Способ диагностики криза отторжения почечного трансплантата

Авторы патента:

СЕРНЯК ПЕТР СТЕПАНОВИЧ

БАРИНОВ ЭДУАРД ФЕДОРОВИЧ

ЛУНЕВА АННА ГЕННАДИЕВНА

КОВАЛЕНКО НИКОЛАЙ ВАСИЛЬЕВИЧ

ЧЕРНОБРИВЦЕВ ПЕТР АРТАШЕСОВИЧ

КАЛИНИН ДМИТРИЙ ИЛЬИЧ

G01N33/49 - крови

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинической трансплантологии. Цель изобретения - повышение точности способа. После проведения операции по трансплантации почек У больного в динамике осуществляют забор крови, из которой получают взвесь лейкоцитов. Затем определяют в них активность калийнатриевой атефазной активности и при увеличении этой активности в 5 раз в сравнении с предыдущим исследованием диагностируют криз отторжения почечного трансплантата. В сравнении с прототипом увеличивается точность способа.

„.SU„„1 4 4

СООЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А1 рц С 01 N 33/49

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ST0PCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4455189/14 (22) 05.07.88 (46) 15.05.91, Бюл. Р 18 (71) Донецкий государственный медицинский институт им. И. Горького (72) П.С.Серняк, Э.Ф.Баринов, А.Г.Лу-, нева, Н.В.Коваленко, П.A.×åðíîáðèâöåâ и ДЛ.Калинин (53) 615. 375 (088.8) (56) Зарецкая Ю.М. Клиническая иммуногенетика . - M.: Медицина, 1983, с . 163-16 7. (54) СПОСОБ ДИАГЦОСТИКП КРИЗА ОТТОРЖЕНИЯ ПОЧЕЧНОГО ТРАНСПЛАНТАТА

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинической трансплантологии и транснлантационной иммунологии.

Цель изобретения вЂ” повьппение .точности диагностики криза отторжения.

Способ осуществляют следующим образом.

За 1-1,5 ч до операции и в динамике после нее (можно и ежедневно, если необходимо тщательное наблкдение) осуществляют забор венозной крови в количестве 3 мл с гепарином (25 ЕД на

1 мл забранной крови) . Затем выделяют лимфоциты на фиколл-верографине путем центрифугирования при 1500 об/мин

20 мин.

Выделенные лимфоциты разделяют на две порции и доводят их концентрацию до 2х10 в мл; одну порцию лимфоцитов инкубируют в 1 мл инкубационной сме2 (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинической трансплантологии. Цель изобретения вЂ” повьппение точности способа. После проведения операции по трансглантации почек у больного в динамике осуществляют забор крови, из которой получают взвесь лейкоцитов. Затем определяют в них активность калийнатриевой атефазной активности и при увеличении этой активности в 5 раз в сравнении с предыдущим исследованием диагностируют криз отторжения почечного трансплантата. В сравнении с прототипом увеличивается точность способа.

1 си, содержащей, мМ: NaCl 100; КС1.20;

И8С1< 2,5; этилендиаминтетраацетат (ЭДТА) . 0,5, Та1 1 > 5; трис-HCl рН 7,4

50, при 37 С, а другую порцию лимфоцитов в 1 мп аналогичной инкубационной смеси с добавлением 0,5 MM уабаина в течение 15 мин. После чего в каждую пробирку вводят ж 1 мл раствора аденозинтрифосфат натрия (АТФ-Na<) (2,5 MM) .

Через 20 мин реакцию останавливают путем введения в каждую пробирку . по 1 мл 2,5 мМ трис-ацетатного буфера рН 4,3, содержащего для определения неорганического фосфора 0,27. мо- либдата аммония, и сразу же добавляют 0,2 мп смеси 1% аскорбата и 5 мИ раствора CuSO . Количество неорганического фосфора определяют фотокалориметрически через 20 мин в каждой пробирке при длине волны 735 нм. Кон1649436

Составитель В.Литовченко

Рецактор T.Ëàçîðåíêî Техред g,,иоргентал Корректop T. 1алий

Заказ 1518 Тираж 421 Подписное

ВНИКЛИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãîðîä, ул. Гагарина,101 центрацию неорганического фосфора, образующуюся при распаде АТФ лимфоцитов, рассчитывают по разности концентрации его в среде инкубации без уабаина и в его присутствии.

Через 24 ч повторно берут кровь.

Криэ отторжения почечного трансплантата диагностируют при увеличении концентрации неорганического фосфора, образующегося при распаде АТФ лимфоцитов крови больного более чем в пять раз по сравнению с величиной, определенной в первые сутки после трансплантации почки.

