Способ активации лейкоцитов крови человека

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ. (21} 4709579/14 (22) 26.06,89 (46) 07.11,91. Бюл. М 41 (71) Читинский государственный медицинский институт (72) А.В,Краденов и А,В,Степанов (53) 616.07(088.8) (56) Макарова В.И. и др. Влияние стрептолиэина О на фукциональную активность лейкоцитов крови человека. вЂ” Лабораторное дело, 1986, hh 3, с,165-168, Изобретение относится к медицине, а именно к области гематологии и коагулологии.

Цель изобретения вЂ” повышение фибринолитической активности лейкоцитов человека.

Способ осуществляют следующим образом.

Иэ свежезаготовленной цейратной крови человека выделяют после центрифугирования лейковзвесь, которую помещают в питательную среду и добавляют активаторы плазминогена (стрептаза, урокинаэа, террлитин) в концентрации 50 вЂ” 500 ед/мл, инкубируют 20 вЂ” 30 мин при 37 С с добавлением конканавалина А. Лейкоциты отмывают от стимулятора центрифугированием при 1500 об/мин в течение 5 мин.

Активность лейкоцитов оценивают по их способности лизировать фибрин следующим методом: в лунки иммунологических планшетов помещают смесь 50 мкл 1 -ного раствора фибриногена с 50 мкл тромбина

„„5U „„1689855 А1 (54) СПОСОБ АКТИВАЦИИ ЛЕЙКОЦИТОВ

КРОВИ ЧЕЛОВЕКА (57) Изобретение относится к медицине, а именно к области гематологии и коагулологии. Цель изобретения вЂ” повышение фибринолитической активности лейкоцитов человека. Способ осуществляют путем инкубации лейкоцитов человека после выделения их из свежецитратной крови в присутствии активаторов плаэминогена в дозе 50 вЂ” 500 ед/мл в присутствии конканавалина А в концентрации 50 вЂ” 500 мкг/мл.

1 табл. активностью 50 ед/мл, после 30 мин в полученный гель добавляют взвесь исследуемых лейкоцитов. Инкубируют в течение 3 ч и в надосадочной жидкости определяют содержание продуктов деградации фибрина (ПДФ) иммунаферментным мгтодом. Повышение фибринолитической активности лейкоцитов оценивают по отношению ПДФ, полученных при действии активированных лейкоцитов к количеству ПДФ из интактных лейкоцитов.

В качестве стимуляторов используют активаторы плазминогена: урокиназа, стрептаза, террлитин в дозе 50 вЂ” 500 ед/мл.

Наиболее выраженный эффект оказывает. стрептаза. Начиная с дозировки 50 ед/мл все активаторы достоверно увеличивают фибринолитическую активность клеток, а дозировка более 500 ед/мл приводит к разрушению лейкоцитов и к снижению их общей фибринолитической активности.

Лейкоциты инкубируют в присутствии конканавалина А в микродоэах 50-200 мкг/мл.

1689855

Показано, что,фибринолитическая активность лейкоцитов при инкубации с активаторами плазминогена сохраняется в течение 30 мин, добавление конканавалина

А поддерживает ее до 75 мин, 5

Пример, Из свежей цитратной крови выделяют лейкоциты, помещают их в питательную среду 199, содержащую 50 ед/мл стрептаэы и 200 мкс/мл конканавалина А и инкубируют их, в течение 20 мин при 37 С. 10

Концентрация лейкоцитов 2х10 /мол. Затем клетки дважды отмывают от непоглощенного стимулятора и оценивают и фибринолитическу,о активность, которая равна 4,25 мг/мл, а у интактных вЂ” 1,92, Ин- 15 декс стимуляции равен 2,2.

Фибринолитическая активность интактных лейкоцитов равна 1,84+. 0,19 мгlмл.

