степанова, С.И.Гриценко, С.В.Стручак, В.В.Рыльцев, В.Н.филатов и P,Á,Âèðíèê (53) 661 ° 728.8 (088.8) (56) Власов Л.Г. и др, Иммуносорбент на основе иммобилизованного инсулина.

Тезисы докладов 7-ro Всесоюзного. симпозиума "Синтетические полимеры медицинского назначения". Минск:

Университетское, 1985, с. 17.

Изобретение относится к получению сорбентов на основе целлюлозы и мо-жет быть использовано в аффинной хроматографии.

Цель изобретения — повышение сорбционной емкости целевого продукта..

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. 15,1 г целлюлозы в виде медицинской марли ГОСТа 941277 обрабатывают 151 мл раствора 30,2 г

2-(3-амико-4 — Р-метоксифенил)сульфанилэтилового эфира в растворе углекислого натрия с концентрацией 200 г/л

ÄÄSU ÄÄ 1578137 А 1 (51) 5 С 08 В 15/00, В 01 J 20/24 20/30

2 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОРБЕНТА ДЛЯ

АФФИННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ (57) Изобретение относится к получению сорбентов на основе целлюлозы и может быть использовано в афинной хроматографии. Изобретение позволяет повысить сорбционную емкость целевого продукта с 1,О до 3,0—

4,9 мг/г, что достигается обработкой 2-(3 -амино-4-Р-метоксифенил)сульфанилэтилового эфира целлюлозы, модифицированного глутаровым альдегидом до содержания альдегидных с групп 0,10-0,16 мг-экв/г, 2-5Х-ным раствором инсулина в карбонатном буфере при рН 9,5-10 и массовом соотношении 2-(3 -амино-4-th-метоксиl фенил) сульфанилэтилового эфира цел-. люлозы и инсулина (2, 2-3,0): (0,220,75). 1 табл. в течение 10 мин .при рН 10,5, отжимают до привеса 100Х, затем 20 мин о запаривают (нагревают при 100 С в атмосфере водяного пара), многократно промывают горячей водой до нейтральной реакции и несколько раз ацетоном, после чего экстрагируют ацетоном в аппарате Сокслета 4 ч и высушивают 5 г полученного эфира целлюлозы помещают в 100 мл 10K-ного раствора глутарового альдегида, полученного разбавлением 40 мл товарного 257ного глутарового альдегида К/Na-фосфатным буфером с рН 6,2 до 100 мл

1578137

Содержание альдегидных групп., 7

Количество сорбируемых антител к инсулину, мг/г (сорбционная емкость) Содержание иммобилизоВид носителя

Соотношение носитель:

:инсулин

Пример ванного инсулина, мг/г

0,1

0,16

0,1

0,247

3, 2

4,9

3;О

1,0

2,8:0,7

3,0:0,75

2,2 0,22

2:0,2

46

28

9,3

СЭЦ

СЭЦ

СЭЦ

ДАЦ

2

4 (по известному способу) Составитель А.Селин

Редактор Т.На зоренко Техред М,Ходанич Корректор И.Кучерявая

Заказ 1889 Тираж 441 Подписное

BHHHIIH Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-и.3дательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101 при модуле 20, выдерживают при перемешивании 24 ч при комнатной температуре, затем многократно промывают водой до полного отсутствия глутароJ лаго альдегида н промывных водах.

Контроль ведется спектрофотометрически при Я = 220 нм. Получают 2-(3-амипо-4-)-метоксифенил)сульфанилэтиловый эфир целлюлозы, модифицированный глутаровым альдегидом (СЭЦ) д содержанием альдегидных трупп 0,1 мг-экв/г.

СЭЦ выдерживают в 57-ном растворе инсулина в карбонатном буфе1 е с рН 9,5 при массовом соотношении СЭЦ: инсулин 15 равном 2,8:0,7, в.течение 30 мин, отжимают до 2-кратного привеса, вновь выдерживают 6 ч при комнатной температуре и 18 ч при 4 C. Затем продукт промывают карбонатным буфером и физиологическим раствором до полного отсутствия инсулина в элюатах.

О

Полученный сорбент содержит 30 мг инсулина на 1 r носителя и имеет сорбционную емкость 3,2 мг/г. 25

П р и м е. р 2 и 3. Выполняют. аналогично примеру 1, но при других значениях параметров.

Пример 4, Выполняют по известному способу с использованием в качестве носителя диальдегидцеллюлбзы (ДАЦ) .

Данные опытов представлены в таблице.

Формула и з о б р е т е н и я

Способ получения сорбента для аффинной хроматографии, включающий обработку носителя на основе целлюлозного текстильного материала, содержащего альдегидные группы, раствором инсулина при комнатной температуре, отличающийся тем, что, с целью повышения сорбционной емкости целевого продукта, в

I качестве носителя используют 2-(3

-амино-4-)-метоксифенил)сульфанилэтиловый эфир целлюлозы, модифицированный глутаровым альдегидом до содержания альдегидных групп 0,100,16 мг-экв/г, а обработку проводят

2-5 -ным раствором инсулина в карбонатном буфере с рН 0,5-10 при массовом соотношении 2-(3 -амино-4-P-!

-метаксифенил)сульфанилэтилового эфи ра целлюлозы и инсулина (2,2-3,0):

:(0,22-0,75).