Способ выделения везикулярных транспортных форм холестерина из желчи
Изобретение относится к биологии и медицине, в частности к способам выделения транспортных форм холестерина, их биологических жидкостей путем помещения желчи в центробежное поле, под воздействием которого добиваются изменения концентрации везикулярных транспортных форм холестерина в локальном объеме относительно общей концентрации с последующим отделением сконцентрированных форм холестерина. Целью изобретения является интенсификация способа. Выделение везикулярных транспортных форм холестерина проводят путем обработки желчи раствором дигитонина до ее помещения в центробежное попе
СОЮЗ СОВЕ ТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (я)л G 01 N 33/483
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
1 ) ,Q>
)3 (21) 4716409/14 (22) 07.07.89 (46) 15.09.91, Бюл, ¹ 34 (71) Минский государственный медицинский институт и Центральный научно-исследовательский институт гастроэнтерологии (72) Ю.X.Ìaðàõoâñêèé, С,М,Чебанов и
А.С,Логинов (53) 612.015 (088.8) (56) Gastroentегоlogy, 1985, 88, 1701. (54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ВЕЗИКУЛЯРНЫХ ТРАНСПОРТНЫХ ФОРМ ХОЛЕСТЕРИНА ИЗ ЖЕЛЧИ
Изобретение относится к области биологии и медицины, в частности к способам выделения транспортных форм холестерина из биологических жидкостей, Целью изобретения является интенсификация способа.
Предлагаемый способ осуществляется следующим образом.
Желчь освобождают от возможных примесей путем центрифугирования, Ин кубируют желчь при 37 С в течение не менее 10 мин с внесенным в желчь 0,001 M раствором дигитонина при соотношении объемов. 9:1 (желчь: раствор дигитонина). Проводят центрифугирование (@20000) в течение 10—
30 мин, Отделяют полученный в локальном объеме осадок.
Пример 1. Освобождают желчь от возможных примесей; разводят 0,01 M трис-НС! буфером, рН 7,5 и центрифугируют
30 мин при 6000 об/мин. В подготовленную желчь добавляют 0,001 M раствор дигитони„„5U „„1677631 А1 (57) Изобретение относится к биологии и медицине, в частности к способам выделения транспортных форм холестерина, их биологических жидкостей путем помещения желчи в центробежное поле. под воздействием которого добиваются изменения концентрации везикулярных транспортных форм холестерина в локальном объеме относительно общей концентрации с последующим отделением сконцентрированных форм холестерина, Целью изобретения является интенсификация способа. Выделение везикулярных транспортных форм холестерина проводят путем обработки желчи раствором дигитонина до ее помещения в центробежное поле. на, на 0,9 мл желчь добавляют 0,1 мл раствора дигитонина. Проводят инкубацию пои
37 С в течение не менее 10 мин и центрифугирование при 3000 об/мин в течение 10 мин. Отделяют полученный в локальном объеме осадок. Полученный осадок ресуспензируют в буфере или воде и проводят анализ свойств выделенных частиц.
Пример 2, Выполняют последовательно этапы, указанные в примере 1. Полученные везикулы помещают на подложку и проводят сканирующую электронную микроскопию.
Частицы желчи, выделенные путем обработки дигитонином, по химическому cocTaBv и злектронномикроскопическим характеристикам идентичны везикулярным транспортным формам холестерина жел". .
Суммарное время, необходимое для выделения визикулярных транспортных форм холестерина желчи предлагаемым ""noeoáoì, не превышает 90 мин.
1677631
Формула изобретения
Составитель Л. Конюхова
Техред М.Моргентал Корректор А. Осауленко
Редактор О. Спесивых
Заказ 3111 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35; Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101
Способ выделения веэикулярных транспортных форм холестеринэ из желчи путем проведения центрифугирования желчи с отделением целевого продукта в градиенте плотности, отличающийся тем. что, с целью интенсификации способа, обработку желчи проводят раствором дигитонина до
5 центрифугирования.