Пример 1. Больная находилась в клинике по поводу хронического гломерулонефрита, ХПН терминальной стадии ° Выполнена трансплантация почки в правую подвздошную область. До пересадки почки концентрация фосфора (P) при распаде АТФ лимфоцитов составляла 0,001 мг Р/мл ч. В послеоперационном периоде больной назначена иммуносупрессивная терапия: метинред

0,5 мг/кг, аэатиоприн 1 мг/кг и сандиммун 8 мг/кг. Функция трансплантата в первые 5 сут была удовлетворительной. Исследование концентрации фосфора при распаде АТФ лимфоцитов на 3-и сутки после операции выявило увеличение до 0 0095 мг Р/мл ч, т.е. увеличение содержания Р увеличилось в

9,5 раз, Клиническая картина криза отторжения имела место на 6-е сутки после операции. Криз купирован стероидами на 10-е сутки после операции, при этом концентрация неорганическопо фосфора составила 0,0019 мг Р/мл-ч.

На 23-и сутки после операции определяли концентрацию неорганического фосфора при распаде АТФ лимфоцитов, она составила 0,0115 мгР/мл ° ч (увеличение по сравнению с исходным было в 11,5 раза). Клинически криз бып диагностирован на 24-е сутки. Лечение

5 криза стероидными гормонами привело к снижению концентрации неорганического фосфора до 0,0019 мг Р/мл ч на

32-е сутки. Функция трансплантата восстановилась на 33-и сутки.

У 17 больных после пересадки почки наблюдали клиническую картину кривоз отторжения трансплантата в 28случаях. При этом увеличение концентрации неорганического фосфора, образующегося при распаде АТФ лимфоцитов реципиентов, более чем в 5 раз наблюдали за 3-4 сут до развития клинической картины. Ложных реакций не наблюToJIbKo B 0gHoM cJI Be KPH3cL

/ торжения наблюдали повышение концентрации неорганического фосфора в

4,5 раза. Таким образом, достоверность диагностики кризов отторжения почечного трансплантата составила

96,57. Предлагаемый способ повышает достоверность диагностики криза отторжения с 42-83 до 96,5Х.

Формула изобретения

Способ диагностики криза отторжения почечного -трансплантата путем забора крови в динамике после операции, определения ферментативной активности, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, определяют аденотрифосфатазную активность в лимфоцитах и при ее увеличении в 5 раз по сравнению с результатом предыдущего исследования диагносцируют криэ отторжения почечного трансплантата.

Изобретение относится к медицине, а именно к биофизическим способам исследования в гематологии

Способ определения срыва терапевтической ремиссии хронического алкоголизма // 1644034

Способ определения антиоксидантной активности липидов крови // 1644033

Изобретение относится к биохимии и предназначено для оценки суммарной окислительной стабильности липидов крови„ Цель изобретения - повышение точности и сокращение времени определения

Способ прогнозирования течения мозгового инсульта // 1640651

Изобретение относится к области медицины, а именно к биохимии, и может быть использовано в неврологии

Способ определения активности инфекционно-воспалительного процесса // 1635138

Изобретение относится к медицине, в частности к диагностике инфекционно-воспалительных заболеваний, и может быть использовано для определения активности инфекционно-воспалительного процесса

Способ диагностики миокардиодистрофии фосфорного генеза // 1631427

Изобретение относится к области медицины , в частности к профпатологии, и может быть использовано для диагностики миокардиодистрофии фосфорного генеза

Способ определения состояния гиперкоагуляции плазмы крови // 1631426

Изобретение относится к лабораторным методам исследования системы свертывания крови

Способ определения гексенала в крови // 1627990

Изобретение относится к медшш- .не, а именно к способам определения лекарственных препаратов в биосредах

Способ оценки обмена тяжелых металлов в организме человека // 1624321

Изобретение относится к области гигиены труда и позволяет оценить обмен тяжелых металлов в организме

Способ определения степени тяжести воспалительного заболевания // 1624320

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для выявления степени тяжести воспалительного заболевания

Способ прогнозирования продолжительности жизни онкологических больных после радикальных операций // 2101704

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано для оптимизации лечебного процесса, выявления ранних рецидивов опухолей

Способ исследования внутрисосудистой агрегации тромбоцитов in vitro // 2102754

Изобретение относится к медицине, к области гематологии, а именно к гемостазу, и может быть использовано для диагностики заболеваний с повышенной тромбогенной опасностью

Способ оценки тяжести состояния больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом // 2104533

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным заболеваниям, и может быть использовано для объективной оценки тяжести геморрагической лихорадки с почечным синдромом

Способ диагностики гельминтоза // 2104534

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам исследования

Способ определения просупероксидной активности выдыхаемого воздуха у больных и здоровых людей // 2104535

Способ диагностики шока при хирургической патологии // 2105980

Изобретение относится к медицине, а именно к способам выделения шока при хирургической патологии, а также оценки тяжести состояния больного и контроля за эффективностью проводимого лечения

Способ диагностики онкологического заболевания // 2108577

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике онкозаболеваний, и позволяет по 0,05 мл крови, взятой из вены пациента, установить наличие онкологического заболевания, путем выявления изменений в спектре многократного нарушенного полного внутреннего отражения (МНПВО) в инфракрасной области в сравнении с МНПВО ИК-спектром крови здорового человека (донора)

Способ оценки эффективности лечения больных железодефицитной анемией на раннем этапе лечения // 2108578

Способ исследования активации и агрегации тромбоцитов // 2108579

Способ диагностики перинатальных нефропатий на стадии предболезни // 2110799