Сравнительный анализ предлагаемого и известного способов активации лейкоци- 20 тов представлен в таблице, где P > вЂ” достоверность различий между стимулированными и интактными лейкоцитами, Pz вЂ” достоверность различий между стимулированными лейкоцитами по известному и предлагаемому способам, Иэ таблицы видно, что предлагаемый способ позволяет повысить фибринолитическую активность лейкоцитов, Формула изобретения

Способ активации лейкоцитов крови человека путем инкубации цитратной крови в присутствии стимулятора, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения фибринолитической активности лейкоцитов, в качестве стимулятора используют активаторы плазминогена в дозе 5(вЂ” 500 ед/мл в присутствии конканавалина А в концентрации 50200 мкг/мл.

Способ ор итиивность, мг/мл

ПДФ Р

Р2 Индекс стиму(ляции оп=192,М m, Составитель Н,Маркова

Техред M.Ìoðãåíòàë Корректор М.Шароши

Редактор. Е,Папп

Лака 3810 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагаоина. 101

Способ активации лейкоцитов крови человека

Похожие патенты:

Способ диагностики гингивита // 1689854

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии Цель изобретения раннее выявление гингивита

Способ определения клофелина // 1689853

Изобретение относится к медицине, точнее к биохимии, может быть применено при судебно-экспертных исследованиях

Счетная камера // 1689852

Изобретение относится к средствам медицинской лабораторной техники и может быть использовано для анализа микрообъемов различных жидких биосубстратов при медицинских и биохимических исследованиях , в том числе для счета форменных элементов крови

Способ определения тромбоцитообразующей активности мегакариоцитов костного мозга на препарате // 1689791

Способ получения волосяных фолликулов кожи для исследования // 1689790

Изобретение относится к медицине а именно к дерматологии Целью является обеспечение лучшей сохранности и большего расхода фол лик/лов Цель достигается тем, что кожу волосяным покровом кладут на основание, покрытое реологической жидкостью , содержащей диатомит, олеиновое масло и трансформаторное масло

Способ окраски политенных хромосом насекомых // 1688163

Изобретение относится к цитогенетике, в частности К окраске хромосом насекомых

Способ определения протеолиза в желудке жвачных животных // 1687257

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в гастроэнтерологии жвачных животных

Способ обнаружения присутствия вируса иммунодефицита человека или другого вируса, дающего аналогичную клиническую картину // 1687035

Изобретение относится к вирусологии, в частности к способу обнаружения вируса иммунодефицита человека или другого вируса , дающего аналогичную клиническую картину

Способ выявления сериновых протеаз в слезной жидкости при хронических язвах роговой оболочки глаза // 1686359

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и может быть использовано для определения сериновых протеаз в слезной жидкости при хронических язвах роговой оболочки глаза

Способ дифференциальной диагностики типов инсультов // 1686358

Изобретение относится к области медицины , в частности к неврологии, и может быть использовано для диффренциальной диагностики инсультов

Способ контроля состояния сельскохозяйственных и пищевых веществ или лекарственного препарата и устройство для его осуществления // 2100805

Способ определения в пробе цельной крови распределения вероятностей в популяции эритроцитов их подмножеств и устройство для его осуществления // 2100807

Способ определения гетероциклических нитросоединений в биологическом материале // 2100808

Способ выявления лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах // 2101699

Изобретение относится к медицине, а именно к анатомии, топографической анатомии, патологической анатомии и может быть использовано для изучения лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах макромикроскопическом поле видения в норме, в возрастном аспекте, в эксперименте и патологии

Способ ионного парамагнитного резонанса на нервном волокне // 2101700

Изобретение относится к медицине, в частности к способам неинвазивной диагностики функционирования биологических мембран и соответствующей оценке метаболических процессов в организме на клеточном уровне

Способ прогноза хронического рецидивирующего течения заболевания у лиц, перенесших первичную рожу // 2101701

Изобретение относится к медицине, а именно инфекционным болезням и дерматологии, и может найти применение как в стационарных, так и поликлинических условиях

Способ определения реактивного лизиса клеток // 2101702

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской биохимии, и может быть использовано для определения реактивного лизиса клеток в содержащей комплемент биологической жидкости в клинической практике и в научных исследованиях

Способ определения наличия активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите // 2101703

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите путем биохимического исследования сыворотки крови

Способ дифференциальной диагностики миокардита и миокардитического кардиосклероза // 2102749

Устройство для локального подведения биологически активных веществ // 2102750