Способ определения функционального состояния кроветворения у экспериментальных животных

 

Изобретение относится к цитогенетике и разработано на основе выявленной четкой соподчиненности между типами функционально-структурной организации метафазных хромосомных наборов и образованием определенных типов кроветворных клеток в костном мозге С целью осуществления контроля за направлением гемопоэза и выявления патологии осуществляют отбор хромосомных наборов без выбора по степени спирализации, выявляют типы хромосомных наборов и подсчитывают их соотношение. Затем определяют митотическую активность костного мозга. Результаты по интенсивности образования различных типов хромосомных наборов и митотической активности, полученные при действии экстремальных факторов, сравнивают с контролем и выявляют патологию и адаптивные изменения в организме на доклеточном-хромосомном уровне по направлениям дифференцировки профилирующих родоначальных кроветворных клеток. Ё

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) (s1)s А 61 B 10/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4163223/14 (22) 12.11.86 (46) 15.12.91. Бюл. М 46 (71) Воронежский государственный медицинский институт им. Н.Н.Бурденко (72) Л.И,Чабала (53) 615.475(088.8) (56) Орлов В.Н., Чудиновская Г.А., Крюкова

Е.П. Исследование хромосомных наборов млекопитающих. Методическое руководстВо. — M.: Наука, 1976; (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ КРОВЕТВОРЕНИЯ У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ

ЖИВОТНЫХ (57) Изобретение относится к цитогенетике и разработано на основе выявленной четкой соподчиненности между типами функцио- . нально-структурной организации метафазИзобретение относится к цитогенетике и может быть использовано в медико-биологических исследованиях.

Цель изобретения — выявление на более ранней стадии функционального состояния костномозгового кроветворения, на более ранних стадиях развития кроветворных клеток. Способ позволяет осуществлять контроль за направлением перестройки в организме на основе интенсивности дифференцирования мегакариоцитарного, лейкоцитарного и эритроидного рядов кроветворных клеток. ных хромосомных наборов и образованием определенных типов кроветворных клеток в костном мозге. С целью осуществления контроля за направлением гемопоэза и выявления патологии осуществляют отбор хромосомных наборов без выбора по степе- . ни спирализации, выявляют типы хромосомных наборов и подсчитывают их соотношение. Затем определяют митотическую активность костного мозга. Результаты по интенсивности образования различных типов хромосомных наборов и митотической активности, полученные при действии экстремальных факторов, сравнивают с контролем и выявляют патологию и адаптивные изменения в организме на до- . клеточном-хромосомном уровне по направлениям дифференцировки профилирующих родоначальных кроветворных клеток.

Способ осуществляют следующим образом.

На стандартно приготовленных микропрепаратах хромосом из популяции клеток костного мозга проводят анализ метафазных пластинок без выборки по степени Спирализации, но с полным числом, минимальным наложением и четко различимой морфологией хромосом, выявляют их морфологические типы. Путем подсчета в каждой метафазной пластинке числа субтелоцентрических, акроцентрических и метацентрических хромосом определяют типы

1697747 му способу. У нее насчитывали 18,7 хромосомных наборов I типа, 43,8 — 1I типа, 37,5g> — III типа, митотическая активность

14,2 на 1000 клеток. Количество лейкоцитов в периферической крови 7,56 10 /л.

На большом фактическом материале— пяти экспериментальных моделях (гипоксия, спленэктомия, асептическое воспаление, кровопотеря, рентгеновское облучение), прослеженных в динамике, до казано, что по предлагаемому способу возможно точнее осуществлять диагностику состояния костномоэгового кроветворения при изучении экстремальных воздействий физической, химической и биологической природы на организм млекопитающих в медико-биологических исследованиях.

20

Формула изобретения

Составитель А.Древаль

Редактор M.Êoáûëÿícêàÿ Техред M,Moðãeíòàë

Корректор И.Муска

Заказ 4341 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб;, 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, yn,Гагарина, 101 хромосомных наборов в статически достоверных количествах и считают их соотношение. Затем определяют митотическую активность клеток костного мозга путем подсчета клеток в митозе на 1000 просмотренных. Данные митотической активности при различных экстремальных воздействиях сравнивают с результатами обследования контроля и выявляют отклонения.

Пример 1. Крысе(самец массой 180 г) вводили подкожно скипидар из расчета 1 мл на 100 г массы. На третьи сут. после введения скипидара животное умертвляли, готовили препараты xpoMGcoM из костного, мозга по общепринятой методике, Отбор метафазных пластинок хромосом проводили без выборки по степени спиралиэдции, но с полным числОм, минимальййм наложением и четка различимой морфологией хромосом. В каждой такой метафазной пластинке считали общее число и количество субтелоцентрических, акроцентрических и метацентрических хромосом.

Из 42 хромосом набора насчитывали в типе I (мегакариоцитарного ряда) 26 акроцентрических и 14 метацентрических, в типе t t (лейкоцитарного ряда) — 24 акроцентрических и 16 метацентрических, в типе Н! (эритроидного ряда) — 22 акроцентрических и 18 метацентрических и, кроме того, в каждом из них — по одной паре крупных субтелоцентрических аутосом. Затем вычисляли процентное соотношение типов хромосомных наборов. Так, у обследованного животного на третьи сутки в состоянии асептического воспаления обнаружили

22,7 хромосомных наборов 1 типа, 68,2%

ll типа и 9,1 — Ш типа.

Далее определяли митотическую активность путем подсчета клеток в митозе на

6000 просмотренных и делали пересчет на

1000 клеток костного мозга — 25,0 íà 1000.

Содержание лейкоцитов в периферической крови 9,8х 10 /л.

Пример 2. Крысе (самец массой 180 г) контроль и анализ проводили по описанноСпособ определения функционального состояния кроветворения у экспериментальных животных при экстремальном воздействии, заключающийся в отборе для анализа метафазных хромосомных наборов из популяции клеток костного мозга экспериментальных животных, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью раннего выявления изменений, осуществляют отбор метафазных хромосомных наборов без выбора по степени спирализации, подсчитывают в них количество различных морфологических типов хромосом, устанавливают типы хромосомных наборов, определяющих дифференцировку основных рядов кроветворных клеток, и высчитывают их соотношение, при этом определяют митотическую активность клеток костного мозга, а затем сравнивают интенсивность образования различных структурно-функциональных типов хромосомных наборов в контроле и при действии экстремальных факторов по ее изменению определяют функциональное состояние кроветворения.